黄连素调节Hedgehog信号通路对TGF-β1诱导的肝星状细胞增殖和活化的影响

【目的】观察黄连素调节Hedgehog信号通路对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的肝星状细胞增殖和活化的影响。【方法】培养HSC-T6细胞,分为空白组,TGF-β1组,黄连素低、中、高剂量组及黄连素高剂量+purmorphamine(Hedgehog信号通路激活剂)组。分组处理后,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HSC-T6细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫荧光染色法检测细胞Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达水平,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测细胞Hedgehog信号通路相关因子Smo、Gli-1、Shh、Ptch蛋白表达水平。【结果】与空白组比较,TGF-β1组HSC-T6细胞增殖率,CollagenⅠ、α-SMA阳性蛋白表达,PCNA mRNA、Bcl-2 mRNA表达水平及Smo、Gli-1、Shh、Ptch蛋白表达水平显著升高,凋亡率及Bax mRNA表达水平显著降低(均P<0.05);与TGF-β1组比较,黄连素低、中、高剂量组HSC-T6细胞增殖率,CollagenⅠ、α-SMA阳性蛋白表达,PCNA mRNA、Bcl-2 mRNA表达水平及Smo、Gli-1、Shh、Ptch蛋白表达水平显著降低,凋亡率及BaxmRNA表达水平显著升高(均P<0.05),呈剂量依赖性;与黄连素高剂量组比较,黄连素高剂量+purmorphamine组HSC-T6细胞增殖率,CollagenⅠ、α-SMA阳性蛋白表达,PCNA mRNA、Bcl-2 mRNA表达水平及Smo、Gli-1、Shh、Ptch蛋白表达水平显著升高,凋亡率及Bax mRNA表达水平显著降低(均P<0.05)。【结论】黄连素通过调节Hedgehog信号通路促进TGF-β1诱导肝星状细胞凋亡,抑制其增殖和活化。

乙肝肝硬化患者维生素D水平与小肠细菌过度生长关系及与TLR4表达的相关性

目的探讨乙肝肝硬化患者维生素D水平与小肠细菌过度生长关系及与TLR4表达的关系。方法检测乙肝肝硬化患者及健康体检者维生素D水平、小肠细菌生长情况及外周血单个核细胞表面TLR4表达,比较不同组维生素D水平及其与SIBO关系和TLR4表达相关性。结果乙肝肝硬化患者维生素D不足或缺乏率为93.3%(56/60),与健康体检者76.2%(16/21)比较,差异有统计学意义(χ^(2)=4.63,P<0.05),且不同肝功能分级的肝硬化患者维生素D不足或缺乏率不同,Child-Pugh A级与Child-Pugh B/C级比,差异有统计学意义(χ^(2)=4.6,P<0.05)。肝硬化患者维生素D水平较健康体检者明显降低(t=3.3,P<0.01),且肝硬化SIBO阳性患者维生素D水平显著低于SIBO阴性组(t=2.45,P<0.05),而肝硬化SIBO阴性患者维生素D水平与健康体检者相比,差异无统计学意义(t=1.96,P>0.05)。肝硬化SIBO阳性患者维生素D水平与外周血单个核细胞TLR4表达呈负相关(r=-0.57,P<0.01),而健康对照组、肝硬化SIBO阴性组维生素D水平与外周血单个核细胞TLR4表达无相关性(P>0.05)。结论乙肝肝硬化患者广泛存在维生素D不足或缺乏,维生素D水平与SIBO密切相关,且维生素D水平降低与TLR4表达上调相关,维生素D通过与TLR4的作用在肝硬化病情进展中发挥作用。