睡眠节律紊乱复制Alzheimer样大鼠模型的研究探讨

目的探讨睡眠节律紊乱对大鼠记忆能力、超微结构、海马Aβ含量和tau蛋白磷酸化的影响及机制,评价一种非创伤性老年性痴呆大鼠模型的构建方法。方法雄性Wistar大鼠36只,随机均分为正常对照组、弱光组(照度400 lux,24 h持续光照)、强光组(照度800 lux,24 h持续光照),每组12只。光照30 d后,Morris水迷宫检测大鼠空间记忆能力,透射电镜观察海马超微结构的改变,放射免疫法检测海马Aβ含量,免疫组织化学法和Western blot检测海马tau蛋白磷酸化水平。结果与正常对照组比较,弱光组和强光组大鼠寻台潜伏期均显著延长;正常对照组大鼠海马组织超微结构正常;弱光组和强光组大鼠海马组织线粒体肿胀,线粒体嵴模糊或消失,结构破坏;神经突触减少甚至缺失,突触间隙模糊,突触小泡数量减少;海马组织Aβ含量增高,海马CA3区神经纤维tau蛋白磷酸化阳性细胞个数增加,蛋白表达水平增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论睡眠节律紊乱诱导的老年性痴呆动物模型在一定程度上模拟其发病特点,可以用于Alzheimer’s发病机制及其治疗药物的研究。

睡眠节律紊乱诱导阿尔茨海默病大鼠模型的建立与评价

目的研究睡眠节律紊乱对大鼠记忆能力、海马超微结构、海马β-淀粉样蛋白(Aβ)含量和tau蛋白磷酸化的影响及机制,评价非创伤性阿尔茨海默病大鼠模型的构建方法。方法雄性Wistar大鼠36只,随机均分为正常对照组、弱光组和强光组,每组12只。正常对照组大鼠给予自然光照。弱光组和强光组大鼠均给予12 h自然光照、12 h人工光照的24 h持续光照,其中自然光照时间为7∶00至19∶00,人工光照时间为19∶00至次日7∶00,分别用25 W和40 W白炽灯泡悬于鼠笼中央正上方,弱光组大鼠人工光照强度为400 lx,强光组大鼠人工光照强度为800 lx,弱光组和强光组大鼠分别光照30 d。Morris水迷宫检测大鼠空间记忆能力,透射电镜观察海马超微结构的改变,放射免疫法检测海马Aβ含量,Western blotting检测海马tau蛋白磷酸化水平。结果与正常对照组大鼠比较,弱光组和强光组大鼠寻台潜伏期均显著延长(P<0.05),大鼠海马组织Aβ含量显著增高(P<0.05),海马组织PHF-1抗体和tau-1抗体与正常对照组大鼠比较显著增强(P<0.05),而弱光组与强光组大鼠比较差异均无统计学意义(P>0.05)。正常对照组大鼠海马组织超微结构正常;弱光组大鼠海马线粒体结构破坏,线粒体肿胀,线粒体脊断裂,结构紊乱,神经突触密度降低,突触膜增厚,突触间隙不清,突触小泡数量减少;强光组大鼠海马神经元中核变性,线粒体结构模糊,数量减少,突触未见减少,但囊泡显著减少。结论睡眠节律紊乱诱导的阿尔茨海默病大鼠模型是进行阿尔茨海默病发病机制及其治疗药物研究的理想动物模型。

EPO对Aβ1-42所致AD样大鼠皮层神经元树突棘的影响

目的探讨erythropoietin(EPO)对Aβ1-42所致AD样大鼠记忆能力和皮层神经元树突棘的影响及作用机制。方法雄性Wistar大鼠48只随机分为4组:生理盐水组、模型组、EPO治疗组和脑复康阳性对照组,每组12只。其中生理盐水组双侧海马注射生理盐水各5μL,其余3组大鼠双侧海马注射凝聚态β-淀粉样蛋白(Aβ)各5μL造模。EPO治疗组和脑复康阳性对照组从造模手术当天开始腹腔注射EPO(5 000 IU/kg,隔日一次)和脑复康(40 mg/kg,每日一次)。术后第10天Morris水迷宫法检测各组大鼠空间定向学习和记忆能力;利用高尔基染色、连续震荡切片和人工计数的方法,分析各组大鼠皮质神经元树突棘量的改变情况。结果与生理盐水组、EPO治疗组及脑复康组相比,模型组水迷宫测试潜伏期延长,差异均有统计学意义(P<0.05)。与生理盐水组相比,模型组皮质神经元树突棘数目数目减少,EPO治疗组及脑复康对照组数目明显多于模型组(P<0.05);而EPO治疗组及脑复康对照组相比则无明显差异(P>0.05)。结论 EPO可以减轻Aβ1-42对大鼠皮质神经元树突棘的破坏,提高大鼠认知能力。