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干扰长链非编码RNA AFAP1-AS1抑制人鼻咽癌HNE2细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的研究
被引量:
3
1
作者
谢天飞
王凌云
+1 位作者
刘丽
桑建中
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第22期2742-2746,2752,共6页
目的:探讨短发卡RNA(shRNA)干扰长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(lncRNA AFAP1-AS1)对人鼻咽癌(NPC)细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的影响。方法:将HNE2细胞培养制成细胞悬液后分为空白对照组(Control)、阴性对照组(shRNA...
目的:探讨短发卡RNA(shRNA)干扰长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(lncRNA AFAP1-AS1)对人鼻咽癌(NPC)细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的影响。方法:将HNE2细胞培养制成细胞悬液后分为空白对照组(Control)、阴性对照组(shRNA-NC)与lncRNA AFAP1-AS1干扰组(sh-AFAP1-AS1),通过试剂盒转入对应目的片段,进行RT-PCR验证;结晶紫染色法检测细胞增殖,FCM检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,Western blot检测细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平,免疫组织化学法检测VEGF表达TUNEL检测肿瘤组凋亡,将转染sh-AFAP1-AS1成功的HNE2细胞及其阴性对照细胞悬浮液分别于右腋下静脉注入裸鼠体内,以成瘤直径超过5 mm为抑制成功。2周后比较2组裸鼠肿瘤重量、AFAP1-AS1表达量、肿瘤组织细胞凋亡、VEGF表达变化。结果:sh-AFAP1-AS1细胞AFAP1-AS1表达水平和细胞增殖率低于Control组(P<0.05);sh-AFAP1-AS1细胞凋亡率高于Control组(P<0.05);sh-AFAP1-AS1细胞的侵袭率低于Control组(P<0.05),sh-AFAP1-AS1细胞中VEGF和MMP-9蛋白表达水平较Control组显著降低(P<0.05);sh-AFAP1-AS1组裸鼠肿瘤质量、AFAP1-AS1表达量均较Control组降低(P<0.05);sh-AFAP1-AS1组裸鼠肿瘤组织的细胞凋亡率高于Control组(P<0.05),肿瘤组织中VEGF表达量低于Control组(P<0.05)。结论:AFAP1-AS1可能通过调控癌细胞增殖、转移及侵袭相关蛋白表达参与NPC HNE2细胞的增殖、侵袭及转移过程。
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关键词
鼻咽癌
HNE2细胞
长链非编码RNA
肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1
下载PDF
职称材料
嗅黏膜中Caspase-3的表达对嗅神经细胞凋亡的影响
被引量:
1
2
作者
谢天飞
娄卫华
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第11期1434-1437,共4页
目的:探讨大鼠急性鼻窦炎时嗅黏膜中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达对嗅神经细胞(olfactory receptor neurons,ORNs)凋亡的影响。方法:将70只成年SD大鼠,按照配对设计,分成对照组和炎症组,造模后于不同时间取材,采用免疫组...
目的:探讨大鼠急性鼻窦炎时嗅黏膜中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达对嗅神经细胞(olfactory receptor neurons,ORNs)凋亡的影响。方法:将70只成年SD大鼠,按照配对设计,分成对照组和炎症组,造模后于不同时间取材,采用免疫组织化学方法检测嗅黏膜Caspase-3蛋白表达情况,原位细胞DNA断裂检测末端标记(TUNEL)法观察ORNs凋亡变化。结果:免疫组化结果,对照组ORNs中Caspase-3未见明显表达,炎症组ORNs中Caspase-3的表达在接种细菌后第2天开始升高,第5天明显升高(P<0.05),第8天达到高峰(P<0.01),第14天逐渐下降,第21天接近正常(P>0.05)。细菌接种后第2、21天,炎症组TUNEL阳性细胞计数与对照组相比没有统计学意义(P>0.05),第5、8、14天差异有统计学意义(P<0.05)。结论:急性鼻窦炎时Caspase-3的过度表达可能是促进大鼠ORNs凋亡,导致嗅觉功能下降的原因之一。
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关键词
急性鼻窦炎
半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
嗅神经元
细胞凋亡
下载PDF
职称材料
小檗碱通过调控PI3K/Akt通路抑制喉癌细胞生长和转移
被引量:
20
3
作者
谢天飞
王凌云
+1 位作者
刘丽
桑建中
《中国新药与临床杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期43-48,共6页
目的探讨小檗碱对喉癌Hep2细胞增殖、凋亡和侵袭的影响以及相关作用机制。方法培养Hep2细胞分为空白对照组和5、10、20μmol·L-1小檗碱组,CCK-8检测Hep2的增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,划痕实验检测细胞迁移情况,Transwel...
目的探讨小檗碱对喉癌Hep2细胞增殖、凋亡和侵袭的影响以及相关作用机制。方法培养Hep2细胞分为空白对照组和5、10、20μmol·L-1小檗碱组,CCK-8检测Hep2的增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,划痕实验检测细胞迁移情况,Transwell法检测细胞侵袭能力,Western blot法检测凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf1)、剪切后半胱天冬酶(cl-caspase)-9、cl-caspase-3蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和p-p65蛋白表达水平。结果与空白对照组相比,5、10、20μmol·L-1小檗碱组细胞增殖活性显著降低(P <0.01);凋亡细胞百分比显著增加(P <0.01),Apaf1、cl-caspase-9和cl-caspase-3蛋白水平显著上调(P <0.01);划痕愈合率显著降低(P <0.01),侵袭细胞数目显著减少(P <0.01);细胞中VEGF、MMP-2、MMP-9、PI3K、p-Akt、p-p65蛋白水平显著降低(P <0.01),且均呈浓度依赖性。结论小檗碱通过调控PI3K/Akt通路抑制喉癌细胞增殖、侵袭和迁移,诱导细胞凋亡。
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关键词
小檗碱
喉肿瘤
细胞增殖
细胞凋亡
肿瘤侵润
原文传递
题名
干扰长链非编码RNA AFAP1-AS1抑制人鼻咽癌HNE2细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的研究
被引量:
3
1
作者
谢天飞
王凌云
刘丽
桑建中
机构
河南医学高等专科学校耳鼻咽喉科
漯河市中医院中医
科
河南
医学
高等
专科学校
医学
系
郑州大学第一附属医院
耳
鼻
咽喉
科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第22期2742-2746,2752,共6页
基金
河南省科技攻关计划项目(162102310548)。
文摘
目的:探讨短发卡RNA(shRNA)干扰长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(lncRNA AFAP1-AS1)对人鼻咽癌(NPC)细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的影响。方法:将HNE2细胞培养制成细胞悬液后分为空白对照组(Control)、阴性对照组(shRNA-NC)与lncRNA AFAP1-AS1干扰组(sh-AFAP1-AS1),通过试剂盒转入对应目的片段,进行RT-PCR验证;结晶紫染色法检测细胞增殖,FCM检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,Western blot检测细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平,免疫组织化学法检测VEGF表达TUNEL检测肿瘤组凋亡,将转染sh-AFAP1-AS1成功的HNE2细胞及其阴性对照细胞悬浮液分别于右腋下静脉注入裸鼠体内,以成瘤直径超过5 mm为抑制成功。2周后比较2组裸鼠肿瘤重量、AFAP1-AS1表达量、肿瘤组织细胞凋亡、VEGF表达变化。结果:sh-AFAP1-AS1细胞AFAP1-AS1表达水平和细胞增殖率低于Control组(P<0.05);sh-AFAP1-AS1细胞凋亡率高于Control组(P<0.05);sh-AFAP1-AS1细胞的侵袭率低于Control组(P<0.05),sh-AFAP1-AS1细胞中VEGF和MMP-9蛋白表达水平较Control组显著降低(P<0.05);sh-AFAP1-AS1组裸鼠肿瘤质量、AFAP1-AS1表达量均较Control组降低(P<0.05);sh-AFAP1-AS1组裸鼠肿瘤组织的细胞凋亡率高于Control组(P<0.05),肿瘤组织中VEGF表达量低于Control组(P<0.05)。结论:AFAP1-AS1可能通过调控癌细胞增殖、转移及侵袭相关蛋白表达参与NPC HNE2细胞的增殖、侵袭及转移过程。
关键词
鼻咽癌
HNE2细胞
长链非编码RNA
肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1
Keywords
Nasopharyngeal carcinoma
HNE2 cell
Long-chain non-coding RNA
Actin filament-associated protein 1-antisense RNA1
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
嗅黏膜中Caspase-3的表达对嗅神经细胞凋亡的影响
被引量:
1
2
作者
谢天飞
娄卫华
机构
河南医学高等专科学校耳鼻咽喉科
郑州大学第一附属医院
耳
鼻
咽喉
科
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第11期1434-1437,共4页
文摘
目的:探讨大鼠急性鼻窦炎时嗅黏膜中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达对嗅神经细胞(olfactory receptor neurons,ORNs)凋亡的影响。方法:将70只成年SD大鼠,按照配对设计,分成对照组和炎症组,造模后于不同时间取材,采用免疫组织化学方法检测嗅黏膜Caspase-3蛋白表达情况,原位细胞DNA断裂检测末端标记(TUNEL)法观察ORNs凋亡变化。结果:免疫组化结果,对照组ORNs中Caspase-3未见明显表达,炎症组ORNs中Caspase-3的表达在接种细菌后第2天开始升高,第5天明显升高(P<0.05),第8天达到高峰(P<0.01),第14天逐渐下降,第21天接近正常(P>0.05)。细菌接种后第2、21天,炎症组TUNEL阳性细胞计数与对照组相比没有统计学意义(P>0.05),第5、8、14天差异有统计学意义(P<0.05)。结论:急性鼻窦炎时Caspase-3的过度表达可能是促进大鼠ORNs凋亡,导致嗅觉功能下降的原因之一。
关键词
急性鼻窦炎
半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
嗅神经元
细胞凋亡
Keywords
acute nasosinusitis
Caspase-3
olfactory receptor neurons
cell apoptosis
分类号
R765.41 [医药卫生—耳鼻咽喉科]
下载PDF
职称材料
题名
小檗碱通过调控PI3K/Akt通路抑制喉癌细胞生长和转移
被引量:
20
3
作者
谢天飞
王凌云
刘丽
桑建中
机构
河南医学高等专科学校耳鼻咽喉科
河南
医学
高等
专科学校
医学
系
漯河市中医院中医
科
郑州大学第一附属医院
耳
鼻
咽喉
科
出处
《中国新药与临床杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期43-48,共6页
基金
河南省科技攻关计划项目(162102310548)
文摘
目的探讨小檗碱对喉癌Hep2细胞增殖、凋亡和侵袭的影响以及相关作用机制。方法培养Hep2细胞分为空白对照组和5、10、20μmol·L-1小檗碱组,CCK-8检测Hep2的增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,划痕实验检测细胞迁移情况,Transwell法检测细胞侵袭能力,Western blot法检测凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf1)、剪切后半胱天冬酶(cl-caspase)-9、cl-caspase-3蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和p-p65蛋白表达水平。结果与空白对照组相比,5、10、20μmol·L-1小檗碱组细胞增殖活性显著降低(P <0.01);凋亡细胞百分比显著增加(P <0.01),Apaf1、cl-caspase-9和cl-caspase-3蛋白水平显著上调(P <0.01);划痕愈合率显著降低(P <0.01),侵袭细胞数目显著减少(P <0.01);细胞中VEGF、MMP-2、MMP-9、PI3K、p-Akt、p-p65蛋白水平显著降低(P <0.01),且均呈浓度依赖性。结论小檗碱通过调控PI3K/Akt通路抑制喉癌细胞增殖、侵袭和迁移,诱导细胞凋亡。
关键词
小檗碱
喉肿瘤
细胞增殖
细胞凋亡
肿瘤侵润
Keywords
berberine
laryngeal neoplasms
cell proliferation
apoptosis
neoplasm invasiveness
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
干扰长链非编码RNA AFAP1-AS1抑制人鼻咽癌HNE2细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的研究
谢天飞
王凌云
刘丽
桑建中
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
3
下载PDF
职称材料
2
嗅黏膜中Caspase-3的表达对嗅神经细胞凋亡的影响
谢天飞
娄卫华
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
1
下载PDF
职称材料
3
小檗碱通过调控PI3K/Akt通路抑制喉癌细胞生长和转移
谢天飞
王凌云
刘丽
桑建中
《中国新药与临床杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
20
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