蝎毒素Ⅳ分离、纯化研究

取东亚钳蝎毒４ｍｌ，用０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸钠缓冲液（ｐＨ７．４）稀释，在４℃条件下，１５０００ｒ／ｍｉｎ离心１５ｍｉｎ，取上清上柱（ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０，长１８０ｃｍ，流速１～１．５ｍｌ／ｍｉｎ）。蝎毒经分离可得１１个组分，取ＳＶＣ－Ⅳ再次柱层析（ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５，长４０ｃｍ，流速２～２．５ｍｌ／ｍｉｎ）以脱盐，经真空冷冻干燥，置－１０℃以下贮藏，生物活性可保持５ａ以上。蝎毒在聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示１２条带以上，而ＳＶＣ－Ⅳ呈现出单一条带，相对分子质量为８５００～９０００。

蝎毒素Ⅳ在大鼠脊髓中的镇痛作用及其机理的研究

蛛网膜下腔插管大鼠模型２５只，随机等分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ５组，分别经插管注入蝎毒素Ⅳ１μｇ／ｋｇ，纳络酮１６μｇ／ｋｇ＋蝎毒素Ⅳ１μｇ／ｋｇ，吗啡３２μｇ／ｋｇ，纳络酮１６μｇ／ｋｇ＋吗啡３２μｇ／ｋｇ，纳络酮１６μｇ／ｋｇ。以屈肌反射作为疼痛指标，观察蝎毒素Ⅳ在脊髓的镇痛作用及纳络酮对蝎毒素Ⅳ作用的影响并与吗啡进行对比观察。结果蝎毒素Ⅳ注入５～２０ｍｉｎ和９０～１２０ｍｉｎ内屈肌反射被显著抑制（Ｐ＜０．０１），表现为屈肌反射阈值升高及Ｃ波潜伏期延长；此种抑制不能被纳络酮消除。提示蝎毒素Ⅳ在脊髓具有一定的镇痛作用；其发挥镇痛作用的机制不同于吗啡。

蝎毒镇痛酊抑制大鼠躯体痛实验研究

Ｗｉｓｔａｒ大鼠１００只，随机分为１０组，每组１０只。５组动物用于注射Ｆｏｒｍａｌｉｎ致痛模型镇痛实验：动物注射Ｆｏｒｍａｌｉｎ液后１ｍｉｎ开始涂蝎毒镇痛酊或生理盐水（其中１组于注射前３０ｍｉｎ口服阿斯匹林，观察早反应及迟反应。另５组动物用于神经干结扎慢性痛镇痛模型：戊巴比妥钠腹腔麻醉，在镜下于腓总神经与胫神经分支处结扎神经干，４８ｈ后分别涂蝎毒镇痛酊、生理盐水或口服阿斯匹林，第２０ｄ记录肌电变化。结果：蝎毒镇痛酊外用，对大鼠注射Ｆｏｒｍａｌｉｎ引起阵发性肌电发放、神经干结扎慢性痛及结扎后自残率均有显著的抑制作用，并具有一定的剂量效应关系。提示蝎毒镇痛酊对急、慢性躯体痛具有抑制作用。

蝎毒素Ⅳ尾静脉注入后的镇痛作用

大鼠中脑上端切断模型３０只，随机等分为Ａ、Ｂ、Ｃ３组，经尾静脉分别注入蝎毒素Ⅳ（ＳＶＣ－Ⅳ）１３０μｇ／ｋｇ，吗啡６００μｇ／ｋｇ及生理盐水，以大鼠缩腿潜伏期和屈肌反射为测痛指标，观察ＳＶＣ－Ⅳ尾静脉注入后的镇痛作用并与吗啡的作用进行比较。结果：Ａ组ＳＶＣ－Ⅳ注入后３０ｍｉｎ之内缩腿潜伏期明显延长，２０ｍｉｎ左右延长最明显，屈肌反射Ａ波波幅于１０～４０ｍｉｎ内明显受到压抑，２０ｍｉｎ左右最大Ａ波抑制率为（９６．１±８．９）％；Ｂ组吗啡注入后Ａ波波幅的压抑限于１０～４０ｍｉｎ，３０ｍｉｎＡ波最大抑制率为（８７．４±８．２）％；Ｃ组屈肌反射无明显变化。结果提示：ＳＶＣ－Ⅳ静脉给药具有镇痛作用，其镇痛作用强于吗啡。

静脉注射蝎毒素Ⅳ小鼠LD_（50）测定

静脉注射蝎毒素Ⅳ小鼠ＬＤ_（５０）测定李国栋，郑湘豫，陈秋菊，王成裕，韩雪飞，陈华艳，孔天翰河南医科大学医学实验中心生物毒素研究室郑州４５００５２河南医科大学第一附属医院郑州４５００５２关键词蝎毒；ＬＤ_（５０）；静脉注射；小鼠蝎毒素Ⅳ（Ｓｃｏｒｐｉｏ...

蝎毒纯化因子Ⅱ对大鼠神经肌肉兴奋性的影响

雄性大鼠２１只（体重２００～２５０ｇ），随机分为Ａ、Ｂ、Ｃ三组，氨基甲酸乙酯（１ｇ／ｋｇ）腹腔麻醉，双针记录电极置于右侧股二头肌以记录肌电，双侧腋窝皮下埋藏板状电极以引导心电信号。肌电信号及心电信号，经生物信号处理系统（ＳＭＵＰ－ＰＣ）Ｚ自动记录心电幅值、频率及屈肌反射阈值、潜伏期，并进行定量分析处理。尾静脉注射蝎毒纯化因子Ⅱ（ＡＦＳＶＣ－Ⅱ）的剂量，Ａ组为４３μｇ／ｋｇ，Ｂ组为６５μｇ／ｋｇ，Ｃ组为１３０μｇ／ｋｇ，注入容量均为０．３ｍｌ。ＡＦＳＶＣⅡ注射前及注射后（每隔１０ｍｉｎ测定１次，８０ｍｉｎ停止观察）分别对上述各项生理指标进行测定。结果：ＡＦＳＶＣ－Ⅱ尾静脉注射４３～６５μｇ／ｋｇ对心电幅值没有显著影响，但注射１３０μｇ／ｋｇ１０～３０ｍｉｎ，可明显减低心电幅值；ＡＦＳＶＣ－Ⅱ尾静脉注射４３～６５μｇ／ｋｇ对屈肌反射没有显著影响，但注射１３０μｇ／ｋｇ１０～３０ｍｉｎ，可明显减低神经肌肉的兴奋性及减慢神经传导的速度。提示：蝎毒可通过抑制Ｎａ＋通道，从而明显降低神经肌肉的兴奋性。