河南省庚型肝炎病毒感染情况和基因变异的研究

目的：为了探讨河南省庚型肝炎病毒的感染情况和河南株庚型肝炎病毒基因的变异特征。方法：利用逆转录——巢式——聚合酶链反应检测庚型肝炎病毒ＲＮＡ。将扩增产物克隆入Ｔ载体，进行测序和分析。结果：非甲－非成型肝炎中庚型肝炎病毒ＲＮＡ阳性率为３．３３％（１／３０），在丙型肝炎患者中阳性率为６％（３／５０），献血员中阳性率为０．５％（１／２００），对河南株庚型肝炎病毒ＲＮＡ阳性扩增、克隆、测序，与ＧｅｎＢａｎｋ中ＨＧＶ对应位置序列的同源性为９０％～９８．８％。结论：河南省存在反型肝炎病毒的感染者，ＨＧＶ与ＨＣＶ有重叠感染的现象，献血员中有ＨＧＶ携带者。河南株庚型肝炎病毒部分基因序列与已报道的序列均不完全一致，与国内分离株的同源性高于国外分离株。

正常人与重症肌无力患者胸腺提取液免疫活性比较

用~３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察不同稀释度的正常人与重症肌无力患者胸腺提取液对健康成人外周血淋巴细胞增殖的影响。实验证实了正常儿童的胸腺功能下降（高浓度Ｐ＜０．０２，余浓度Ｐ＞０．０５），成人胸腺无功能（Ｐ＞０．０５）；并且得出增生型重症肌无力胸腺提取液对ＰＨＡ诱导的人外周血淋巴细胞增殖有促进和抑制双向作用。提示重症肌无力患者的胸腺免疫活性与正常人比较有差异。解释并肯定了手术切除胸腺治疗增生型重症肌无力的作用。

用PCR体外定点突变技术诱导霍乱毒素A亚基突变体的构建

目的： 有效去除霍乱毒素Ａ 亚基（ ＣＴＡ） 的毒性作用而保存其佐剂性能。方法： 采用ＰＣＲ 体外定点突变技术（ＰＣＲＳＤＭ） ，设计两对引物，引入一个突变位点，通过重叠延伸法两次ＰＣＲ 扩增，使ＣＴＡ 编码基因第６３ 位密码子由ＣＴＣ 突变为ＴＴＴ，亦将扩增片断克隆入ＰＵＣ１９ 载体。结果： ＤＮＡ 测序结果表明在预期位点已发生突变，用ＰＣＲ 诱导成功ＣＴＡ 突变体。结论： ＰＣＲ 诱导突变准确、简便，为深入研究ＣＴ

TTV蛋白抗原在大肠杆菌中的表达

目的 :用原核系统表达TTV的重组蛋白抗原 ,建立诊断TTV感染的特异性方法。方法 :采用PCR方法扩增TTVORF2 基因 ,将之插入到测序质粒载体中进行测序 ,验证序列正确后再嵌入到原核表达载体pQE30 ,并转化大肠杆菌M15菌株 ,进行诱导表达。用SDS PAGE分析表达产物。表达产物经Ni NTA柱层析纯化后 ,得到纯度为90 %的ORF蛋白抗原。用TTV感染者的阳性血清对该蛋白进行了Western BlotBlotting分析。结果 :经IPTG诱导后 ,筛选出 2株高表达株。结论

HLA-DR快速基因分型PCR-SSP方法的建立

目的：探讨应用于器官移植配型及疾病相关性分析的方法及基本数据，建立一种高分辨率、高特异性、简单、快速、方便的ＨＬＡＤＲ基因分析方法。方法：利用ＤＲ１～ＤＲ１８序列特异性引物及１对内对照引物，采用序列特异性引物聚合酶链式反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｉｍｅｒｓ，ＰＣＰＳＳＰ）技术对２２份国际标准细胞株ＤＮＡ及２０例未知ＤＲ型别的临床血液标本进行ＨＬＡＤＲ基因分析，扩增条件为：变性９４℃，６０ｓ；退火６５℃，６０ｓ；延伸７２℃，６０ｓ。２５个循环后，７２℃保温７ｍｉｎ。结果：对各个标准ＤＮＡ的分型结果显示，准确率及重复率均为１００％，无假阳性及假阴性。结论：该方法快速、简便、灵敏、重复性好，结果易于判断，适合临床器官移植组织配型、疾病相关性分析、法医鉴定及人类学研究等。

HBV、HCV在原发性肝癌发生中的相互作用研究

为了解河南省原发性肝癌（PHC）发生中HBV、HCV的相互作用，我们应用ELISA法和PCR法对PHC患者及其1：1对照进行了HBV标志物（HBVM）和HCV标志物（HCVM）检测。结果：PHC患者HBVM阳性率为81．25％，对照组HBVM阳性率为9．60％，P＜0.01，OR=70（25．36，193．23）；PHC患者HCVM阳性率为19．79%，对照组HCVM阳性率为8.33％，P＜0.05，OR＝2．57（1．11，5．95）；PHC患者HBVM、HCVM双重阳性率为18．75％，对照组双重阳性率为1.04％，将HBVM和（或）HCVM阳性看成不同的暴露等级与HBVM和HCVM均阴性组进行比较，得到HBV和HCV双重感染时的OR值为83.65，明显高于两者分别感染的OR值（34．85和1．58）之积。结果提示：HBV、HCV在PHC的发生中有显著的病因协同作用。

实验性家兔脑外伤对脾淋巴细胞增殖的影响

目的 :颅脑损伤后免疫功能的变化是影响临床表现和治疗效果的重要因素之一 ,故通过研究脑损伤后机体免疫功能变化规律可望为提高治疗效果提供参考。方法 :3 0只家兔随机平均分为A、B、C 3组。A组 :正常对照组 ;B组 :脑挫裂伤组 ,硬膜外打击法造成动物模型 ;C组 :脊髓横断组 ,脊髓直接切断法造成动物模型。通过进行家兔脾淋巴细胞的增殖实验和观察损伤后 1d、3d、7d、15d家兔血清对脾细胞增殖的影响来测定家兔脑损伤后免疫功能的变化。结果 :脑挫裂伤组 (B)脾淋巴细胞增殖指数显著高于正常对照组 (A)和脊髓横断组 (C) (P >0 0 5 )。A、C 2组比较差异不显著 (P >0 0 5 )。B、C 2组血清对脾细胞增殖有显著抑制作用 ,但两者相比差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :脑组织受损后对机体免疫有增强作用 ,而脊髓损伤则无此作用。脑、脊髓损伤后动物血清中会产生免疫抑制因子。

指状青霉诱发大鼠细胞DNA突变效应研究

目的 :研究指状青霉 (Penicilliumdigitatum)的致突变效应。方法 :采用E .coliND 16 0菌株 ,大鼠肺及肝原代细胞非程序DNA合成 (UDS)试验和E .coliK12infA基因突变试验及infA基因序列测定和分析。结果 :指状青霉提取物 :①可明显地诱发E .coliND 16 0菌株回复突变 ;②可明显诱导大鼠肝原代细胞UDS((P <0 .0 5 ) ,极显著诱导肺原代细胞UDS(P <0 .0 1) ;③可诱导E .coliK12infA基因DNA序列中 5个碱基位点突变 ,且其中 1个位点的突变还可导致编码相应氨基酸的变异。结论

指状青霉致突变性研究

目的：研究指状青霉（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄｉｇｉｔａｔｕｍ）提取物的致突变性。方法：采用了细菌回复突变试验，小鼠骨髓 ＰＣＥ微核试验，大鼠肺及肝原代细胞程序外ＤＮＡ合成试验（ＵＤＳ）和大肠杆菌 Ｋ１２ ｉｎｆａ基因突变试验及 ｉｎｆＡ基因 序列测定和分析。结果：指状青霉提取物：①可明显地诱发大肠杆菌ＮＤ－１６０菌株回复突变；②可使小鼠骨髓 ＰＣＥ微核率极显著增高（Ｐ＜０．０１）；③可显著诱导大鼠肝原代细胞ＵＤＳ（Ｐ＜０．０５）及极显著诱导肺原代细胞ＵＤＳ （Ｐ＜０．０１）；④可诱发大肠杆菌Ｋ１２ ｉｎｆＡ基因ＤＮＡ序列中５个碱基位点突变，且其中１个位点的突变还可导致翻 译相应氨基酸的变异。结论：指状青霉对原核细胞和真核细胞，无论在体内或体外均有致突变活性。

几种受体激动剂对IFN-γ诱导人单核细胞HLA-DR抗原表达的影响

用细胞体外培养的方法，探讨了几种受体激动剂对人外周血单核细胞ＨＬＡＤＲ抗原表达的影响。结果显示：①去甲肾上腺素（ｎｏｒａｄｒｅｎａｌｉｎｅ，ＮＡ）对ＩＦＮγ诱导ＨＬＡＤＲ抗原表达具有双向调节作用。１０－１２，１０－１０ｍｏｌ／ＬＮＡ具有促进作用；１０－６，１０－４ｍｏｌ／ＬＮＡ呈现抑制作用。相应α受体阻断剂１０－５ｍｏｌ／Ｌ酚妥拉明（ｐｈｅｎｔｏｌａｍｉｎｅ）可以完全阻断其促进作用，而对抑制作用的阻断则不明显。②１０－１０～１０－４ｍｏｌ／Ｌ异丙肾上腺素（ｉｓｏｐｒｏｔｅｒｅｎｏｌ，ＩＳＯ）对ＩＦＮγ诱导ＨＬＡＤＲ抗原表达具有抑制作用，抑制程度随ＩＳＯ浓度的增加而加强，且这种作用可被１０－５ｍｏｌ／Ｌ普洛萘尔（ｐｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ）完全或部分阻断。③毛果芸香碱（ｐｉｌｏｃａｒｐｉｎｅ）１０－１１～１０－３ｍｏｌ／Ｌ对ＩＦＮγ诱导ＨＬＡＤＲ抗原表达无明显影响。

肾移植患者人巨细胞病毒的检测

采用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ方法对１１例肾移植者的巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染情况进行了研究。在术前及术后的４周内，对其外周血及尿中病毒和血清中ＩｇＡ及ＩｇＭ抗体进行了连续检测。结果显示：有６例在移植后出现巨细胞病毒感染，感染率为５４％（６／１１）。血、尿中ＨＣＭＶＤＮＡ或ＨＣＭＶ抗体（ＩｇＡ或ＩｇＭ）阳性。提示：用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ方法对肾移植病人的ＨＣＭＶ感染情况进行监测，对预防和治疗ＨＣＭＶ感染和提高肾移植的成功率有着重要的意义。

胸腺树突状细胞

胸腺树突状细胞（ＤＣ）是参与Ｔ 细胞发育过程中阴性选择的重要细胞，它来源于造血干细胞，并在胸腺微环境内，经胸腺前体细胞发育而来，它既表达非特异性的共同标志，又可表达特异性的自身标志和共刺激分子，这不仅提示它的发育过程，同时也与它在阴性选择过程中的作用密切相关。

共凝试验快速检测淋球菌

共凝试验快速检测淋球菌阮丽荣，李智勤，冯羡菊（河南医科大学微生物与免疫学教研室郑州４５００５２）关键词共凝试验，淋球菌，检测目前淋病诊断主要根据病史，革兰染色和细菌培养来确诊。但上述方法漏诊率高，给临床诊断带来一定困难，作者应用共凝试验检测淋病奈瑟菌...

血管生成与肿瘤

血管生成(angiogenesis)是新生血管产生的一个基本过程。生殖、发育和创伤愈合都必须有血管生成。毛细血管的内皮细胞和周皮细胞带有形成管状、分支和全部毛细血管网络的全套遗传信息。特定的血管生成因子可启动这个过程,而特殊的抑制因子又可中止这个过程。生理情况下。

γδT细胞的研究进展

γδＴ淋巴细胞抗原识别受体（γδＴＣＲ），主要分布于皮下、肠道等粘膜的细胞中，约占人外周血成熟Ｔ细胞的３％～１０％。研究表明其既能分泌多种细胞因子又能参与细胞毒作用。此类细胞在感染免疫，自身免疫病，肿瘤免疫等方面的行为受到众多学者的关注。

幽门螺杆菌相关性十二指肠溃疡治疗的探讨

幽门螺杆菌相关性十二指肠溃疡治疗的探讨刘占举，徐志林，王盛典十二指肠溃疡（ＤＵ）合并幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染日益受到重视，为研究Ｈｐ在ＤＵ治疗及复发中的作用，我们采用联合枸椽酸铋钾颗粒、四环素及甲硝唑治疗同安慰剂进行对比研究，以明确溃疡复发与Ｈｐ清除关...

人胎脑垂体细胞移植于裸鼠的研究

将胎龄为１８～３２周的水囊引产死胎之脑垂体进行体外培养，然后分为培养细胞移植组、未培养垂体组织块移植组和培养液对照组，将移植物移植于ＢＡＬＢ／ｃ裸鼠的背侧颈部皮下。定期取血清用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ法）测卵泡刺激素和黄体生成素。三组间激素水平的差异均有显著性，培养细胞移植组３０天内激素水平一直维持于较高水平。表明经培养的垂体细胞行动物背侧颈部皮下移植，能在动物体内存活，并具分泌功能。