厌氧棒菌苗存放10年的生物活性观察

厌氧棒状杆菌(corynebacterium parvum,PC)是巨噬细胞的一种强有力生物佐剂,具有激活网状内皮系统及抑瘤性能。因此在人及实验动物肿瘤免疫治疗中,继卡介苗之后作为非特异性免疫激活剂而被广泛研究和试用于临床,并取得了一定的疗效。由于厌氧棒菌苗是死疫苗,它的生物活性能保持多长时间,目前国内尚未见报道。为此,我们将存放10年的厌氧棒菌苗对其网状内皮系统刺激活性及抑瘤活性进行了观察。

鼠伤寒沙门氏菌porin蛋白免疫原性的研究

用从鼠伤寒沙门氏菌（STM）中提取的微孔蛋白porin免疫BALB／c小鼠，不仅能产生高效价的抗体，还能出现典型的迟发型变态反应（DTH）和白细胞介素－2（IL－2）。以500LD50鼠伤寒沙门氏菌攻击，其保护率为70％，提示STM－porin具有较强的免疫原性。

鼠伤寒沙门氏菌外膜蛋白诱导BALB／C小鼠免疫保护的实验研究

本实验采用超声破碎、ＴｒｉｔｏｎＸ－１００处理和超速离心技术提取了鼠伤寒沙门氏菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｔｙｈｉｍｕｒｉｕｍ，ＳＴＭ）的外膜蛋白（Ｏｕｔｅｒｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＯＭＰｓ），其中脂多糖（ＬＰＳ）的含量约为５％。ＯＭＰｓ经ＳＤＳ—ＰＡＧＥ显示１０余条蛋白带。对ＯＭＰｓ诱发ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠产生典型的迟发型变态反应（ＤＴＨ）进行了检测。经腹腔免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠用５００ＬＤ５０鼠伤寒沙门氏菌（５０１１５）攻击，１００％可得到保护；用５００ＬＤ５０伤寒杆菌（Ｅ６８６）攻击，３３．３％可得到交叉保护。免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的Ｔ淋巴细胞经尾静脉注射至非免疫小鼠，被动免疫保护率为８５．７％。上述结果说明ＳＴＭ—ＯＭＰｓ能诱发ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠保护免疫，是一良好的保护性抗原。

食管癌患者红细胞免疫功能测定

采用红细胞酵母菌花环法检测５６例食管癌患者红细胞免疫功能。结果：食管癌患者红细胞免疫功能显著降低，降低程度与食管癌病理分期及转移率、转移度有关。提示：红细胞免疫功能的测定对于判断食管癌病情进展具有重要临床价值。

酶联免疫吸附试验检测食管癌高、低发区粮食中交链孢酚单甲醚的研究

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）方法，分别对食管癌高发区林县和低发区商丘各６４份粮食（玉米３２份、小麦３２份）中交链孢酚单甲醚（ＡＭＥ）进行检测。结果：林县６４份粮食中检出ＡＭＥ２５份，阳性率为４０．３％；商丘６４份粮食中有１５份阳性，阳性率为２３．４％。两者比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。不论是小麦还是玉米，ＡＭＥ含量林县均高于商丘，这与粮食中互隔交链孢霉污染情况相符。结果提示：ＡＭＥ可能是人食管癌的病因之一。

交链孢酚单甲醚(AME)特异性抗体研制(Ⅰ)

交链孢霉是污染粮食、蔬菜、烟草等植物的常见霉菌,该霉菌能产生多种毒性代谢物,交链孢酚单甲醚(Alternariol Monomethyl Ether简称AME)是其中主要毒素之一,本文介绍了将AME重氮化,然后将AME偶氮化合物与牛血清白蛋白(BSA)进行交联制成完全抗原,用AME-BSA完全抗原免疫家兔制备抗AME抗体。并将AME标记上半乳糖苷酶,用标准AME与之竞争,通过ELISA竞争试验,绘出标准曲线图,证明所制备的抗AME抗体能与标准AME进行特异性结合,可用于粮食中AME含量的检测。

肺癌患者血淋巴细胞多环芳烃羟化酶的诱导性

采用荧光分光光度法测定２９例肺癌患者和３０例肺部良性疾病患者培养血淋巴细胞多环芳烃羟化酶（ＡＨＨ）活性及诱导性。结果发现肺癌患者的血淋巴细胞ＡＨＨ诱导性（３．７８±０．９９）与健康人的（２．３６±０．７９）和肺部良性疾病患者的（２．３９±０．７４）相比均有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）。将诱导性分为高、中、低三种类型，健康人的高、中、低诱导性分别为：９．６８％，３２．３６％和５８．０６％；肺部良性疾患组分别为：１０．００％，４３．３３％和４６．６７％，而肺癌组分别为：５５．１７％，３４．４８％和１０．３５％，结果表明肺癌组高、中诱导性的多，低诱导性的少，提示：肺癌的易感性可能与人血淋巴细胞ＡＨＨ高诱导性有关；检测人血中ＡＨＨ诱导性将有助于筛选肺癌的易感人群及肺癌的预防。

肺癌患者血淋巴细胞芳香烃羟化酶诱导性及血清脂质过氧化水平测定

采用荧光分光光度法、亚硝酸盐形成法和硫代巴比妥酸法测定肺癌患者（肺癌组）和肺部良性疾病患者（良性组）培养血淋巴细胞芳香烃羟化酶（ＡＨＨ）诱导性和血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性及脂质过氧化物（ＬＰＯ）水平。结果显示：肺癌组ＡＨＨ诱导性比健康组和良性组显著增加（Ｐ＜００１），其高、中诱导性为５５１７％、３４４８％；血清ＳＯＤ活性肺癌组比健康组和肺部良性疾患组显著下降（Ｐ＜００５）；ＬＰＯ水平随病变进展明显升高，组间有显著性差异（Ｐ＜００１）。ＬＰＯ／ＳＯＤ值随病变进展显著升高（Ｐ＜００１）。肺癌组ＳＯＤ活性下降，ＬＰＯ水平升高，呈显著负相关（Ｐ＜００５）。提示：人血淋巴细胞ＡＨＨ诱导性、血清ＳＯＤ活性及ＬＰＯ水平与疾病发生和发展之间可能存在一定的关系。肺癌的易感性可能与ＡＨＨ高诱导性、ＳＯＤ活性下降及ＬＰＯ水平显著升高有关。检测上述指标将有助于肺癌的诊断、肺癌易感者的筛选。

鼠伤寒沙门氏菌外膜蛋白诱发BALB／C小鼠免疫保护的研究

本文采用超声破碎ＴｒｉｔｏｎＸ—１００和超速离心技术提取了鼠伤寒杆菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ，ＳＴＭ）的外膜蛋白（Ｏｕｔｅｒｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＯＭＰｓ），并发现ＯＭＰｓ中脂多糖ＬＰＳ的含量约为５％，ＯＭＰｓ经ＳＤＳ—ＰＡＧＥ显示１０余条蛋白带。对ＯＭＰｓ诱发ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠产生典型迟发型变态反应ＤＴＨ和ＩＬ—２的水平进行了检测。经腹腔免疫的小鼠用５００ＬＤ５０鼠伤寒杆菌（５０１１５）攻击，１００％可得到保护；用５００ＬＤ５０伤寒杆菌（Ｅ６８６）攻击，３３．３％可得到交叉保护。免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的Ｔ淋巴细胞，经尾静脉注射给非免疫小鼠，可使后者得到８５．７％的被动免疫保护，上述结果说明ＯＭＰｓ能诱发ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠细胞免疫和保护性免疫，并提示成为分子疫苗的可能性。

白细胞间素—2冻干制品的活性检测

试制三批大鼠白细胞间素-2(IL-2)粗制品,每批均同时制成冷冻制品及冻干制品,分别保存于-30℃和4℃冰箱。经过2.5年连续同步检测,并进行样品IL-2生物活性的稳定性比较。结果表明.冷冻制品与冻干制品存放不同时间其生物活性差异无显著意义(P>0.05),且冻干制品具有更多的优点。

用PCR方法检测婴儿肝炎综合征患婴的HCMV感染情况

两年来收集到婴儿肝炎综合征患婴（１５～１８０天）共６２例。用ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ（ＰＣＲ）方法检测尿标本中的ＨＣＭＶＤＮＡ。结果显示：阳性率为４５．２％（２８／６２）；并且１月内患婴的阳性率（６０％）明显高于１～６月患婴（３１．３％）。提示Ｃｙｔｏｍａｇａｌｏｖｉｒｕｓ（ＨＣＭＶ）是引起婴儿肝炎综合征的主要病原，并且在１月内患婴中是首要病原。

鼠伤寒沙门氏菌porin诱导BALB/C小鼠迟发性变态反应和T淋巴细胞转移保护的研究

[目的 ] 探讨鼠伤寒沙门氏菌porin(STM -porin)诱导BALB/C小鼠迟发性变态反应和T淋巴细胞转移保护的能力。 [方法 ] 迟发型变态反应 (DTH) ,采用足垫肿胀法 ;利用尼龙毛柱纯化免疫BALB/C小鼠的T淋巴细胞通过尾静脉转移到非免疫小鼠 ,再用 5 0 0LD50 的STM攻击。 [结果 ] 用STM -porin免疫的BABL/C小鼠可以产生明显的DTH ;同时T淋巴细胞被动免疫保护也明显高于LPS组 (P <0 0 1)。 [结论 ] 结果说明STM -porin可能诱导BALB/C小鼠产生较强的DTH和T淋巴细胞免疫保护。

双歧杆菌对辐射小鼠的防护效果观察

双歧杆菌对辐射小鼠的防护效果观察河南医科大学微生物学教研室４５００５２胡军郑州市第四人民医院放射科聂振红河南医科大学第一附属医院放射科兰合法放射诊断和放射治疗是临床上诊治疾病的重要手段之一。射线对正常机体组织有一定损伤和破坏作用；也能破坏正常菌群，是...

HUN的毒性和致突变性研究

对ＨＵＮ（植物杀虫剂）进行了经口、皮和呼吸道的急性毒性实验（霍恩氏法和寇氏法），蓄积毒性试验（剂量递增法）和致突变试验（Ａｍｅｓ试验、小鼠骨髓细胞微核试验和精子畸变试验）。结果表明：ＨＵＮ的大鼠经口ＬＤ５０为３１６ｍｇ／ｋｇ，经皮ＬＤ５０为５８４ｍｇ／ｋｇ；小鼠经口ＬＤ５０为２６５．５ｍｇ／ｋｇ，经呼吸道ＬＤ５０为１７９６．４ｍｇ／ｋｇ，蓄积系数为１．９。致突变试验结果表明，Ａｍｅｓ试验各浓度组加Ｓ９与不加Ｓ９活化，其ＭＲ值均小于２。微核试验和精子畸变试验，各剂量组微核发病率和精子畸变率与阴性对照组比较均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结果提示：ＨＵＮ为中等毒性和高蓄积性的化学物质。各项致突变试验结果均表明ＨＵＮ无致突变性，是一种较理想的植物杀虫剂。

鼠伤寒沙门氏菌外膜蛋白和微孔蛋白诱导细胞免疫及免疫保护的比较

对鼠伤寒沙门氏菌外膜蛋白（ＯＭＰｓ）和微孔蛋白（ｐｏｒｉｎ）诱导ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠产生细胞免疫（ＣＭＩ），即迟发型变态反应（ＤＴＨ）和白细胞介素２（ＩＬ－２）的能力进行了检测，并观察了用５００ＬＤ５０的鼠伤寒沙门氏菌和伤寒沙门氏菌以腹腔途径攻击经ＯＭＰｓ，ｐｏｒｉｎ免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠所产生的主动免疫、交叉免疫和Ｔ细胞转移免疫保护的能力。发现：ＣＭＩ的能力，ＯＭＰｓ（ＤＴＨ（０．７６±０．０３）ｍｍ；ＩＬ－２（５４４００±１０２００）ｕ／Ｌ优于ｐｏｒｉｎ（ＤＴＨ（０．３６±０．０２）ｍｍ；ＩＬ－２（２６２００±４９００）ｕ／Ｌ，Ｐ＜０．０１；而主动免疫保护率（ＯＭＰｓ：１００％，ｐｏｒｉｎ：７０％）、交叉免疫保护率（ＯＭＰｓ：３３．３％，ｐｏｒｉｎ：２２．２％）和Ｔ细胞转移免疫保护率（ＯＭＰｓ：８７．５％，ｐｏｒｉｎ：４２．９％）均没有显著差别（Ｐ＜０．０５）。结果提示：虽然鼠伤寒沙门氏菌ＯＭＰｓ和ｐｏｒｉｎ均能诱导较强的ＣＭＩ和免疫保护，但两者能力不同。

互隔交链孢霉毒素AME和AOH合成物的诱变性

对互隔交链孢霉毒素——交链孢酚单甲醚(Alternariol monomethyl ether,AME)和交链孢酚(Alternariol.AOH)的合成物进行了细菌回复突变试验.检测其诱变性。结果表明:AME和AOH提取物和合成物(不加S_9)对鼠伤寒沙门氏菌TA102菌株和大肠菌ND-160菌株.均显示致突变效应.而后者对AME和AOH更为敏感。用相同剂量.AOH对大肠杆菌ND—160菌株诱变比值(MR)比AME高2～7倍,表明AOH的诱变性更强。合成物与提取物相比,合成物的诱变作用较强。

林县食管癌高发村柿干的致突变性

林县食管癌高发村40份柿干乙醚提取物,用Ames试验检测出25份经S9活化后对TA98,其中4份同时对TA 100出现致突变作用。其结果表明柿干的致突变性似与柿干发霉有关。最小有效剂量相当于250mg柿干的提取物。

厌氧棒菌苗诱导肺癌患者内源性肿瘤坏死因子的研究

本文的目的是在于给肺癌患者胸腔内注射厌氧棒菌苗,以测定其诱生内源性肿瘤坏死因子效应,启动注射后,就诱生出来了肿瘤坏死因子,但对L_(929)靶细胞的细胞毒活性很低,二次触发注射后,其活性明显增高,7例患者血清及胸水中肿瘤坏死因子的平均值分别为53.87u/ml(P<0.0005)和22.48u/ml(P<0.025),且以启动注射后6天进行第二次触发注射为最高。结果表明:仅注射厌氧棒菌苗而无需其它触发剂亦能诱导肺癌患者产生内源性肿瘤坏死因子,这在临床上治疗肿瘤时,抑制肿瘤细胞的生长、播散和转移具有重要意义。

四种香烟烟雾冷凝物对大鼠肺细胞程序外DNA合成的影响

用程序外DNA合成试验(Unscheduled DNA Synthesis,UDS)研究了四种市售香烟的烟雾冷凝物(Cigarette Smoke Condeinsate,CSC)对新鲜分离的大鼠肺细胞的DNA损伤作用。结果表明:四种CSC在一定浓度范围内均可诱发大鼠肺细胞的DNA损伤,与溶剂对照相比差异有极显著意义,并存在一定的剂量效应关系;而且进口555牌带普通醋酸纤维滤嘴香烟的CSC的损伤作用显著大于国产带普通醋酸纤维滤嘴和不带滤嘴香烟的CSC的作用。提示:CSC可诱发肺细胞的突变,吸烟与肺癌的发生可能有直接关系。

巩县伊洛河水和周围井水致突变性调查

用细菌波动试验和蚕豆根尖微核试验检测巩县伊洛河四个断面河水富集物的致突变性,前者致突变阳性率为90%,后者为91.7%。12个沿伊洛河井水(试验组)和10个远离河井水(对照组)富集物的致突变性,也用以上两种方法进行检测。结果:试验组12个井的井水均有致突变效应,而对照组仅4个井为阳性。