河南食管癌高发区居民食管癌组织p15INK4b和p16INK4a基因变化的研究

基因丢失导致ｐ１６ＩＮＫ４ａ和（或）ｐ１５ＩＮＫ４ｂ对ＣＤＫ激酶的抑制作用丧失，从而导致细胞增生调节失控［１－３］，目前在多种肿瘤中已发现存在ｐ１５ＩＮＫ４ｂ和ｐ１６ＩＮＫ４ａ的失活现象［４－６］．作者近年对河南食管癌高发区林州市居民的研究证实，肿瘤...

肿瘤抑制基因p53-Rb系统变化与食管癌变关系研究及展望

食管癌变多阶段演进过程中关键的分子变化事件及其相互关系,特别是这些变化在食管癌变中的生物学意义尚不十分清楚.我们及其他实验室最近的研究提示:食管癌变演进是多种基因变化先后累积或叠加综合作用的结果.肿瘤抑制基因p53-Rb系统变化是河南食管癌高发区人群食管癌变过程中发生频率最高的分子生物学改变;食管癌组织同时发生p53-Rb基因功能丧失的频率约为59%;p53的变化主要为基因突变和蛋白聚集,Rb的主要变化为基因丢失和(或)杂合缺失(LOH).如果把p16和p15的变化归类为Rb系统改变,将p14归类为p53系统改变,那么,Rb和p53通路变化频率约为91%.这些研究结果提示,p53-Rb系统变化可能是河南食管癌高发区人群食管癌变最重要的分子机制.

河南食管癌高发区居民多灶性食管癌前病变和癌组织p53基因的突变分析

目的探讨肿瘤抑制基因ｐ５３在同一患者多灶性食管癌前病变和癌组织中的突变特征，以加深对其在食管癌发生过程中作用的认识．方法采用免疫组织化学、选择性免疫组化、ＤＮＡ（ＰＣＲＳＳＣＰＤＮＡ）测序方法，对来自食管癌高发区林州市的４３例食管癌手术切除标本的癌组织及癌旁非癌病变作Ｐ５３蛋白表达及突变分析．癌前病变和ｐ５３表达较弱的癌组织（阳性细胞＜３０％），采用紫外线照射办法提高阳性细胞数再作ＤＮＡ制备．结果受检的４３例鳞癌中，３０例检出有ｐ５３基因突变（７０％），其中２９例Ｐ５３蛋白表达阳性鳞癌中的２５例检出有ｐ５３基因突变（８６％）．对癌旁Ｐ５３蛋白表达阳性的癌前病变分析显示，１６例基底细胞增生中的７例（４７％），１２例间变中的８例（６７％），７例原位癌中的６例（８６％）检出有ｐ５３基因突变．尽管有２例受检组织突变只见于癌组织，而其癌旁的间变组织未发现突变，但间变和原位癌中检出的ｐ５３基因突变与鳞癌中检出的ｐ５３基因突变类型相同．７例基底细胞增生组织中，只有３例检出的ｐ５３基因突变类型与其邻近的癌组织相同，其余４例突变类型不同于邻近的癌组织．结论发生间变和原位癌组织的ｐ５３基因突变与食管鳞癌非常一致，而发生在基?

大肠癌内分泌样癌细胞分化与p53蛋白聚集变化关系的研究

采用免疫组织化学ＡＢＣ法检测６６例经１０％福尔马林固定，石蜡包埋的大肠癌手术切除癌组织中的嗜铬蛋白Ａ（ＣｈｒｏｍｏｇｒａｎｉｎＡ，ＣＧＡ）表达及ｐ５３蛋白聚集，并定量计数ｐ５３免疫阳性细胞，进一步分析ＣＧＡ与ｐ５３蛋白聚集变化的关系，结果显示：大肠癌ｐ５３ＣＧＡ阳性率分别为６１％（４０／６６）和３８％（２５／６６）；ＣＧＡ阳性及阴性病例ＣＧＡｐ５３阳性率分别为８０％（２０／２５）和４９％（２０／４１），ＣＧＡ阳性肿瘤ｐ５３阳性率明显高于ＣＧＡ阴性肿瘤（χ２＝６．３４，Ｐ＜０．０２５）；ｐ５３、ＣＧＡ均阳性的大肠癌２０例ｐ５３阳性细胞数为８５７±７０６／ｍｍ２，ｐ５３阳性、ＣＧＡ阴性表达者２０例ｐ５３阳性细胞数５７１±４７８／ｍｍ２，前者高于后者（ｔ＝２．３３，Ｐ＜０．０５）。结论：ｐ５３蛋白聚集与内分泌样癌细胞的分化呈现较明显的一致性。

利用不同DNA源进行基因多态性研究的可行性分析

探讨不同ＤＮＡ源作基因多态性分析的优缺点，及以血凝块裂解液直接进行ＰＣＲ扩增的可行性 和可靠性。方法：从口腔粘膜细胞、组织切片提取ＤＮＡ，并将临床生化分析遗弃的血凝块制备成裂解液和纯化 ＤＮＡ，取各自样本分别进行ＰＣＲ扩增，并进一步对血凝块纯化ＤＮＡ和血凝块裂解液所作的ＰＣＲ扩增作对照研究。 结果：本研究使用的不同ＤＮＡ源所作的ＰＣＲ扩增均获得满意结果，以血凝块裂解液进行的ＧＳＴＭ１，ＧＳＴＴ１和 ＣＹＰ２Ｅ１基因多态性分析均获得成功，其结果与纯化ＤＮＡ进行分析观察到的结果完全一致。结论：同组织细胞纯 化的ＤＮＡ一样，血凝块是理想的ＤＮＡ源，用血凝块裂解液直接进行基因多态性分析，方法简明，结果可靠。

直肠癌内分泌样癌细胞分化与P^(53)蛋白表达关系的研究

目的:研究直肠癌内分泌样癌细胞分化与P^(53)蛋白表达的关系及意义.方法:采用免疫组织化学ABC法检测44例福尔马林固定、石蜡包埋的直肠癌手术切除及活检组织中的嗜铬蛋白A(CGA)及P^(53)蛋白的表达.结果:P^(53)、CGA阳性表达率分别为68.2%(30/44)和38.6%(17/44):CGA阳性及阴性直肠癌P^(53)表达率分别为88.2%(15/17)和55.6%(15/27),两者比较P<0.025X^2检验);P^(53)CGA在分化差的直肠癌中的表达呈增高趋势,但差异均无显著性.结论:P^(53)肿瘤抑制基因的变化在直肠癌的内分泌分化过程中可能发挥重要作用.

p53蛋白聚集在食管和贲门癌原发病灶和淋巴结转移病灶中的相关性研究

目的：通过对食管和贲门癌原发病灶和淋巴结转移病灶ｐ５３变化规律的研究，加深对食管和贲门癌转移发生的分子病理学基础的了解。方法：采用免疫组织化学（ＡＢＣ）方法，对３１例食管和贲门癌原发病灶和转移病灶ｐ５３蛋白聚集进行了研究。结果：３１例手术标本中，２４例为食管磷状细胞癌，７例为贲门腺癌。研究表明：在２４例食管原发和转移鳞癌中，有１１例原发和转移癌灶中均出现ｐ５３蛋白聚集的变化，原发和转移癌灶的一致性变化发生率为６１％（１１／１８），Ｐ＜０．０５；在６例原发病灶ｐ５３免疫组化阴性患者中，其淋巴结转移病灶也同时出现免疫阴性反应。在７例胃贲门腺癌中，３例原发和转移癌灶同时出现ｐ５３免疫阳性表达的一致率为５０％（３／６），Ｐ＞０．０５；１例原发病灶ｐ５３免疫组化阴性患者，其淋巴结转移病灶也出现阴性反应。结论：ｐ５３在食管和贲门癌癌变和转移中起一定的作用。

P21ras在非小细胞肺癌中表达的研究

目的:探讨ras癌基因产物P21ras在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学ABC法对61例NSCLC肺癌组织及癌旁正常肺组织进行了P21ras的检测。结果:P21ras在肺癌组织中呈高表达(62.3％,38/61),而在癌旁正常肺组织中无表达,二者差异显著(P<0.05)。在肺鳞癌及腺癌中的阳性表达率为57.1％(20/35)和69.2％(18/26),无显著差异。P21ras表达随NSCLC有淋巴结转移,病程进展及分化程度的降低而明显增高(P<0.05),结论:P21ras表达可能与NSCLC发生发展有关,并可作为判断其预后的参考指标。

食管癌高发区中“无癌村”和“有癌村”饮用水水质分析

为探讨食管癌发病原因，对食管癌高发区林州市“无癌村”及其“有癌村”生活饮用水进行了分析。结果显示：“无癌村”饮用水中锰、钼、硒、钾、碳酸氢根、暂时性硬度等高于“有癌村”；而永久性硬度、硫酸根、偏硅酸等则较低。以上指标中锰差异最大，“无癌村”比“有癌村”高出１２０余倍。分析认为生活饮用水对“无癌村”

食管癌变过程中p53、c-myc、bcl-2表达及其与细胞凋亡的关系

目的：探讨食管癌变过程中肿瘤抑制基因ｐ５３和癌基因ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２的变化及其与细胞凋亡的关系。方法：采用免疫组化法（ＡＢＣ）检测２７９例食管粘膜活检组织中ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２的表达以及细胞凋亡的变化。结果：从食管正常上皮到基底细胞增生、间变和癌，ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２免疫阳性表达率及细胞凋亡发生率和细胞凋亡指数（ＡＩ）均呈升高趋势，而且在同一阶段病变，ｐ５３和ｃ－ｍｙｃ阳性表达时凋亡指数高于其阴性表达，而ｂｃｌ－２阳性表达时凋亡指数低于其阴性表达。结论：在食管癌变过程中可能有多种肿瘤抑制基因和癌基因参与，细胞凋亡在食管癌变过程中可能有重要的生物学意义。

饮食补锰对人体发锰及血锰的影响

采用ＩＣＰ法对服用茶叶提取物１年的人群及其对照组进行发锰与血锰的检测。结果显示，虽然服茶组每人每天锰摄入量比对照组高２７％，但２组人群血锰与发锰并无显著性差异，表明该种方式补锰效果较差。提示在进行锰与人群健康关系研究时，不仅要重视总摄入量，而且要重视其摄入方式及其吸收率。

细胞凋亡与食管贲门癌组织病理学特性的关系

目的探讨细胞凋亡与食管、贲门癌组织病理学特性的关系．方法来用组织病理学方法检测３８例食管癌和４０例贲门癌手术切除标本癌组织中细胞调亡的状况，并进行定量分析，进而比较其与过组织的分化程度、浸润深度以及淋巴结转移之间的关系．结果食管、贲门边组织中均可见不同程度的细胞凋亡．并且细胞凋亡指数（即１０个高倍视野内凋亡细胞和凋亡小体数）与癌组织的分化程度及淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０５），而与浸润深度无关（Ｐ＞ｏ．０５）．结论细胞调亡与食管、贲门癌的组织病理学特性有关．

增殖细胞核抗原在各级胃粘膜病变中的表达

目的：探讨增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在不同胃粘膜病变中的表达状况。方法：采用免疫组化ＡＢＣ法，检测１３５例不同胃粘膜病变组织和１５例正常胃粘膜，增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达，并对其进行定量分析。结果：ＰＣＮＡ免疫阳性细胞数随病变发展呈上升趋势，其定量分析数据除浅表性胃炎与正常胃粘膜无明显差异外，其余各组间差异显著（Ｐ＜００５），癌组织中，ＰＣＮＡ表达变化与胃癌生物学行为密切相关。结论：ＰＣＮＡ不仅反映细胞增生状况，而且对胃粘膜病变监测和胃癌患者预后判断具有指导意义。

对胃肠道肿瘤科研设计思路的思考

肿瘤发生的复杂性恶性肿瘤的形成是一个多步骤演进过程，机体内外的多因素相互作用，如：环境毒素的作用，机体对肿瘤的易感性等诸多因素，在肿瘤发生过程中均起着不可忽视的作用。以食管癌为例，其发生不仅病因复杂，而且过程较长。迄今为止，人们发现在我国食管癌高发区...