动物医学制药专业中蛋白纯化教学改革探索

生物制品的质量关系到人类和动物的健康,而蛋白纯化是生物制品的质量保证,因此通过课堂教学、实验操作和考核方式,学生掌握蛋白纯化的基本策略和方法,其目的让学生做到学以致用,为研发单位和企业培养一批应用型人才。

禽流感病毒H9N2亚型HA蛋白在水稻胚乳中的稳定、高效表达及活性鉴定

为了在体外获得表达量高、储存容易、成本低且免疫活性高的H9N2亚型HA蛋白,利用水稻胚乳表达系统表达HA蛋白。首先,将HA基因根据水稻偏好密码子进行优化,合成到pUC57载体上,通过双酶切、连接将HA基因先后构建到中间载体pMP3和植物表达载体pCAMBIA1300上;再通过电极法将pCAMBIA1300-HA导入到根癌农杆菌EHA105中;然后用农杆菌侵染TP309水稻愈伤组织;最后经潮霉素筛选、分化、生根、移栽至田间种植。利用CTAB法提取叶片基因组DNA,PCR鉴定T0阳性植株;利用Dot Blot和Western Blot检测HA蛋白在水稻胚乳中的表达;提取阳性的T1叶片DNA,通过荧光定量PCR方法筛选纯合植株;利用温汤杀雄剪颖授粉法,将含有HA蛋白的TP309与低谷蛋白水稻杂交;利用Western Blot检测杂交后的T3植株蛋白表达量;利用双抗夹心ELISA方法比较水稻源和昆虫表达HA蛋白的活性。结果显示,成功构建了中间载体pMP3-HA和植物表达载体pCAMBIA1300-HA,且pCAMBIA1300-HA成功导入到根癌农杆菌EHA105中;PCR检测到有66株植株的HA基因成功整合到水稻基因组;Dot Blot和Western Blot检测结果表明,HA蛋白在水稻胚乳中成功表达;利用荧光定量PCR方法,107株T1中筛选到31株纯合植株;Western Blot检测结果表明,杂交后的HA蛋白表达量大幅度提高;双抗夹心ELISA结果证实,水稻胚乳表达的HA蛋白的活性高于杆状病毒-昆虫细胞。

以就业为导向——教改畜牧微生物学实验课

微生物是个体微小、结构简单、生长繁殖快以及适应能力强的生物类群。它们分布广泛,种类繁多,并与人类、动物和植物的生存密切相关。为了能使学生掌握一些快速、简便、通用的方法检测微生物,通过实验练习,使学生学会观察微生物的培养特征、形态特征、特殊结构和生化特性,应用免疫学方法检测微生物,掌握鉴定微生物的基本实验技能。

平菇与小麦间作套种技术

麦棉(椒)套种预留行闲置期间的平菇栽培技术,提高了作物与菇类生产的产量与品质,实现了良好的经济效益和生态效益。