镉急性染毒各器官含量及致死机制研究

目的 研究镉急性染毒时 ,机体重要器官镉分布及致死机制。方法 通过静脉分别注射 1.0 ,1.5mg氯化镉后 ,同步测定重要器官镉含量和功能。结果 心、肝、肾、脑、血有一稳定的镉浓度 ,但镉对肝、肾功能的损害作用低于心功能的损害。结论 镉急性染毒镉主要分布在肝和肾 ,但动物死亡原因不是肝、肾损害引起 ,而是由于心功能衰竭。

葛根素对豚鼠乳头肌动作电位及延迟整流钾电流的影响

目的观察葛根素提取液对豚鼠乳头肌动作电位及延迟整流钾电流的影响。方法用常规微电极方法记录豚鼠乳头肌动作电位,用全细胞膜片钳技术记录游离心室肌细胞钾离子流。结果①不同浓度的葛根素均能延长豚鼠乳头肌细胞动作电位时程(APD)。②不同浓度的葛根素均能抑制延迟整流钾电流。结论葛根素明显延长APD,抑制延迟整流钾电流,具有明显的浓度依赖关系,可能是其抗心律失常的电生理机制。

Apelin-13促进血管平滑肌细胞增殖、迁移和血管新生内膜增生

研究apelin-13对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖和迁移的影响及其作用机制.用免疫印迹分析检测apelin-13对VSMC增殖、迁移以及分化相关基因表达的影响,结果表明,apelin-13能以时间和浓度依赖的方式诱导VSMC增殖和迁移相关基因cyclin D1和MMP-2表达,促进细胞增殖和迁移;同时使VSMC分化标志基因SM22α和SMα-actin表达水平降低.而且,用鬼笔环肽对细胞骨架进行染色的结果显示,apelin-13可以促进VSMC从收缩表型向增殖表型转化.体内实验也表明,敲低apelin可抑制球囊损伤诱导的新生内膜形成,提示apelin-13在体内具有促进血管新生内膜形成的作用.总之,本文结果表明,apelin-13通过调节VSMC增殖、迁移以及分化基因表达,进而促进其从分化型向增殖型转化,并向内膜下迁移和增殖.

Am80通过促进KLF4与维甲酸受体α相互作用抑制血管内膜增生

目的:通过大鼠颈总动脉球囊损伤手术,探讨维甲酸受体α(RARα)激动剂Am80是否通过上调Krüppel样因子4(KLF4)与RARα相互作用而抑制血管新生内膜增生。方法:用球囊损伤大鼠颈总动脉,腹腔注射Am80 14 d后,HE染色观察血管新生内膜增生的情况;通过免疫组化方法检测KLF4和血管壁中cyclin D1的表达;用Western blotting方法检测血管壁中KLF4和RARα的表达,用免疫共沉淀法检测KLF4和RARα的相互作用。结果:与球囊损伤模型组比较,Am80腹腔注射组中,内膜与中膜厚度比率明显降低,KLF4和RARα表达水平升高;而且Am80可以促进损伤血管中KLF4和RARα的相互作用。结论:Am80促进KLF4与RARα的相互作用,从而抑制血管新生内膜的增生。

镉对大鼠离体心脏乳头肌力学特性的影响

[目的 ]研究镉对离体心室乳头肌力学特性的影响。 [方法 ]取Wistar大鼠左心室乳头肌 ,分别测定镉对离体心室乳头肌主动张力 (PT)、最大收缩和舒张速率 (±dT dtmax)、dT dtmax位点时收缩成分缩短速度 (VCE)及刺激至张力峰值时程 (TPT)的影响。 [结果 ]当镉离子浓度为 ( 2 75× 10 - 5)mol L时 ,对乳头肌收缩张力无明显作用 ,但已引起 +dT dtmax和 -dT dtmax显著降低 ,镉离子浓度达 ( 5 45× 10 - 5)mol L时 ,才对乳头肌的PT产生明显影响 ,用肾上腺素、氯化钙和肾上腺素加氯化钙进行干预 ,可见到乳头肌收缩能力迅速恢复。 [结论 ]镉离子使乳头肌的±dT dtmax、PT和VCE明显降低 ,使TPT延长 ,钙或 (和 )

锌、硒对镉中毒小鼠金属硫蛋白合成及脂质过氧化损伤的影响

目的观察锌、硒对镉中毒小鼠金属硫蛋白合成及脂质过氧化的影响,为镉中毒的研究及防治提供理论基础。方法36只昆明小鼠随机分成6组,每组6只:对照组,经口灌注生理盐水;CdCl2组,100μmol/kg的CdCl2,经口灌胃;Zn2SO4组,Zn2SO420μmol/kg经口灌胃;Na2SeO3组,Na2SeO310μmol/kg经口灌胃;CdCl2+Zn2SO4组,Zn2SO4和CdCl2交替经口灌胃;CdCl2+Na2SeO3组,Na2SeO3和CdCl2交替经口灌胃。109Cd-血红素饱和法测小鼠组织金属硫蛋白含量;试剂盒检测小鼠组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果单独镉、锌、硒组及Zn+Cd、Se+Cd组小鼠肝、心和肾脏MT含量均明显高于对照组,CdCl2组小鼠肝、心和肾脏MDA含量增高、SOD和GSH-Px活力降低。CdCl2+Zn2SO4组和CdCl2+Na2SeO3组小鼠肝、心和肾脏MT含量较单用CdCl2组进一步增高(P<0.05),MDA含量降低,SOD和GSH-Px活力升高。结论锌、硒增加镉中毒小鼠金属硫蛋白合成,减轻镉中毒小鼠脂质过氧化损伤。

镉染毒大鼠肾损害与钙稳态关系的研究

目的 探讨镉中毒性肾损害的细胞分子学机制。方法 通过腹腔注射Cd2 +1 4mg/(kg·bw)制备肾损伤模型 ,观察镉性肾损害时胞浆中钙含量的变化及其与肾损害之间的关系。结果 随着隔作用时间的延长 ,肾皮质中尿蛋白、尿N -乙酰 - β -D -氨基葡萄糖苷酶 (NAG)不断升高 ,肾小球滤过率 (GFR)减少 ,肾胞浆中钙显著增高 ,Ca2 +-Mg2 +-ATPase活性也随之升高。结论 镉性肾损伤中 ,细胞钙稳态受到破坏 。

金属硫蛋白拮抗同型半胱氨酸对血管内皮细胞的脂质过氧化作用

目的:观察金属硫蛋白(metallothionein,MT)对同型半胱氨酸(homocysteine Hcy)损伤血管内皮细胞的拮抗作用及机制。方法:培养液中分别加入Hcy及Hcy+MT孵育血管内皮细胞,自动生化分析仪测培养液乳酸脱氢酶(LDH)活性,硫代巴比妥酸法测细胞丙二醛(MDA)含量。结果:同型半胱氨酸增加内皮细胞LDH及蛋白漏出,并使细胞MDA含量明显升高。MT呈浓度依赖性地抑制Hcy所致的血管内皮细胞损伤及MDA增高。结论:MT拮抗Hcy对血管内皮细胞的脂质过氧化损伤。

rH2AX核内斑点在不同成胶质瘤细胞中的剂量时间效应研究

将成胶质瘤细胞MO59K和MO59J两种细胞分别给予1Gy,2Gy,4Gy和8Gy的6MV-X线照射,并分别于0.5h、1h、2h、4h、8h、12h、24h收集细胞,检测rH2AX核内斑点时间及剂量效应特点.结果发现,MO59K细胞和MO59J细胞随着照射剂量的增加rH2AX核内斑点数量增加;并且MO59K细胞接受8Gy照射后rH2AX斑点在24h内能够恢复到放疗前的水平,而MO59J细胞内rH2AX斑点不能恢复到照射前水平.提示MO59J细胞较MO59K细胞敏感,照射后rH2AX核内斑点更难恢复到未照射水平.

叶酸、维生素E对Hcy血症小鼠血脂及抗氧化酶活性影响

目的:观察叶酸、V itE对高同型半胱氨酸血症小鼠血脂及心、肝抗氧化酶活力的影响。方法:复制高同型半胱氨酸(homocyste ine Hcy)血症小鼠模型,腹腔注射叶酸、V itE、叶酸+V itE,测定血浆TC、TG、HDL-C、LDL-C及心、肝SOD、GSH-PX活力。结果:Hcy增高小鼠血脂水平,TC、TG、LDL-C与对照组比较均升高;降低心、肝SOD、GSH-Px活力。叶酸、V itE可降低Hcy所致的血脂水平升高,提高Hcy所致的抗氧化酶活力下降,叶酸与V itE同时应用效果更佳。结论:叶酸+V itE显著降低高Hcy血症小鼠血脂水平,提高高Hcy血症小鼠抗氧化酶活力。

镉对家兔离体胃平滑肌收缩活动的影响

目的 :探讨镉对离体胃平滑肌收缩活动的影响。方法 :本实验用不同剂量氯化镉溶液对离体胃肌条循环灌流 ,用张力换能器测定 ,二道生理记录仪描记肌条收缩活动指标。结果 :镉离子对肌条的主动张力 (PT)、基础张力 (RT)、主动张力最大收缩速率 (dT/dtmax)和主动张力最大舒张速率 ( -dT/dtmax)均有明显抑制作用 ,而且呈剂量效应关系。这些作用可被乙酰胆碱对抗。结论 :镉离子可直接引起胃平滑肌收缩力降低。

哮喘对豚鼠金属硫蛋白合成的影响

目的 :观察哮喘豚鼠组织及血浆金属硫蛋白 (MT)含量的变化 ,认识哮喘时机体氧化防御系统的改变。方法 :复制豚鼠哮喘模型 ,分别以 [10 9Cd]-血红蛋白饱和法和硫代巴比妥酸法测定豚鼠组织及血浆MT及丙二醛(MDA)含量。结果 :哮喘豚鼠肝、心、肾和肺组织及血浆MT水平分别较对照组高 2 0 .3% (P <0 .0 5 )、6 4.3%(P <0 .0 5 )、5 2 .5 % (P <0 .0 1)、5 0 .0 % (P <0 .0 5 )、2 8.5 % (P <0 .0 5 )。MDA含量分别较对照组高 16 0 .8(P <0 .0 1)、38.5 % (P <0 .0 5 )、40 .0 % (P <0 .0 5 )、71.4% (P <0 .0 1)、89.5 % (P <0 .0 1)。结论 :哮喘豚鼠组织及血浆MT产生增多 。

慢病毒载体的构建及低表达和过表达CEA EC9706细胞株的建立

目的:构建人癌胚抗原(CEA)慢病毒si RNA和表达载体并包装成感染性病毒颗粒,获得稳定低表达和过表达CEA的EC9706细胞。方法:构建CEAsi RNA载体:依据si RNA靶序列设计原则,针对人CEA的cDNA序列,设计并合成编码si RNA的3对寡核苷酸序列,克隆入si RNA载体(pRNAT-U6.2/Lenti)中构建3个重组体pRNAT-U6.2-SCEA。构建CEA表达载体:以人CEA的测序质粒为模板,PCR扩增CEA全长,装入pLenti GFP转移质粒,经过测序证实其序列与标准序列完全一致。然后进行重组慢病毒分别感染EC9706细胞,G418筛选得到稳定感染细胞株。分别用荧光定量Real-ti me RT-PCR和Western blot检测EC9706细胞中CEA基因表达抑制或增强的效果。结果:EC9706病毒感染48 h后荧光显微镜观察CEA慢病毒载体在细胞中高效表达,经过RT-PCR和Western-blot验证:得到3株稳定CEA低表达的EC9706细胞株,其中一个CEA的表达几乎得到完全抑制,1株稳定CEA过表达的EC9706细胞株(EC9706-CEA)。结论:建立了稳定低表达和过表达CEA的EC9706细胞株,成功调控食管癌EC9706细胞中CEA的表达,为进一步从分子水平探讨CEA的功能奠定了基础。

金属硫蛋白、同型半胱氨酸对血管内皮细胞的作用

目的:观察金属硫蛋白(metallothionein MT)对同型半胱氨酸(homocysteine Hcy)损伤血管内皮细胞的保护作用及机制。方法:培养血管内皮细胞,培养液中分别加入Hcy及Hcy+MT孵育血管内皮细胞,自动生化分析仪测培养液乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,硫代巴比妥酸法测细胞丙二醛(MDA)含量,化学比色方法测超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果:与对照组相比,Hcy组细胞LDH及蛋白漏出增加,细胞MDA含量明显升高(P<0.01);外源性给予MT(10-9mol/L,5×10-9mol/L,10-8mol/L)呈浓度依赖性地抑制Hcy引起的血管内皮细胞损伤,与Hcy组比,LDH漏出分别降低16.3%(P<0.05)、23.5%(P<0.01)和37.2%(P<0.01)。MDA含量分别减少15.8%(P<0.05)、21.1%(P<0.01)和36.8%(P<0.01)。结论:MT拮抗Hcy对血管内皮细胞的脂质过氧化损伤。

杏仁对家兔动脉粥样硬化及金属硫蛋白含量的影响

目的 :研究杏仁对家兔动脉粥样硬化 (AS)及肝、心组织、血浆金属硫蛋白 (MT)的影响 ,探讨杏仁对AS的防治作用及可能机制。方法 :高脂组家兔高脂饮食 8周 ,复制高脂血症 -动脉粥样硬化模型。杏仁组动物高脂饮食 4周后 ,腹腔注射杏仁液 ,对照组家兔喂养普通饲料 8周。以 [10 9Cd \〗血红素饱和法和硫代巴比妥酸法测定动物肝、心组织及血浆MT和MDA含量。结果 :AS组家兔肝、心组织及血浆MT水平分别较对照组升高 84% (P <0 0 5 )、48% (P <0 0 5 )、44 % (P <0 0 5 )。腹腔注射杏仁液后家兔肝、心组织和血浆MT含量进一步增高 ,分别较AS组升高 12 8% (P <0 0 5 )、3 3 % (P <0 0 5 )、46% (P <0 0 5 ) ,而MDA含量较AS组明显下降。结论 :杏仁可促使家兔组织MT合成增多 ,减轻AS的发生。

牛磺酸对内皮素生物学效应的机理探讨

目的 :探讨牛磺酸对内皮素 (ET)生物学效应的作用及意义。方法 :在整体动物和离体组织观察ET作用和牛磺酸的拮抗作用。结果 :牛磺酸可拮抗ET引起的升压作用 ,抑制ET缩血管和促平滑肌增殖作用 ,减少缺氧刺激引起的ET释放。结论 :牛磺酸能有效拮抗ET生物学效应 。

板蓝根的抗炎作用

目的 :对板蓝根 70 %乙醇提取液的抗炎作用进行了研究。方法 :用二甲苯致增加均小鼠耳肿胀、角叉菜胶致大鼠足跖肿、大鼠棉球肉芽组织增生及醋酸致小鼠毛细血管通透性的方法 ,观察板蓝根的抗炎作用。结果 :板蓝根对二甲苯致增加均小鼠耳肿胀、角叉菜胶致大鼠足跖肿、大鼠棉球肉芽组织增生及醋酸致小鼠毛细血管通透性均有抑制作用。结论

运用多种教学手段改进生物化学教学模式

分析生物化学教学中存在的一些问题,提出新的改革模式。通过对新模式与传统的教学模式比较,旨在提高学生对生物化学的学习兴趣,并且培养其基本的科研素养。