毛钩藤碱调控Shh信号通路对结直肠癌荷瘤鼠的抑瘤作用及CD4^(+)、CD8^(+)T细胞的影响

目的:探讨毛钩藤碱对结直肠癌荷瘤鼠的抑瘤作用,并分析其对Shh信号通路关键蛋白及CD4^(+)、CD8^(+)T细胞的影响。方法:采用结肠癌SW480细胞接种于裸鼠右腋部皮下建立结直肠癌荷瘤鼠模型,将40只建模成功的裸鼠分为荷瘤鼠模型组、阳性药环巴胺(Shh信号通路抑制剂)对照组和毛钩藤碱低、中、高剂量组,每组8只。阳性药给予环巴胺(20μmol/L,0.2 ml),毛钩藤碱干预组分别腹腔注射5、10、20 mg/kg毛钩藤碱,1次/d,连续21 d,留取外周血后处死。观察各组荷瘤小鼠的自主活动次数、体质量及肿瘤体积,计算体质量增长率、相对肿瘤体积增长率和抑瘤率;免疫组化法(IHC)检测荷瘤鼠移植瘤中Glil、Gli2、Shh、Smo和Ptch1表达量;流式细胞术检测荷瘤鼠移植瘤和外周血中CD4^(+)及CD8^(+)T细胞水平。结果:与模型组比较,环巴胺及毛钩藤碱的干预显著改善了裸鼠的自主活动次数,环巴胺组及毛钩藤碱中、高剂量组的瘤质量、相对肿瘤体积增长率及Shh信号通路关键蛋白Glil、Gli2及Shh、Smo和Ptch1表达量均显著降低(P<0.05或P<0.01),移植瘤和外周血中CD4^(+)及CD8^(+)T细胞水平均显著提高(P<0.05或P<0.01),但毛钩藤碱低剂量组上述指标与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与阳性药环巴胺组比较,毛钩藤碱各剂量干预组肿瘤质量、抑瘤率、相对肿瘤体积增长率差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。随着毛钩藤碱剂量的增加,Shh信号通路关键蛋白(Glil、Gli2及Shh、Smo和Ptch1)表达量显著降低(P<0.05或P<0.01),而移植瘤和外周血中CD4^(+)及CD8^(+)T细胞水平均显著增加(P<0.05或P<0.01)。结论:毛钩藤碱可显著改善结肠癌荷瘤鼠的自主活动状态,发挥较好的抑瘤作用,可能与其抑制Shh信号通路,提高CD4^(+)及CD8^(+)T细胞水平有关。