开封大学教职工体检结果分析

目的了解开封市高校教师身体健康状况,并提出健康促进的措施和方法。方法根据某高校教师健康体检资料,记录主要疾病患病率,并分析不同年龄、不同性别各主要疾病患病率变化情况。结果男性20～30岁慢性病就已经以脂肪肝为主进入高发年龄,女性40岁以上慢性病患病率达到高峰;男性肥胖率、高脂血症患病率均高于女性,而发病年龄低于女性;牙龈炎和牙周疾病男女患病率均很高,性别之间无差异,但随着年龄有增高趋势。结论高校教师身体健康状况不容乐观,应从控制肥胖入手提高身体健康水平。

乙酰肝素酶和MMP-9在胰腺癌中的表达及临床意义

目的:检测乙酰肝素酶(heparanase,HPA)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在胰腺癌、慢性胰腺炎、正常胰腺组织中的表达及相互关系,分析其与浸润转移的关系。方法:应用免疫组化SP法检测92例胰腺癌、24例慢性胰腺炎和10例正常胰腺组织中HPA、MMP-9的表达水平,分析两者的表达与临床病理指标的关系,建立Spearman等级相关分析。结果:HPA在胰腺癌中表达明显高于慢性胰腺炎和正常胰腺组织(P<0.05),HPA阳性表达与周围组织浸润、淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与性别、年龄及组织学分级无统计学相关(P>0.05);胰腺癌组织中MMP-9表达明显高于慢性胰腺炎和正常胰腺组织(P<0.05)。且MMP-9阳性表达与周围组织浸润、远处转移正相关(P<0.05),与性别、年龄、组织学分级无统计学相关(P>0.05)。HPA与MMP-9有较高的共同阳性表达率。HPA和MMP-9表达呈正相关(P<0.05),其共同表达率与肿瘤对周围脏器浸润和淋巴结转移有相关(P<0.05)。多因素分析显示HPA和MMP-9均非影响预后的独立因素。结论:HPA、MMP-9在胰腺癌组织中的表达可能与胰腺癌浸润、转移相关,可作为新的胰腺癌标记物用于联合检测,具有重要的临床意义。且MMP-9可能上调HPA表达水平,促进HPA介导的肿瘤浸润转移。

固相配体文库降低血清高低丰度蛋白浓度差异

目的探讨固相配体文库技术富集血清低丰度蛋白及提高质谱鉴定低丰度蛋白敏感性。方法3组混合血清标本采用蛋白富集珠(ProteoMiner)处理,一维或二维电泳图谱分析比较处理前后血清图谱中的差异条带或蛋白质斑点,并于处理后血清的二维电泳图谱中显著增加的蛋白质斑点进行高效液相色谱法电喷雾串联质谱鉴定。结果一维及二维电泳图谱表明,固相配体文库技术能显示更多的蛋白条带或蛋白质斑点;显著富集的蛋白质点进行质谱鉴定结果表明,固相配体文库技术能够提高血清低丰度蛋白质谱鉴定,如簇集蛋白、玻连蛋白、C4b结合蛋白α链、补体C4-A等。结论固相配体文库技术能有效地富集血清中低丰度蛋白,同时稀释高丰度蛋白,表明该技术有助于血清中低丰度蛋白的分离、富集与鉴定。

热休克蛋白-肽复合物与肿瘤免疫

热休克蛋白（heat shock protein,HSP）是一类在生物进化过程中高度保守,广泛表达于所有生命机体组织细胞并具有管家功能的蛋白质。根据分子量的差异,HSP可分为10个家族,包括HSP110/grp170、gp96/grp94、HSP90、HSP70/grp78、HSP65、HSP25/27等,每个家族有1~5个成员[1]。在正常生理状态下,

活性氮对细胞保护和损伤作用研究进展

活性氮(reactive nitrogen species,RNS)影响细胞内氧化还原平衡,诱导蛋白质翻译后修饰(post-translational modification,PTM),在生理条件下作为信号分子参与细胞信号传导。但是过量的RNS会引起亚硝基化应激导致细胞的损伤,并与肿瘤的发生和发展以及治疗效果等密切相关。本文阐述RNS在生理条件下的作用及在肿瘤发生和发展中的研究进展,为新药的研发和疾病的治疗提供思路。

亚硝酸盐对人体健康的利害分析

亚硝酸盐作为人体内源性信号分子调控基因表达,不仅是诊断某些疾病的标志物,而且是治疗心血管疾病的潜在药物。亚硝酸盐具有维持人体一氧化氮平衡,促进心血管健康的作用。然而,环境亚硝酸盐也存在健康危害和致癌风险。该文综述了亚硝酸盐的研究历史和近期文献,通过亚硝酸盐代谢、一氧化氮平衡调控分析了其致癌风险、健康维护,并对研究前景进行展望。

开封市黄河滩区土地资源规避洪水风险的安全利用

基于ArcGIS与ERDAS遥感影像制图软件,利用2007年SPOT2.5m分辨率遥感影像,结合实地调查,详细编绘了开封市段黄河河道边界、开封段黄河滩区土地资源的利用现状。采用1992~2007年最大洪峰时期的TM影像与沿河水文站点的观测资料,提取1992~2007年7个典型日期的河道行洪边缘线,与本底数据叠加,编制了开封段不同常遇洪水流量下滩区淹没范围。按照黄河下游二维水沙数学模型,采用2004年汛后河道大断面资料,计算生成不同流量级大洪水在滩区的可能淹没范围图（淹没区边界）。在此基础上,结合土地资源管理与河道行洪安全性的要求,总结当前黄河下游滩区利用开发的现状与存在问题,制订土地安全利用规避洪险的原则,规划土地安全利用分区,分为临河风险缓冲带、近河宜耕地带、相对稳定利用带（中风险带）和稳定利用带。提出了黄河滩区土地资源合理安全利用的对策。

植物凝集素串联法富集纯化血清多个亚糖蛋白质组

蛋白质糖基化修饰是哺乳动物中最为常见的一种翻译后修饰,蛋白质的寡糖侧链具有重要的生物学意义,如蛋白质分子间及细胞间相互作用、识别、肿瘤侵袭与转移等.本实验应用寡甘露糖型亲合层析柱、唾液酸型层析柱和O-连接糖蛋白亲合层析柱从血清中序列性提取寡甘露糖型、唾液酸型的N-连接糖蛋白及O-连接的糖蛋白,一维和二维电泳图谱显示血清各亚糖蛋白组图谱差异,并对富集的唾液酸型糖蛋白质组的二维电泳图谱中12个显著的差异蛋白质点进行质谱检测,鉴定出的14个蛋白均为N-连接糖蛋白.植物凝集素序列性提取血清各亚糖蛋白质组,显著减小了血清蛋白质组的复杂性和血清蛋白浓度波动范围,提高了质谱鉴定血清中对疾病诊断和疗效监测具有重要意义的生物标志物的灵敏性.

细胞培养稳定同位素标记定量分析食管癌顺铂耐药相关蛋白

多药耐药性(multidrug resistance,MDR)是临床肿瘤化疗失败的主要原因之一,定量分析与鉴定食管鳞癌顺铂(cis-diamminedichloroplatinum,CDDP)耐药相关蛋白对阐明食管癌耐药的分子机制具有重要理论意义。本研究采用浓度递增法建立食管癌CDDP耐药细胞系EC9706/CDDP,细胞培养稳定同位素标记(stable isotope labeling with amino acids in cell culture,SILAC)和高效液相-电喷雾串联质谱检测、生物信息学定量分析并鉴定EC9706/CDDP及其母细胞系EC9706的差异蛋白表达谱。EC9706/CDDP细胞呈贴壁性生长但增殖缓慢,多形性、异形性明显,耐药指数为3.23。74种差异表达的蛋白质分子主要包括细胞骨架相关蛋白(20%)、能量代谢相关蛋白(11%)、转录调控及DNA修复相关蛋白(11%)、氧化还原内稳态维持类蛋白(9.5%)、蛋白合成及参与mRNA处理类蛋白(12%)、核糖体结构类蛋白(8.1%)、分子伴侣蛋白(8.1%)、免疫/炎症反应相关蛋白(5.4%)、细胞内转运功能相关蛋白(5.4%)、核组装相关蛋白(2.7%)等。表明食管癌顺铂耐药的发生是多分子参与、多代谢通路失调的复杂过程,差异表达的蛋白分子将有助于深入理解MDR发生的分子机制,并为MDR表型逆转的新型药物设计提供有价值的分子靶点。

亚硝酸钠预处理降低多柔比星对骨肉瘤细胞的化疗敏感性

目的探讨亚硝酸盐预处理对骨肉瘤细胞多柔比星（ADM）化疗敏感性的影响。方法四甲基偶氮唑蓝法分析多柔比星对骨肉瘤细胞MG-63的IC。并计算耐药指数，FITC-annexinV／PI染色流式细胞术分析细胞凋亡，PI和hochest33258 活细胞染色分析细胞死亡率，EGFP-LC3b细胞转染和透射电镜分析细胞自噬，细胞缺氧诱导因子-lα（HIF-1d）和微管相关蛋白1轻链3椰（LC3）蛋白表达水平用蛋白质印迹法分析。结果用10～30mg·L^-1。亚硝酸钠预处理MG-63细胞24h，再用多柔比星（0．3lμg·mL^-1）处理24h，与单纯多柔比星处理组相比，多柔比星对MG-63细胞的Ic50值和耐药指数增加，这种现象可以被自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤逆转。多柔比星可以诱发MG-63细胞自噬，自噬的细胞膜周围LC3-1／绿色荧光点分布，透射电镜下可见自噬体。用3-甲基腺嘌呤抑制自噬对细胞凋亡率和死亡率影响不明显。与单纯多柔比星处理组相比，亚硝酸钠（10mg·L^-1）预处理组自噬阳性细胞增多，用3-甲基腺嘌呤抑制自噬，细胞凋亡率和死亡率明显增加。亚硝酸钠预处理组的HIF-1α蛋白表达和LC31I／LC3I蛋白比值明显比单纯多柔比星处理组增高。结论亚硝酸钠预处理能够降低多柔比星对骨肉瘤细胞的化疗敏感性，机制可能与其促进细胞自噬和HIF-1α蛋白表达有关。

亚硝酸钠通过线粒体自噬增强人肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭能力

亚硝酸盐对细胞具有独特的氧化还原作用,可以促进肝癌细胞侵袭和转移,但是具体机制尚不清楚。癌细胞通过线粒体自噬,清除多余的线粒体,维持细胞的恶性特征。本文旨在探讨亚硝酸盐对肝癌细胞线粒体自噬的作用以及活性氧(ROS)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在其中的作用。用系列浓度的亚硝酸钠在常氧下孵育人肝癌SMMC-7721细胞24 h,用MTT法测定吸光度值反映细胞活力,发现16 mg·L^(-1)亚硝酸钠对细胞活力的促进作用最强。Transwell小室实验显示,亚硝酸钠孵育细胞24 h,可以明显增强细胞迁移和侵袭能力;用微丝示踪剂和Mito-Tracker Red共染色,荧光显微镜下发现,亚硝酸钠促进应力纤维和伪足增加,线粒体呈现核周分布;以上现象均可以被活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)抑制。用ROS示踪剂DCFH-DA孵育,在荧光显微镜下发现,亚硝酸钠明显增强细胞内ROS水平。LC3免疫荧光和Western blot结果显示,亚硝酸钠明显增强细胞的自噬流;透射电镜观察发现,亚硝酸钠诱导细胞自噬溶酶体形成,NAC阻止自噬体降解。RT-PCR结果显示,亚硝酸钠明显降低线粒体标志分子COXⅠ和COXⅣ基因的表达;Mito-Tracker Green染色,激光共聚焦显微镜下发现,亚硝酸钠明显减少线粒体质量;Western blot结果显示,HIF-1α、线粒体自噬标志分子Beclin-1和Bnip3蛋白表达水平升高,这些现象同样被NAC所逆转。结果表明,亚硝酸钠(16 mg·L^(-1))增强SMMC-7721细胞ROS水平,通过HIF-1α诱导线粒体自噬,促进细胞迁移和侵袭。