DNA甲基化抑制剂作用机理及其在植物发育生物学研究中的应用

本文综述了DNA甲基化抑制剂作用机理及其在植物发育生物学研究中的应用。DNA甲基化抑制剂使甲基基团不能转移到腺嘌呤或胞嘧啶,导致DNA甲基化反应受阻,从而使基因组甲基化水平降低。DNA甲基化抑制剂已被用于因DNA甲基化引起的植物表观遗传研究中,同时它可以代替低温促进植物提早开花,并可能在植物性状改良中得到进一步的研究和应用。

利用SSR标记技术分析中国啤酒大麦品种的遗传多样性

利用SSR标记技术对中国38个啤酒大麦品种的遗传背景进行了遗传多样性分析.结果表明,所用28对SSR引物（在大麦7对染色体长、短臂位置各选用了2对）中,有26对SSR引物有多态性,共检测出187个位点,其中172个等位位点有多态性,占91.9%;每个引物可扩增出1～22个位点,平均每个引物产生6.6个等位位点.26对SSR引物的多态性信息含量PIC最高为0.995,最低为0.375,平均PIC为0.713.聚类结果表明,这些品种的遗传距离（GD）聚类范围较小,分布范围在0.01124～0.74510,在遗传距离GD值0.6水平上,这些品种聚成了2大类,下分4个亚类.SSR标记揭示出这38个啤酒大麦品种遗传变异较小,遗传基础比较狭窄.

光暗条件下大蒜DNA甲基化差异的初步研究

用甲基敏感扩增多态性(MSAP)技术分析光暗条件下生长的大蒜DNA甲基化水平差异。结果表明,用8对引物组合扩增出343条带,完全一致的带型240条,不一致的103条。在不一致的条带中,光照条件下相同的47条带与黑暗条件下相同的带型有差异,与黑暗相比光照下出现的去甲基化带28条,有56条差异带在2个处理内个体间也有差异。总的趋势是光照引起大蒜DNA去甲基化。

MSAP技术及其在植物上的应用

DNA甲基化在植物的很多生命过程中具有重要作用,检测DNA甲基化的技术应运而生。依据对DNA甲基化敏感程度不同的同裂酶,在AFLP技术的基础上发展而来的MSAP技术可以方便的检测全基因组范围内胞嘧啶甲基化模式及程度。该文对MSAP技术的原理、特点、基本程序及应用进行了阐述。

河南地区部分小麦新品种高分子量谷蛋白亚基组成分析

利用SDS-PAGE方法对河南地区24份小麦新品种的高分子量谷蛋白亚基进行了分析，共检测到13种亚基和14种亚基组合，其高分子谷蛋白亚基品质得分在5～10分之间，平均得分7．57，以上结果基本反映了我省目前培育的小麦新品种的高分子量谷蛋白亚基组成情况．

植物脱毒新技术——低温疗法

植物病毒能影响植物的生长和发育,降低作物的产量和质量,对植物的危害十分严重。传统的植物病毒脱除方法如茎尖培养和热处理脱毒法对病毒的防治起到了重要的作用,由于传统的脱毒方法有技术操作困难、费时、脱毒率低等局限性,不能根治病毒的危害,致使病毒危害日益严重。近几年发展起来的低温疗法,不仅在保存植物种质方面有独特之处,而且操作简单,快速,脱毒率高,是植物病毒脱除的一种新技术。

多倍体西瓜的嫩枝扦插育苗研究

无籽西瓜由于是三倍体，有性繁殖种子程序复杂，而且产籽量低、发芽率低、成苗率低。针对“三低”的特点，本试验通过对采用生长激素和微量元素处理无籽西瓜及其母本四倍体的嫩枝扦插繁殖技术的研究，探索扩大多倍体西瓜繁殖系数、降低生产成本的新途径。

利用SSR标记对12个啤酒大麦品种的聚类分析和主坐标分析

为啤酒大麦育种实践提供可靠的信息,采用SSR标记技术对12个已知来源的啤酒大麦品种的遗传背景进行了遗传多样性分析。从筛选出的25对有多态性的SSR引物中共扩增出160个等位位点,其中136个位点有多态性,占85.0%,每对引物可扩增出1-13个位点,平均5.44个等位位点。聚类分析表明,在SM相似系数0.63水平上12个啤酒大麦品种可聚成3类2组。主坐标分析将其分为2类4组。2种分类方法所获得结果基本一致,但主坐标分析更能较为真实的反映12个啤酒大麦品种间的亲缘关系。

黄河中游粗山羊草三种y-型高分子量谷蛋白亚基的鉴定、克隆及系统进化分析

粗山羊草(Aegilops tauschii,2n=2x=14,DD)是六倍体普通小麦的祖先之一,其高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)变异类型丰富,是小麦品质改良的重要基因资源。利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析了黄河中游地区161份粗山羊草的HMW-GS,发现3种编码序列未知的y-型亚基,即Dy10.5t、Dy10.4t和Dy10.5*t亚基。通过AS-PCR扩增、克隆、测序和氨基酸序列推导,发现3种未知序列均具有典型HMW-GS的序列结构特征且较为相似,仅Dy10.4t与Dy10.5t亚基存在一个氨基酸重复单元的缺失,Dy10.5t与Dy10.5*t亚基在信号肽部位有一个氨基酸的替换(L?F)。通过对这3种HMW-GS与32个已知氨基酸序列的HMW-GS多序列比对和系统进化关系分析,证实Dy10.5t、Dy10.4t和Dy10.5*t亚基是D基因组编码的高分子量谷蛋白y-型亚基家族的新成员。

节节麦-黑麦双二倍体的染色体C-带分析

通过对节节麦-黑麦双二倍体及其亲本节节麦、黑麦的C-分带研究,表明节节麦-黑麦双二倍体含有其双亲完整的染色体组,其C-带带型与亲本的C-带带型基本一致,从细胞学水平上证实了该种质是人工合成的一种新的异源多倍体。

拟南芥幼苗超低温保存后DNA甲基化的遗传变异

运用MSAP技术分析了拟南芥(Arabidopsis thaliana)幼苗超低温保存后DNA甲基化的遗传变异情况。结果表明,在扩增的662条带中,对照和2个处理及其第2代间完全一致的带型有598条;发生变化的带型有64条,其中能遗传给第2代的有48条,占变异条带的75%。与对照相比,经超低温保存的样品新产生的甲基化位点有14个,而去甲基化的位点有22个。经过处理但未冷冻的与冷冻处理组之间带型一致的有624条,差异条带有38条,占5.7%,而对照与未冷冻处理组的差异率是7.45%,对照与冷冻处理组之间的差异率是6.63%。可见,拟南芥在超低温保存中,无论是经液氮冷冻还是未经冷冻处理,对材料的甲基化状态均有影响,而这种甲基化变化大部分是可以遗传的。

我国部分优质小麦醇溶蛋白遗传多样性分析

采用A—PAGE对49个优质小麦品种进行了醇溶蛋白遗传多样性检测．结果表明：49个供试品种在醇溶蛋白带型上差异显著，品种间遗传距离（GD）在0～0．935之间，平均值为0．525．聚类分析可将优质小麦分为6大类，IBL／IRS易位系有12份，占24．5％．这个结果表明供试品种醇溶蛋白变异丰富，存在广泛的遗传多样性．

黄河中游地区粗山羊草高分子量谷蛋白亚基组成分析

为了解黄河中游地区粗山羊草的高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)遗传多样性,应用SDS-PAGE技术分析了56份粗山羊草Glu-Dt1位点的HMW-GS组成,检测到3种x-型亚基(5t,6.2t,null)和3种y-型亚基(10.5t,10.4t,10.3t)。其中6.2t类型是新的x-型亚基。供试粗山羊草共发现3种HMW-GS组合类型5t+10.5t,6.2t+10.4t,null+10.3t,它们的比例分别是91.07%,7.14%,1.79%。表明该地区粗山羊草的高分子量谷蛋白亚基有一定变异。

水分胁迫下小麦幼苗的抗氧化机制分析

分析了水分胁迫对小麦幼苗叶片中活性氧(ROS)水平和抗氧化酶活性的影响,结果发现,水分胁迫能够显著提高超氧阴离子(O2-.)和丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性,而过氧化氢(H2O2)的含量及过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽还原酶(GR)的活性变化不明显。这些结果表明,SOD和APX在小麦应答水分胁迫的反应中可能起重要作用。

我国部分优质小麦高分子量谷蛋白亚基组成分析

利用SDS-PAGE方法对我国49份优质小麦的高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)进行了分析,共检测到13种亚基和16种亚基组合。结果表明:高分子量谷蛋白(Glu)变异较为丰富,Glu-A1位点有3个等位变异类型,Glu-B1有6个等位变异类型,Glu-D1有4个等位变异类型,而且还发现一些稀有亚基13+16。优质亚基5+10、2~*亚基在供试品种中的比例较高。供试品种HMW-GS品质得分为5～10分,平均为8.04分,表明在我国小麦育种中已注重加强优质谷蛋白亲本材料的引进和利用。

欧李茎尖玻璃化法超低温保存及植株再生

对欧李（Cerasus humilis）茎尖进行了玻璃化法超低温保存及植株再生研究，结果表明，预培养对欧李茎尖超低温保存有一定的影响，茎尖在含有0.5 mg·L^-1BA和2 M甘油的B 5培养基上室温（25℃）下预培养3 d成活率最高；最佳预处理时间为60%PVS2处理10-20 min，玻璃化液（PVS2）处理时间为0℃下60 min.在优化的保存条件下，植株再生率达83.9%，再生植株生长和分化正常.这是欧李超低温保存成功的首例报道.

粗山羊草(Aegilops tauschii)抗纹枯病的鉴定

通过土壤人工接种,采用相对抗病指数法对收集到的56份粗山羊草的抗纹枯病性能在大田成株期进行了鉴定和评价.结果表明,这些粗山羊草的纹枯病抗性普遍较好.8个品系为免疫,15个品系为高抗,26个品系为中抗,7个品系为中感或高感.这些抗病材料可以作为小麦抗纹枯病的资源.

成熟果实未发育胚珠培养获得三倍体柑橘

本研究中,对华农本地早柑橘成熟果实中未发育胚珠进行离体培养,通过胚状体发生途径,获得了32株再生植株.用流式细胞仪对这些再生植株进行倍性分析,发现有1株三倍体植株,并得到染色体计数确认,其三倍体发生频率为3.12%.这是柑橘成熟果实未发育胚珠离体培养获得三倍体植株的首例报道.

钙参与铜诱导的小麦根中NADPH氧化酶活性的升高

研究钙离子(Ca^(2+))在重金属铜诱导的小麦根质膜NADPH氧化酶活性变化中作用的结果表明,Ca^(2+)以剂量依赖的方式提高NADPH氧化酶活性,且这种增加效应可完全为Ca^(2+)螯合剂乙二醇-双-(2-氨基乙基)四乙酸(EGTA)所抑制.用Ca^(2+)通道阻断剂氯化镧和异搏定以及EGTA预处理小麦根可抑制铜诱导的NADPH氧化酶活性升高,这类抑制效应也是剂量依赖的。这些结果说明Ca^(2+)参与铜诱导小麦根NADPH氧化酶活性和活性氧产生的调节过程.

镍对小麦根抗氧化酶活性和抗氧化剂含量的影响

研究了重金属镍对小麦根抗氧化酶活性和抗氧化剂含量的影响.结果发现:镍能够显著提高小麦根中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶的活性及抗坏血酸和谷胱甘肽的含量,而抗坏血酸过氧化物酶的活性无明显变化.这些结果表明,抗氧化酶和抗氧化剂在小麦应答镍胁迫的反应中可能起重要作用.