茯苓酸调节Hippo信号通路对二乙基亚硝胺诱导的肝癌大鼠的治疗作用研究

[目的]探讨茯苓酸调节Hippo信号通路对二乙基亚硝胺(DEN)诱导的肝癌大鼠的治疗作用。[方法]取SD大鼠随机分为对照组、模型组、茯苓酸低剂量(3.5 mg/kg)组、茯苓酸中剂量(7 mg/kg)组、茯苓酸高剂量(14 mg/kg)组、氟尿嘧啶(50 mg/kg)组,每组10只,模型组和给药组大鼠通过腹腔注射DEN诱导建立肝癌模型,对照组大鼠腹腔注射等剂量0.9%氯化钠溶液,以茯苓酸和氟尿嘧啶分组处理后检测各组大鼠血清肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平;检测各组大鼠体质量变化、肝脏指数、肝表面癌结节数、最大癌结节体积;以苏木精-伊红(HE)染色检测各组大鼠肝组织病理形态并比较其炎症细胞浸润数;以试剂盒检测大鼠血清炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-17、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与氧化应激因子超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)水平;以蛋白免疫印迹法检测各组大鼠肝组织Hippo信号通路相关蛋白[Yes相关蛋白(YAP)、LATS1]表达。[结果]与对照组比较,模型组大鼠肝组织发生明显癌变,给药结束后体质量、血清SOD、CAT水平显著降低(P<0.05),血清ALT、AST、IL-6、IL-17、TNF-α与MDA水平、肝脏指数、肝表面癌结节数、最大癌结节体积、炎症细胞浸润数、肝组织LATS1蛋白表达及p-YAP1/YAP1显著升高(P<0.05);与模型组比较,茯苓酸低、中、高剂量组、氟尿嘧啶组大鼠肝组织癌变症状均减轻,给药结束后体质量、血清SOD、CAT水平升高(P<0.05),血清ALT、AST、IL-6、IL-17、TNF-α与MDA水平、肝脏指数、肝表面癌结节数、最大癌结节体积、炎症细胞浸润数、肝组织LATS1蛋白表达及p-YAP1/YAP1降低(P<0.05),且茯苓酸各组呈剂量依赖性(P<0.05);茯苓酸高剂量组与氟尿嘧啶组大鼠比较,各指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]茯苓酸可降低Hippo信号通路活性,抑制DEN诱导的炎症和氧化应激,减轻大鼠肝组织损伤并缓解其癌变症状,改善大鼠肝功能。

内镜逆行阑尾炎治疗术与腹腔镜阑尾切除术在治疗急性阑尾炎中的应用效果比较

目的比较内镜逆行阑尾炎治疗术(ERAT)与腹腔镜阑尾切除术(LA)在治疗急性阑尾炎中的应用效果。方法选取2019年10月至2020年12月该院普外科收治的急性阑尾炎患者75例作为研究对象,采用随机数字表法分为ERAT组(37例)和LA组(38例)。ERAT组行ERAT,LA组行LA。比较2组患者手术相关指标(包括手术时间、术中出血量、术后卧床时间、住院时间等)、疼痛评估结果、炎性细胞因子水平及术后并发症发生情况。结果ERAT组患者手术时间、术后卧床时间、住院时间均明显短于LA组,术中出血量明显少于LA组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2组患者术后12 h疼痛视觉模拟评分(VAS)均低于术前,且ERAT组患者明显低于LA组,差异均有统计学意义(P<0.05);2组患者术后24 h VAS均低于术前、术后12 h,差异均有统计学意义(P<0.05);2组患者术后24 h VAS比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2组患者术后7 d血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均低于术前,血清IL-4、IL-10水平均高于术前,且ERAT组患者术后7 d血清IL-1β、TNF-α水平均低于LA组,血清IL-4、IL-10水平均高于LA组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ERAT组患者术后并发症发生率明显低于LA组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论与LA比较,ERAT治疗急性阑尾炎手术时间、术后卧床时间、住院时间均更短,术中出血量更少,疼痛更轻,能更有效地降低血清炎性细胞因子水平及术后并发症发生率。

基于Wnt信号通路研究表没食子酸儿茶素没食子酸酯对肝星状细胞活化的作用及机制

目的基于Wnt信号通路探究表没食子酸儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对人肝星状细胞LX-2活化的影响及其作用机制。方法体外培养LX-2细胞,CCK-8法筛选EGCG的实验浓度;取对数生长期的LX-2细胞,设置对照组(正常培养)、模型组[10 ng/mL转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)]、EGCG低剂量组(12.5μmol/L EGCG+10 ng/mL TGF-β1)、EGCG高剂量组(25.0μmol/L EGCG+10 ng/mL TGF-β1)、EGCG+siRNA-NC组[小窝蛋白-1(Caveolin-1,Cav-1)-siRNA阴性对照+25.0μmol/L EGCG+TGF-β1]和EGCG+Cav-1-siRNA组(Cav-1-siRNA+25.0μmol/L EGCG+TGF-β1),CCK-8法检测各组细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期分布情况;吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)染色法观察细胞凋亡形态;qRT-PCR法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitors of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1)mRNA表达情况;Western blotting检测细胞Cav-1和Wnt信号通路相关蛋白表达情况。结果EGCG降低LX-2细胞存活率,呈剂量相关性。与对照组相比,模型组LX-2细胞存活率、S期和G2/M期的细胞比例、细胞α-SMA、CollagenⅠ、TIMP-1 mRNA表达和Wnt1、Wnt5a、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白Cyclin D1、原癌基因c-Myc蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、G0/G1期的细胞比例、凋亡细胞比例、Cav-1蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);与模型组相比,EGCG低、高剂量组LX-2细胞存活率、S期和G2/M期的细胞比例、细胞α-SMA、CollagenⅠ、TIMP-1 mRNA表达和Wnt1、Wnt5a、β-catenin、Cyclin D1、c-Myc蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、G0/G1期的细胞比例、凋亡细胞比例、Cav-1蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);且在EGCG干预的基础上,沉默Cav-1的表达可显著上调Wnt1、Wnt5a蛋白表达,减弱EGCG对Wnt信号通路的抑制作用。结论EGCG可能通过上调Cav-1表达,抑制Wnt信号通路激活,进而抑制LX-2细胞活化。