2种脱水处理流程在病理切片制备中的应用及对比分析

目的探讨肾穿刺标本手工及机器2种脱水处理方法在病理切片制备中的差异,总结出合适的脱水处理方法,从而制备规范化的肾穿刺病理切片,有助于提高肾脏病理诊断,为临床诊疗提供可靠的依据。方法送检肾穿刺标本分别进行手工及全自动封闭脱水机处理,处理后的标本分别进行苏木精-伊红染色(HE)及特殊染色。结果机器脱水与手工脱水处理相比,手工脱水处理的标本制备出的病理切片,颜色对比更鲜明、亮丽。结论优秀的病理切片有助于提高病理诊断。

MG53蛋白对脂多糖诱导的小鼠海马神经元细胞氧化损伤的影响

目的:研究MG53蛋白对脂多糖(LPS)损伤的小鼠海马神经元细胞HT22的保护作用。方法:用不同质量浓度(25、50、100、250、500、1 000、1 500 mg/L)LPS分别处理HT22细胞12、24、36、48、60 h后,CCK-8法检测细胞增殖,筛选LPS的作用时间及浓度。将HT22细胞分为正常对照组、MG53(30 mg/L)组、LPS组和MG53+LPS组,分别采用CCK-8法、Annexin V-FITC/PI双染法、流式细胞术和划痕实验检测各组细胞存活率、凋亡、细胞周期和迁移距离,ELISA法检测细胞内SOD活性和MDA含量,采用Western blot法检测Bax、Bcl-2和Cyclin D1蛋白的表达。结果:经筛选,选定以500 mg/L的LPS作用48 h为细胞模型的实验条件。MG53可降低HT22细胞的凋亡率,促进G0/G1期细胞向S期转运,增加其迁移距离;升高细胞内SOD活性,降低MDA含量,增加细胞内Bcl-2和Cyclin D1蛋白表达,降低Bax蛋白表达(P<0.05)。结论:MG53蛋白对LPS诱导的HT22细胞氧化损伤具有保护作用。

表达可溶性程序性死亡受体1溶瘤腺病毒对B16／F10细胞增殖凋亡的影响及其机制

目的构建表达可溶性程序性死亡受体1（sPD1）溶瘤腺病毒并研究其对B16/F10细胞增殖凋亡影响及机制。方法构建表达sPD1溶瘤腺病毒并感染B16/F10细胞株，荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术对比分析病毒复制功能，噻唑蓝（MTT）法检测重组病毒抑制B16/F10生长；注射病毒于B16/F10皮下瘤小鼠模型中，观察肿瘤体积变化，EliSpot技术检测肿瘤浸润淋巴细胞数量。结果病毒处理B16/F10细胞6、24、36、48、60、72 h后，Ad5处理组病毒拷贝数增加倍数分别是0.99±0.10、1.12±0.05、1.57±0.15、3.59±1.03、6.26±0.74、9.69±1.46；Ad5-sPD1处理组病毒拷贝增加倍数分别是1.00±0.104、0.99±0.08、1.05±0.03、3.56±1.04、6.04±0.38、11.05±1.12，两组比较差异无统计学意义（P=0.754）；分别使用不同病毒量，感染复数（MOI）为0、5、10、15、20的病毒处理B16/F10细胞72 h后，Ad5处理组细胞活力为（100.00±6.39）%、（101.60±5.21）%、（98.66±7.31）%、（93.50±4.54）%、（73.16±2.45）%；Ad5-sPD1处理组细胞活力为（100.00±6.38）%、（97.10±6.37）%、（96.96±7.44）%、（95.67±7.46）%、（74.49±4.14）%，两组比较差异无统计学意义（P=0.779）；Mock（无病毒感染）、Ad5和Ad5-sPD1病毒治疗B16/F10皮下瘤小鼠模型，实验终止时，肿瘤体积分别是（3 638±1.823）、（2 603±336）、（1 097±532） cm^3，差异有统计学意义（Mock和Ad5：P=0.044，Mock和Ad5-sPD1：P=0.000，Ad5和Ad5-sPD1：P=0.000）。Mock、Ad5和Ad5-sPD1病毒分别注射小鼠模型，5 d后，γ-干扰素（IFN-γ）斑点数分别是19.4±7.75、149.8±25.18、314±32.34，各组间差异有统计学意义（Mock和Ad5：P=0.000，Mock和Ad5-sPD1：P=0.000，Ad5和Ad5-sPD-1：P=0.000）。结论表达sPD1溶瘤腺病毒通过阻断免疫抑制通路，增加肿瘤特异性淋巴细胞浸润，提高溶瘤腺病毒的抗肿瘤作用，抑制肿瘤生长。