长链非编码RNA TUG1参与氧糖剥夺所致Neuro-2a细胞凋亡的作用研究

目的探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(Taurine up-regulated gene 1,TUG1)对小鼠脑神经瘤细胞(Neuro-2a,N2a)糖氧剥夺(Oxygen and glucose deprivation, OGD)后细胞凋亡的影响。方法利用CCK-8检测OGD处理后N2a细胞的增殖能力;用Annexin V-FITC/PI双染处理后检测细胞凋亡情况,qRT-PCR检测LncRNA TUG1的表达水平;设计LncRNA TUG1特异性siRNA片段(si-TUG1)及阴性对照(Negative control);脂质体转染N2a细胞24 h后将细胞分成Control,OGD,Negative control组、si-TUG1组,除Control组外其他各组进行氧糖剥夺处理24 h;CCK-8评价细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白Bad,Bcl-2,Cleaved-Caspase-3及PI3K/Akt通路激活情况。结果 OGD显著抑制N2a细胞增殖,促进细胞凋亡;LncRNA TUG1表达水平随着OGD处理时间延长而逐步升高(F=134.100,P<0.01);si-TUG1显著降低OGD处理引起的细胞凋亡,并促进细胞增殖;Western blot检测发现,与OGD组比较,si-TUG1能够抑制Bad表达(t=9.409,P<0.01)、促进Bcl-2表达(t=5.067,P<0.01),抑制Cleaved Caspase-3表达(t=5.757,P<0.01),进而抑制细胞凋亡;si-TUG1能够显著上调p-Akt(t=3.850,P<0.01),p-PI3Kp65(t=4.690,P<0.01)的表达,促进通路激活。结论 LncRNA TUG1促进氧糖剥夺所致的N2a细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt通路激活有关。