恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞和NK细胞的检测及其临床意义

本文采用流式细胞技术检测患者外周血T细胞亚群指标改变的规律与肿瘤类型、性别、年龄的关系,并与健康对照组作对比,以探讨恶性肿瘤患者细胞免疫功能变化。资料与方法2010年7～10月收治恶性肿瘤患者553例,全部病例经细胞学或病理学诊断确诊,年龄11～84岁,平均56岁。

SMAD5⁃AS1干扰对人食管癌细胞株Eca109增殖的影响及机制

目的观察长链非编码核糖核酸(LncRNA)信号传导蛋白Sma和Mad相关蛋白同源物5(SMAD5)反义核糖核酸1(SMAD5⁃AS1)干扰对人食管癌细胞株Eca109增殖的影响,并初步探讨可能的机制。方法取人食管癌细胞株Eca109培养传代,分别转染SMAD5⁃AS1 siRNA沉默质粒、阴性对照质粒,并记为siRNA⁃1组、siRNA阴性对照组,另取未转染细胞记为对照组,每组设置3个复孔。实时逆转录聚合酶链反应(RT⁃qPCR)检测各组SMAD5⁃AS1、表观遗传诱导LncRNA⁃1(EPIC1)信使核糖核酸(mRNA)表达;细胞计数试剂⁃8(CCK⁃8)法检测各组细胞增殖活性;流式细胞仪检测各组细胞周期分布;RT⁃qPCR检测各组细胞细胞周期D1(cyclinD1)、促凋亡基因(Bad)、抗凋亡基因(Bcl⁃2)mRNA表达;蛋白质免疫印迹法(WB)检测各组细胞cyclinD1、Bad、Bcl⁃2蛋白表达。结果各组细胞SMAD5⁃AS1、EPIC1 mRNA表达水平比较:对照组>siRNA阴性对照组>siRNA⁃1组,差异有统计学意义(P<0.05);各组细胞增殖活性比较:siRNA⁃1组>siRNA阴性对照组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组和siRNA阴性对照组比较,siRNA⁃1组cyclinD1和Bcl⁃2 mRNA与蛋白表达均下降,差异有统计学意义(P<0.05),G1/S期细胞占比、BadmRNA及蛋白表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05),上述指标siRNA阴性对照组和对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论SMAD5⁃AS1干扰可抑制人食管癌细胞株Eca109增殖,将其阻滞于G1/S期,推测与下调EPIC1、cyclinD1及Bcl⁃2表达,上调Bad表达有关。