山药总RNA不同提取方法的比较研究

为提取高质量的山药总RNA,以铁棍山药茎段为材料,采用Trizol法、RNAiso for Polysacchariderich Plant Tissue法、改良CTAB法和试剂盒法提取总RNA,利用琼脂糖凝胶电泳分析所提取RNA的完整性,并用超微量分光光度计分析RNA的纯度.结果显示采用Trizol法难以提RNA,RNAiso for Polysacchariderich Plant Tissue法提取效果不理想,存在DNA和蛋白质污染,而用改良CTAB法和试剂盒法提取到的总RNA纯度高、完整性好,其中,改良CTAB法较试剂盒法价格便宜,但提取过程较烦琐.因此,应根据实验需要选择CTAB法或试剂盒法提取铁棍山药总RNA.本结果对其他品种山药或富含多糖多酚类物质植物的RNA的提取也具有一定借鉴意义.

怀山药种栽质量分级标准研究

以收集的30份怀山药种栽为研究材料,采用K均值聚类法划分种栽等级,制定分级标准;在此基础上,研究不同等级种栽与出苗率、生长、品质及产量的关系.结果表明:所收集的怀山药种栽可分为3个等级,分级指标与怀山药种栽质量等级划分的相关程度依次为:百根质量>围径>饱满度>净度>长度;种栽质量等级与出苗率、生长、产量及品质等相关指标均呈正相关,可作为怀山药种栽的质量控制参考标准,建议生产上选用一、二级种栽.

不同光质对47号山药零余子愈伤组织诱导的影响

以47号山药脱毒试管苗诱导的零余子为材料,研究了光质和培养基组合对愈伤组织诱导形成时间及诱导率的影响,再将其培养在最佳培养基中,研究不同光质对愈伤组织鲜重、干重和生长率的影响.结果表明,从愈伤组织诱导形成的时间和诱导率方面,红光与MS+6-BA 2mg.L-1+2,4-D 2mg.L-1组合最佳,第6d开始形成愈伤组织,30d时愈伤组织诱导率达到100%;从愈伤组织的生长方面,白光和红光有利于愈伤组织鲜重的增加,白光和黄光有利于愈伤组织干物质的积累,红光和黄光有利于愈伤组织生长率的提高;而绿光则起了抑制作用.

农杆菌介导的怀山药叶片瞬时表达方法的建立

高效的瞬时表达体系是方便、快捷的研究怀山药基因启动子活性、基因功能和生产重组蛋白的新途径.本研究选取怀山药叶片为受体,以β-葡糖醛酸酶(GUS)和绿色荧光蛋白(GFP)的基因为报告基因,对共培养时间进行分析,得到二者瞬时表达的最初时间以及较佳观察时间,建立根癌农杆菌介导的怀山药瞬时表达技术体系.结果显示:当注射的菌液浓度OD600=0.6,共培养3d时,GUS基因和GFP基因开始有表达,二者适于观察的共培养时间分别为5d和4d.

铁棍山药试管苗快繁培养基的优化

研究了不同植物生长调节剂(TDZ、6-BA、KT和NAA)浓度及其组合对铁棍山药试管苗快繁的影响,结果表明:KT和NAA组合时,在MS+KT 2mg·L-1+NAA 0.02mg·L-1培养基中试管苗高度达7.67cm,但繁殖系数只有2.67;在KT和NAA组合的基础上再添加TDZ后,在MS+KT 2mg·L-1+NAA 0.02mg·L-1+TDZ 0.02mg·L-1培养基中试管苗繁殖系数提高到6.00,试管苗健壮且生长旺盛;在比较不同细胞分裂素(KT,6-BA和TDZ)与NAA组合对试管苗快繁的影响时发现,6-BA与NAA组合最不适合试管苗的生长,KT与NAA组合中的试管苗生长缓慢,繁殖系数低,TDZ与NAA组合的培养基中有类原球茎形成.因此,综合以上研究结果,本实验认为KT、TDZ和NAA组合的培养基(MS+KT 2mg·L-1+NAA 0.02mg·L-1+TDZ 0.02mg·L-1)更适于铁棍山药试管苗的快繁.

不同因子对“金丰一号”金银花生根的影响

研究了基本培养基,IBA,活性炭和蔗糖对"金丰一号"金银花生根的影响,结果表明:基本培养基为1/2 MS时,生根效果较佳;IBA 3 mg.L-1,时,试管苗生长较好,生根也快;从节约成本出发,蔗糖的浓度为15 g.L-1对生根较为有利.即适于生根的培养基为1/2 MS+IBA 3 mg.L-1+0.2 g.L-1活性炭+15 g.L-1蔗糖.