吲哚丁酸对怀牛膝幼苗生长及谷胱甘肽抗氧化酶系统的影响

对怀牛膝幼苗施加不同浓度的吲哚丁酸(IBA),研究IBA对其幼苗生长及谷胱甘肽抗氧化酶系统的影响.结果显示:1.0mg/L IBA能同时显著提高怀牛膝叶片中谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)的活性及蛋白质含量(P<0.05),并能促进其幼苗株高、根长和根干重的增加.结论:1.0mg/L IBA促进了牛膝幼苗的生长,提高了叶片中谷胱甘肽抗氧化酶系统的活性及蛋白质含量,有效的增强了植株的抗逆性.

茉莉酸甲酯对牛膝生长及主要药用成分积累的影响

不同浓度的外源茉莉酸甲酯(Me JA)对牛膝生长及其主要药用成分齐墩果酸和蜕皮甾酮均有不同的影响。该文采用不同浓度的Me JA分别浸种处理牛膝种子:0(对照)、0.1 mmol·L-1(T1)、0.15 mmol·L-1(T2)、0.2 mmol·L-1(T3)、0.25 mmol·L-1(T4),对照(CK)以同体积的蒸馏水浸泡。取浸种处理后生长培养60 d的牛膝植株,测定牛膝的株高、根长、地上及地下部分的生物量;取牛膝的叶及根,HPLC法测定其齐墩果酸和蜕皮甾酮的含量,研究Me JA对牛膝生长及主要药用成分齐墩果酸和蜕皮甾酮积累的影响。结果表明:0.15 mmol·L-1Me JA浸种处理,对牛膝生长及生物量的促进作用最佳,其株高、根长、地上部分鲜重及根鲜重分别比对照显著升高43.9%、38.7%、26.4%、64.0%(P<0.05);0.15 mmol·L-1Me JA处理,对牛膝的根和叶中齐墩果酸的积累作用最佳,分别比对照组显著增加了114.3%和60%(P<0.05);0.25 mmol·L-1Me JA处理,对牛膝根中蜕皮甾酮的积累最佳,比对照高出90.3%(P<0.05),却不利于根和叶中齐墩果酸的积累,并可抑制叶中蜕皮甾酮的形成。说明0.15 mmol·L-1Me JA浸种处理对牛膝的生长及其根和叶中齐墩果酸的积累作用最佳,并能显著促进根中蜕皮甾酮的积累,有利于牛膝药材产量和品质的提高。

怀牛膝毛状根诱导及培养体系的建立

以牛膝叶片为外植体,研究了不同发根农杆菌、培养基、乙酰丁香酮(AS)对毛状根诱导率及其生长的影响.结果表明,发根农杆菌不同菌种对牛膝叶片转化率有显著影响,3个供试菌种中ATCC15834菌株诱导率最高;在1/2MS无激素固体培养基上毛状根的诱导率及生长状况均优于MS培养基;100μmol·L-1 AS可以有效提高毛状根诱导率.毛状根从叶片形态学下端中脉切口处形成的愈伤组织上产生,能在无外源激素的培养基上自主生长.PCR扩增结果显示发根农杆菌Ri质粒的rolB基因已在牛膝毛状根基因组中插入、整合并得到表达.建立了牛膝毛状根诱导培养体系,为利用毛状根大规模生产药用成分奠定了基础.

怀牛膝悬浮细胞培养的动力学研究

以怀牛膝悬浮细胞系为试材,对牛膝细胞悬浮培养动力学进行了研究,采用HPLC、原子吸收分光光度法和电导率测定等方法,分析了牛膝悬浮细胞生长、营养消耗和三萜皂苷积累的动力学关系。结果表明:牛膝细胞悬浮培养周期约为24d,经24d的悬浮培养,最大生物量和齐墩果酸含量分别达到了13.47mg/L和1.418mg/g;牛膝悬浮细胞生长与三萜皂苷积累的动力学关系属于生长偶联型。培养过程中培养液的pH值呈先下降后回升的趋势,而电导率逐渐减小,24d时降到最低点,而后略有上升。经15d培养,培养基中的蔗糖即消耗殆尽;培养21d后,培养基中大量的氮源、磷源、K+和Mg2+被消耗,而Ca2+比较充足,基本可以满足细胞生长的需要。由此可推断,培养液中营养成分的不足限制了细胞的快速增长和三萜皂苷含量的提高。

吲哚丁酸对牛膝生长及主要药用成分积累的影响

以牛膝幼苗为试材,对其叶面喷施不同浓度的吲哚丁酸(IBA),研究IBA对其生长及主要药用成分齐墩果酸、蜕皮甾酮含量的影响。结果表明:适宜浓度IBA处理能促进牛膝地上部分和根的生长,使根的干重增加,并能显著提高根中主要药用成分齐墩果酸、蜕皮甾酮含量,IBA的最佳浓度为1.0mg/L。但IBA对叶中齐墩果酸含量没有显著影响,使蜕皮甾酮的含量显著降低。