河南新野产紫甘蓝花青素的提取工艺和调节双卵巢切除模型(OVX)小鼠糖耐量的研究

[目的]探讨新野产紫甘蓝中花青素提取的最适条件,并揭示其对更年期模型动物糖耐量的调节作用。[方法]利用紫外-可见分光光度计和Greey公式直接计算提取液中花青素光密度和含量,探讨乙醇浓度、温度、提取时间和料液比等单因素对花青素提取的作用,并利用正交试验获得最佳提取条件;利用双卵巢切除模型小鼠(OVX)和腹腔葡萄糖耐量试验(IPGTT)研究紫甘蓝花青素对模型小鼠糖耐量的改善作用,利用定量PCR探讨相关机理。[结果]单因素试验发现,在酸化乙醇的条件下,乙醇浓度为40%、温度为55℃、提取时间为4 h、料液比为1∶15(g∶mL)时提取效果最好;正交试验表明,提取温度70℃、乙醇浓度60%、提取时间4 h、料液比1∶20为最佳提取条件,在此条件下,1 kg紫甘蓝中可得到花青素148.8 mg。花青素灌胃[100 mg/(kg·d),0.5 mL]处理OVX小鼠70 d后,相较假手术对照组,OVX手术导致小鼠糖耐量显著降低,曲线下面积(AUC)增加37.2%(P<0.05);普通甘蓝对糖耐受的调节并不显著,紫甘蓝花青素则可使OVX动物糖耐量的AUC降低30.5%,与假手术组的基本相当。定量PCR研究发现,相对假手术组(Shm+H_(2)O),OVX手术(OVX+H_(2)O)小鼠肝脏葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)的表达水平升高了(5.22±1.02)倍,OVX+花青素组(OVX+BOR)和OVX+0.02 mg/(kg·d)补佳乐(OVX+E_(2))的表达量分别升高了(2.40±0.34)和(1.82±0.18)倍,与OVX+H_(2)O和OVX+BO组相比,OVX+E_(2)组、OVX+BOR组均显著降低了肝脏中G6Pase水平。[结论]紫甘蓝是天然花青素的重要来源,其可通过降低OVX小鼠肝脏中G6Pase的表达改善糖耐量,对缓解更年期高血糖等代谢综合征有一定的价值。

火针对化疗所致神经病理性疼痛大鼠外周敏化的镇痛作用机制

目的:从外周敏化角度探讨火针治疗奥沙利铂诱导的神经病理性疼痛(NP)大鼠外周敏化的镇痛机制。方法:SD大鼠随机分为正常组(n=6)、模型组(n=6)、火针组(n=6)和药物组(n=6)。采用腹腔注射奥沙利铂(4 mg/kg)建立NP大鼠模型。造模后的第1、3、5天(即实验的第24、26、28天),火针组行火针L4—L6“夹脊”治疗,药物组行普瑞巴林(100 mg/kg)腹腔注射治疗。Von Frey丝检测大鼠缩足阈值(PWT)代表机械痛阈值,ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、趋化因子12(CXCL12)含量,HE染色法观察大鼠穴区皮肤病理形态,甲苯胺蓝染色法观察各组大鼠穴区皮肤肥大细胞数量,免疫组织化学法检测大鼠穴区皮肤类胰蛋白酶(TPS)、瞬时受体电位香草酸通道1(TRPV1)、蛋白酶活化受体2(PAR2)阳性表达,Western blot法检测大鼠背根神经节(DRG)中TRPV1和PAR2蛋白的表达。结果:与正常组相比,模型组大鼠造模后的PWT降低(P<0.05),血清IL-6、TNF-α、CXCL12含量升高(P<0.05),穴区皮肤肥大细胞数量增加(P<0.05),穴区皮肤TPS、TRPV1和PAR2蛋白阳性表达升高(P<0.05)。与模型组相比,火针组和药物组大鼠干预后的PWT升高(P<0.05),血清IL-6、TNF-α、CXCL12含量,穴区皮肤TPS、TRPV1、PAR2蛋白阳性表达降低(P<0.05);药物组DRG中TRPV1和PAR2蛋白表达量降低(P<0.05)。HE染色结果显示,模型组大鼠穴区表皮层增厚,细胞排列层次紊乱,细胞间水肿明显,真皮层内可见大量炎性细胞浸润;药物组、火针组穴区表皮层较薄,细胞排列层次较清晰,组织水肿和炎性细胞浸润情况均较模型组减轻。结论:火针可以改善奥沙利铂诱导的NP大鼠的机械痛阈、降低外周炎性因子的水平,该作用可能与抑制肥大细胞活化,抑制穴区局部TPS、TRPV1和PAR2蛋白的表达有关。