副猪嗜血杆菌的分离鉴定及药敏试验

黑龙江省近几年频繁发生以多发性浆膜炎、关节炎、脑膜炎以及急性死亡为特征的传染病,为猪场造成严重经济损失,为了确诊是否有副猪嗜血杆菌感染,采集病死猪肝脏、脾脏和肺脏等病料,进行副猪嗜血杆菌的分离;对其理化特性进行鉴定,应用PCR方法对其16SrRNA基因扩增后进行克隆测序,将测序结果在GenBank上进行BLAST分析,把相近的基因序列应用DNAStar软件进行同源性和进化关系分析;用分离菌株进行药物敏感性试验,筛选敏感药物。结果分离出一种具有多形性的NAD依赖性菌株,经鉴定为副猪嗜血杆菌;16SrRNA基因进化分析结果表明,分离菌株与以往报道的副猪嗜血杆菌中国、日本和美国分离株属于同一亚群,而西班牙分离株属于单独的亚群;分离菌株对壮观霉素和头孢拉定高度敏感。

我国部分地区奶山羊无浆体感染情况的调查

为了解我国奶山羊无浆体病的流行情况,应用套式PCR方法对2012年7月至2014年9月采自河南、云南、陕西共12个县区奶山羊的300份血样和204份奶样无浆体16SrRNA基因和MSP4基因进行检测,结果在血液样品中共检出3种无浆体,分别为嗜吞噬细胞无浆体(Anaplasma phagocytophilum)、牛无浆体(A.bovis)和绵羊无浆体(A.ovis),阳性率分别为18%(54/300)、21.67%(65/300)、5.33%(16/300);血液无浆体总阳性率为23%(69/300);陕西奶山羊3种无浆体阳性率分别为A.phagocytophilum20.09%(47/234)、A.bovis 20.94%(49/234)、A.ovis 6.41%(15/234),河南分别为A.phagocytophilum11.11%(7/63)、A.bovis 25.4%(16/63),A.ovis 1.59%(1/63);云南均为0%(0/3)。仅在1份羊奶样品中检出A.ovis,阳性率为0.49%(1/204)。调查结果表明,奶山羊无浆体感染普遍存在;不同地区、不同品种、不同饲养方式奶山羊的无浆体阳性率及优势种存在差异;A.phagocytophilum作为人兽共患病原,在奶山羊养殖中应予高度重视。

密闭式猪舍自动通风系统的应用效果

如今，规模化已成为养猪业发展的主要趋势，这样的养殖生产方式对猪舍环境控制水平提出了较高的要求。因此，密闭式猪舍及其环境控制系统应运而生，尤其是在冬季寒冷的北方地区，这样的猪舍有着显著的优势。通风系统是环境控制系统的重要组成部分，在保证猪舍空气质量和控制舍内温度等方面发挥着重要作用。笔者先后在辽宁正大畜禽有限公司财落种猪场（图1）、河南正大畜禽有限公司延津种猪场学习工作，其彩钢结构的密闭式猪舍均采用了Big Dutchman-MC135CT Ver.2气候电脑控制系统，现就该系统在养猪生产过程中的实际应用效果和存在的一些问题与大家探讨。

我国部分地区奶山羊肠道寄生虫感染情况调查

采用离心沉淀法、卢戈氏碘液染色法、饱和蔗糖溶液漂浮法和麦克马斯计数法对采自河南省西峡县和陕西省富平、麟游、泾阳、高陵县共316份奶山羊新鲜粪便样品进行检查，结果表明，共发现11种（类）寄生虫，寄生虫总感染率高达98．1％（310／316），优势虫种为球虫、阿米巴以及圆线虫，其中以球虫感染率最高，达88．6％（280／316），最高OPG达56000；阿米巴和圆线虫的感染率分别为65．5％和37．7％，圆线虫最高EPG达7000；隐孢子虫、贾第虫、鞭虫、细颈线虫、肺线虫、莫尼茨绦虫、矛形双腔吸虫、蛲虫的感染率分别为0．3％、0．9％、3．2％、0．3％、4．1％、4．1％、1．3％、0．3％；75．0％的阳性样品为2～4种寄生虫混合感染，且以2种寄生虫混合感染率最高，高达47．2％；舍饲和放牧奶山羊的寄生虫感染率分别为98．6％和97．1％。可见，我国奶山羊的肠道寄生虫感染较为普遍。

与猪场建立紧密型关系是技术服务的趋势

养猪技术服务在我国经历了几代的更迭,传统的服务模式已经不能满足养猪场的需要,也顺应不了我国养猪业发展的＂潮流＂。未来,与猪场建立起紧密型的关系才是技术服务的未来。

饲料企业如何盈利

饲料企业经过30年的发展．目前已达到了比较成熟的阶段。那么，如何才能盈利？怎样才能“拧干毛巾的最后一滴水”？笔者综合所学、所见、所闻就此略论一二．

表达猪圆环病毒Ⅱ型ORF2基因的重组猪伪狂犬病病毒的免疫原性

【目的】为研制预防猪圆环病毒II型(PCV2)感染的重组伪狂犬病病毒(PRV)活载体疫苗。【方法】将PCV2 ORF2基因插入到PRV通用载体pG中,利用脂质体LipofectamineTM2000试剂盒将重组转移质粒pGO与猪PRV弱毒HB98株DNA共转染猪睾丸(ST)细胞,通过3轮蚀斑纯化重组病毒。将重组病毒、商品化PCV2灭活苗及DMEM培养液分别免疫6周龄雌性昆明小鼠,4周后加强免疫1次,首免后第8周用PCV2强毒NY株对小鼠进行攻毒。【结果】成功获得表达ORF2基因的重组病毒PGO,首免重组病毒后小鼠体内抗PCV2的ELISA抗体水平很低,二免后小鼠PCV2特异的ELISA抗体水平明显升高,并且重组病毒组能够激发PCV2特异的淋巴细胞增殖效应。攻毒试验表明重组病毒组和PCV2灭活疫苗组均能有效抵抗PCV2强毒攻击。【结论】表明表达ORF2基因的重组病毒PGO具有良好免疫原性。

PCV2 ORF2蛋白重组PRV病毒PGO株的生物学特性

PCV2ORF2蛋白重组PRV病毒生物学试验研究表明:重组病毒PGO株在PK15细胞、ST细胞、VERO细胞、IBRS-2细胞上病毒增殖滴度分别为104.125/0.1、106.125/0.1、104.625/0.1、106.25/0.1mL。RT-PCR、倒置荧光显微镜观察、IPMA试验结果表明插入基因在重组病毒中进行表达。该重组病毒具有PRV病毒的通性;安全性试验结果表明该重组病毒对小鼠是安全的;遗传稳定性研究表明包含有PCV2ORF2基因的重组伪狂犬病毒具有稳定的遗传性状;这些研究为研发PCV2病毒重组伪狂犬病毒疫苗奠定了基础。