褪黑素调节LPS诱导奶牛乳腺上皮细胞炎性因子的表达及其机制

为探索褪黑素降低奶牛乳腺上皮细胞炎性损伤的作用机制,分别用不同浓度的脂多糖(LPS)诱导奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)产生炎症反应,采用MTT法确定LPS的最佳致炎剂量,建立体外MAC-T炎症模型;采用ELISA检测褪黑素对LPS诱导MAC-T分泌TNF-α和IL-6、IL-8的影响;采用荧光定量PCR检测褪黑素对LPS诱导MAC-T Toll样受体信号通路关键因子,TLR4、NF-κB p50、NF-κB p65 mRNA表达量的影响。结果显示,5 mg/L LPS是诱导MAC-T炎症模型的最佳剂量,可极显著提高MAC-T培养液上清中TNF-α和IL-6、IL-8的含量(P<0.05),而50μmol/L褪黑素可显著下调LPS诱导的MAC-T炎症因子TNF-α和IL-6、IL-8的蛋白表达(P<0.05)。同时,TLR4/NF-κB信号通路关键因子NF-κB p50 mRNA的表达量也显著下调。表明褪黑素可能通过调节TLR4/NF-κB信号通路,影响LPS诱导的MAC-T炎症损伤反应。

褪黑素对热应激奶牛乳腺上皮细胞及育成牛血清HSP70含量的影响

为了研究褪黑素(MLT)对热应激奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)及中国荷斯坦育成牛血清中热休克蛋白70(HSP70)含量的影响,试验将体外培养的MAC-T分为对照组、热应激组、热应激+150μmol/L MLT组,以42℃作为热应激模型温度,37℃作为对照组培养温度,采用细胞增殖法检测细胞活力、实时荧光定量PCR检测细胞凋亡因子半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3),炎性因子IL-6、IL-8和HSP70 mRNA相对表达量;以处于热应激状态的中国荷斯坦育成牛为试验动物,随机分为对照组、试验A组、试验B组,分别皮下注射0,4.6,46 mg/d MLT,采用ELISA试剂盒测定奶牛血清中HSP70含量。结果表明:热应激处理4 h的MAC-T细胞活力与对照组相比显著降低(P<0.05),添加150μmol/L MLT可以显著升高MAC-T细胞活力(P<0.05);与对照组比较,热应激可以极显著上调MAC-T细胞凋亡因子Caspase-3和HSP70 mRNA的相对表达量(P<0.01),显著上调炎性因子IL-6、IL-8的相对表达量(P<0.05);与热应激组比较,添加150μmol/L MLT可以极显著上调HSP70 mRNA的相对表达量(P<0.01),极显著下调细胞凋亡因子Caspase-3(P<0.01)及显著下调炎性因子IL-6、IL-8(P<0.05)的相对表达量;皮下注射46 mg/d MLT可显著提升热应激育成牛第6天血清HSP70的含量(P<0.05)。说明MLT可以提高热应激MAC-T的应激耐受性,减少炎性损伤和细胞凋亡;皮下注射46 mg/d MLT可以提高育成牛的热应激耐受性,有利于高温环境中维持自身内环境的稳定。

优质牛肉安全生产研究进展

从抗生素的使用、食源性致病菌、转基因作物与饲用安全性等三个方面综述了优质牛肉安全生产的国外研究进展,以期对我国优质牛肉安全生产提供借鉴。总结了抗生素在肉牛养殖中利用现状、抗生素耐药性和对公共健康影响的研究进展。概述了肉牛养殖中减少食源性致病菌的措施。简述了转基因作物的种植现状和安全性评价。

外源褪黑素对热应激荷斯坦育成牛血清生化指标的影响

为研究外源褪黑素对荷斯坦育成牛抗热应激的效果,试验选择年龄、胎次、体重相近的25头健康荷斯坦育成牛,随机分成5组(A、B、C、D、E)。试验共12 d,第1~6 d采用皮下注射的方式给药。A组注射10mL生理盐水,B组注射10mL(0.46mg/mL)、C组注射10mL(4.6mg/mL)的褪黑素制剂,D组注射10mL(0.46mg/ml)、E组注射10ml(4.6mg/mL)的褪黑素缓释剂。结果表明,育成牛在中高度热应激状态下,外源褪黑素能够显著升高育成牛血清中T3、COR激素水平(P<0.05),同时T4激素水平升高;显著提高育成牛血清GSP-Px酶活力(P<0.05),显著降低MDA含量(P<0.05);显著降低育成牛血清HSP70含量(P<0.05);皮下注射10ml(4.6mg/mL)褪黑素制剂效果最好。