miR-375靶向调控YAP表达对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的:探讨miR-375靶向调控Yes相关蛋白(Yes-associated protein, YAP)的表达对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:收集2015年1月至2016年12月河南中医药大学第二附属医院普外二科行手术切除的70例肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)患者的癌组织及对应的癌旁组织标本,以及肝癌细胞系SMMC-7721、Hb611、HepG2和BEL-7405,用qPCR法检测HCC癌组织和肝癌细胞中miR-375的表达水平。双荧光素酶报告基因检测miR-375与YAP的相互作用;分析miR-375和HCC患者的临床病理特征之间的关系,MTT法检测miR-375对肝癌细胞增殖能力的影响,Transwell小室法检测抑制miR-375表达后HCC细胞侵袭能力的变化;Western blotting检测HepG2细胞中YAP的表达。建立裸鼠肝癌皮下移植瘤模型,观察抑制miR-375表达后移植瘤体积和质量的变化,免疫组化法和Western blotting检测裸鼠移植瘤中YAP的表达情况。结果:HCC组织中miR-375和YAP表达水平明显高于癌旁组织(均P<0.05),肝癌HepG2细胞中miR-375的表达水平最高(P<0.05)。miR-375能与YAP的3’UTR特异性结合,调控YAP的表达活性。抑制miR-375的表达后,HepG2细胞增殖、侵袭的能力显著减弱(均P<0.05),裸鼠移植瘤体积和质量都明显减小(均P<0.05),移植瘤组织细胞中YAP的表达水平相应下调(P<0.05)。结论:miR-375在肝癌的发生发展过程中起重要作用,可以通过靶向调控YAP的表达影响肝癌细胞的恶性生物学行为。