黄连素抑制肺炎克雷伯菌生物膜形成作用机制研究

目的探讨黄连素对肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)生物膜形成的作用,为KP相关感染的诊疗提供理论依据。方法结晶紫半定量法观察不同浓度黄连素对KP生物膜形成过程的影响;实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-PCR)法检测1/8最低抑菌浓度(MIC)、1/4 MIC、1/2 MIC黄连素对KP的Ⅰ型和Ⅲ型菌毛fimA、fimH、mrkA、mrkD、fimK、mrkH基因表达的调控作用。结果与对照组相比,黄连素组生物膜总量随黄连素浓度的增加而明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,黄连素组fimA、fimH、mrkA、mrkD、fimK、mrkH基因的表达水平均显著降低(P<0.05)。结论黄连素有效抑制KP生物膜的形成与下调KP的Ⅰ型和Ⅲ型菌毛结构基因fimA、fimH、mrkA、mrkD以及调控基因fimK、mrkH的表达有关。

中药单体治疗溃疡性结肠炎的研究进展

溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)作为常见的炎症性肠病,多发生于中青年。中药单体是从中药里面提取的活性成分,中药单体对慢性疾病具有较好的疗效,是不可或缺的药物。近年来,中药单体对UC的研究与日俱增,使得治疗UC的中药也越来越多,极大地促进了研究中医药对UC治疗的进程。本文分别总结了生物碱类、多糖类、黄酮类等有效中药单体治疗UC的最新研究报道,对作用机制进行综述,为临床治疗UC以及科研研发新药提供新思路和新方向。

华蟾素干预下化疗药物对BRAF^(V600E)基因突变型甲状腺乳头状癌细胞的生物学影响

目的初步探讨华蟾素干预下,化疗药物作用于BRAF^(V600E)基因突变型甲状腺乳头状癌(PTC)细胞后,对肿瘤细胞增殖、凋亡及侵袭能力等方面的影响及其可能的分子机制。方法通过细胞划痕实验和Transwell细胞侵袭实验检测华蟾素干预下对B-CPAP细胞的迁移和侵袭影响;采用CCK-8细胞活力试剂盒、流式细胞术检测20nM华蟾素干预下化疗药物阿霉素和卡铂对B-CPAP的细胞活力和凋亡影响。结果华蟾素对B-CPAP细胞的迁移和侵袭能力无显著影响;在华蟾素干预下,阿霉素与卡铂处理下的B-CPAP细胞的活力均显著降低,凋亡率显著升高(P<0.01)。结论华蟾素联合化疗药物可增加PTC细胞的化疗敏感性,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。

槲皮素对铜绿假单胞菌LasB诱导THP-1巨噬细胞应激反应的保护作用

目的:探讨槲皮素对LasB诱导THP-1巨噬细胞凋亡、炎症反应和氧化应激的保护作用,旨在为槲皮素作为毒力抑制剂用于铜绿假单胞菌感染治疗提供借鉴和参考。方法:采用实验性研究。实验菌株为标准菌株,利用重组蛋白表达技术获得LasB蛋白,弹性蛋白刚果红法和荧光标记弹性蛋白法检测LasB酶活性。构建LasB诱导的THP-1巨噬细胞感染模型并使用槲皮素干预,CCK-8比色法检测细胞活力,倒置显微镜观察细胞形态。TUNEL联合Annexin V/PI染色法检测细胞凋亡。RT-qPCR和ELISA检测炎症细胞因子和环氧合酶水平。DCFH-DA荧光染色检测胞内ROS水平。采用单因素方差分析对实验数据进行统计学分析,多重比较采用Tukey检验。结果:成功获得相对分子质量33 000的纯度>90%的具有弹性蛋白水解活性的pLasB蛋白。pLasB(100 μg/ml)刺激下,THP-1巨噬细胞活力显著下降,细胞完整率明显降低,细胞凋亡率显著升高,炎性细胞因子IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-10、IL-12和TNF-α水平显著上调,细胞内ROS荧光强度和 COX-2 水平明显增加。而在2.5 μmol/L、5 μmol/L和10 μmol/L浓度槲皮素干预下,THP-1巨噬细胞活力明显改善,细胞凋亡率从18.32%±0.17%分别降低至13.17%±0.20%、11.43%±0.06%和7.74%±0.04%( F=1 679, P<0.05);促炎细胞因子IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-12和TNF-α显著下调,抗炎细胞因子IL-10显著上调;细胞内ROS荧光强度( F=86.92, P<0.05)和 COX-2表达水平( F=24.62, P<0.05)均明显下降。 结论:槲皮素能有效干预铜绿假单胞菌LasB诱导的THP-1巨噬细胞凋亡、炎症和氧化应激,可能作为铜绿假单胞菌的毒力抑制剂。

革兰阴性菌外膜囊泡在感染和免疫调节中的研究进展

革兰阴性菌释放的细胞外囊泡源于细胞最外层膜,被称为外膜囊泡(outer membrane vesicle,OMV),含有磷脂、脂多糖、外膜蛋白和细菌特异性抗原等细菌外膜成分。OMV在细菌生理学和致病机制中发挥重要作用,可参与生物膜形成、基因水平转移、应激和炎症反应、毒素和其他生物分子的传递等,且在免疫调节以及肠道微生物群的建立和平衡中也起着重要作用。本文对OMV在细菌感染及免疫调节中的作用进行综述,为细菌导致的感染性疾病预防和治疗提供新的思路,并对OMV在肿瘤靶向治疗和新型疫苗制备中的潜在应用价值进行展望。

铜绿假单胞菌动物感染模型的构建及研究进展

铜绿假单胞菌是一种致病机制和耐药机制复杂、发病率和死亡率高的机会致病菌,可致免疫功能低下个体各种组织部位的急、慢性感染,临床以肺部感染、伤口感染和血流感染最为常见。铜绿假单胞菌动物感染模型通过模拟人体细菌感染途径,对深入研究铜绿假单胞菌致病性、耐药性及其防治措施具有重要的应用价值。本文就铜绿假单胞菌动物感染模型构建中实验动物的选择、麻醉和处置进行概述,并对铜绿假单胞菌肺部感染、伤口感染和血流感染动物模型的构建方法、模型评估以及应用进行阐述,以期为铜绿假单胞菌感染性疾病相关科学研究工作提供参考。