浅析多媒体技术在中医骨伤科学教学中的应用

多媒体技术在中医骨伤科学教学中有着自身的优势,补充传统教学之不足,有效地促使传统教学模式的转型,两者结合,使中医骨伤科学的教学模式更加通俗、易懂、生动,学习气氛也更加活跃积极,有利于提高教学对学生的影响,提升中医骨伤科学的教学质量、水平及教学效果。

中医护理技术在强直性脊柱炎中的应用进展

对中药熏蒸、穴位贴敷、灸法、中药热敷疗法、中医情志护理等中医护理技术在强直性脊柱炎患者中的临床应用进行综述,指出目前对强直性脊柱炎的中医护理技术多为短期研究,辨证施护不够精细以及操作方法缺乏规范性,需要在今后的护理中不断完善,以期为强直性脊柱炎患者提供更全面更优质的护理使患者获益更多。

强直性脊柱炎患者疾病体验的Meta整合

目的:系统整合强直性脊柱炎患者的患病体验,为改善患者的生命质量提供科学的依据。方法:检索数据库中关于强直性脊柱炎患者患病体验的质性研究,检索时间为建库起至2022年4月26日。采用澳大利亚JBI循证卫生保健中心的质量评价标准进行质量评价,并对结果进行整合。结果:最终纳入7篇文献,提炼出22个原始主题,形成9个新的类别并归纳为3个整合结果:对疾病的感知、对疾病的应对、渴望支持与理解。结论:强直性脊柱炎患者在生理、心理等方面有复杂的体验,护士与家庭成员应关注患者的疾病感知变化,重视患者的疾病应对策略,提供多方面的支持与理解,促使其建立健康的行为方式。

百令胶囊对脊柱结核术后血沉和C-反应蛋白水平的影响研究

目的探讨百令胶囊对脊柱结核术后患者血沉、C-反应蛋白水平的影响,并观察其临床疗效。方法选取2012年1月~2013年3月河南省中医院骨科收治的脊柱结核术后患者62例,采取随机数字表法分为2组,其中对照组31例,给予四联抗结核常规治疗,为期12个月;实验组31例,在常规治疗基础上加用百令胶囊,3g/次,1天3次口服,3个月为1个疗程,治疗4个疗程。观察2组患者治疗后血沉恢复情况、C-反应蛋白水平及临床疗效。结果治疗后,实验组血沉恢复时间为(1.30±0.52)月,明显短于对照组的(2.68±0.61)月,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后2组患者C-反应蛋白均得到明显改善,且实验组(8.22±2.12)mg/L较对照组(15.34±3.72)mg/L明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,实验组临床疗效(93.55%)明显优于对照组(83.87%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论服用百令胶囊能够明显改善脊柱结核术后患者病情,对临床具有指导意义。

中药穴位贴敷在颈椎病患者康复治疗护理中的应用

目的探讨中药穴位贴敷在颈椎病患者康复治疗护理中的应用效果。方法选取2019年12月至2022年12月我院收治的90例颈椎病患者,按照抽签法分为观察组与对照组。对照组采用常规干预,观察组在对照组基础上采用中药穴位贴敷。比较两组的颈椎功能及活动度。结果干预后,两组的NPQ、NDI评分降低,且观察组的NPQ、NDI评分低于对照组(P<0.05)。干预后,两组的颈椎左旋转、右旋转、左侧屈、右侧屈活动度升高,且观察组颈椎左旋转、右旋转、左侧屈、右侧屈活动度高于对照组(P<0.05)。结论中药穴位贴敷用于颈椎病患者可降低其颈椎功能障碍,减轻颈项疼痛感,改善颈椎关节活动度。

接骨七厘片结合经皮穿刺骨水泥成形术强化治疗老年骨质疏松性胸腰椎骨折疗效观察

目的:观察接骨七厘片结合经皮穿刺骨水泥成形术强化治疗老年骨质疏松性胸腰椎骨折的临床效果。方法:90例随机平均分成两组各45例,两组皆行经皮穿刺骨水泥成形术强化治疗,术后口服碳酸钙D3片、骨化三醇胶丸,观察组加用接骨七厘片。结果:两组治疗后VAS评分、骨折愈合指标、骨代谢指标均改善(P<0.05),观察组改善程度更为显著(P<0.05)。观察组骨折愈合时间短于对照组(P<0.05)。观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。结论:经皮穿刺骨水泥成形术后联合接骨七厘片治疗老年骨质疏松性胸腰椎骨折可提高疗效。

黄芩苷通过调控巨噬细胞M2极化对脊髓损伤大鼠炎症反应的抑制作用

目的:探讨黄芩苷对大鼠脊髓损伤(SCI)的保护作用,阐明其作用机制。方法:体内实验应用改良Allen氏打击法建立大鼠SCI模型,50只健康SD大鼠随机分为假手术组(给予生理盐水)、模型组(给予生理盐水,建立SCI模型)、黄芩苷组(SCI大鼠给予200 mg·kg^-1黄芩苷)、黄芩苷+DMSO组(SCI大鼠给予200 mg·kg^-1黄芩苷和0.2%DMSO)和黄芩苷+AS1517499(STAT6通路抑制剂)组(SCI大鼠给予200 mg·kg^-1黄芩苷和10 mg·kg^-1 AS1517499),每组10只。造模成功后用贝索-比蒂-布雷斯纳汉(BBB)评分评价大鼠脊髓运动功能。体外实验用2.5μg·L^-1脂多糖(LPS)和0.125μg·L^-1干扰素γ(IFN-γ)诱导巨噬细胞(RAW264.7)M1型极化,10μg·L^-1白细胞介素4(IL-4)诱导RAW264.7细胞M2型极化。RAW264.7细胞分为对照组、M1型极化组、M2型极化组、M1型极化+黄芩苷组、M2型极化+黄芩苷组、M1型极化+黄芩苷+DMSO组和M1型极化+黄芩苷+AS1517499组。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠脊髓组织和RAW264.7细胞中炎症因子[白细胞介素12(IL-12)、TNF-α、IL-4和白细胞介素10(IL-10)]水平,Western blotting法检测大鼠脊髓组织和RAW264.7细胞中M1型巨噬细胞标记蛋白[诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和趋化因子5(CCL-5)]及M2型巨噬细胞标记蛋白[精氨酸酶1(Arg1)、甘露糖受体C1(MRC1)和Janus激酶1/信号转导及转录激活蛋白6(JAK1/STAT6)通路相关蛋白]表达水平。结果:体内实验,与模型组比较,黄芩苷组大鼠BBB评分明显升高(P<0.05),脊髓组织中IL-12和TNF-α水平及iNOS、CCL-5和磷酸化信号转导及转录激活蛋白1(p-STAT1)蛋白表达水平明显降低(P<0.05),IL-4和IL-10水平及Arg1、MRC1、磷酸化JAK1(p-JAK1)和磷酸化STAT6(p-STAT6)蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01);与黄芩苷+DMSO组比较,黄芩苷+AS1517499组大鼠脊髓组织中IL-12和TNF-α水平及iNOS、CCL-5和p-STAT1蛋白表达水平明显升高(P<0.01),IL-4和IL-10水平及Arg1、MRC1和p-STAT6蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。体外实验,与M1型极化组比较,M1型极化+黄芩苷组RAW264.7细胞中iNOS、CCL-5和p-STAT1蛋白表达水平明显降低(P<0.05),p-JAK1和p-STAT6蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与M2型极化组比较,M2型极化+黄芩苷组RAW264.7细胞中Arg1和MRC1蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与M1型极化+黄芩苷+DMSO组比较,M1型极化+黄芩苷+AS1517499组RAW264.7细胞中IL-12和TNF-α水平明显升高(P<0.05),IL-4和IL-10水平明显降低(P<0.05),p-JAK1蛋白表达水平明显升高(P<0.05),p-STAT6、Arg1和MRC1蛋白表达水平明显降低(P<0.05),iNOS和CCL-5蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:黄芩苷通过促进巨噬细胞M2型极化,激活JAK1/STAT6通路,对SCI大鼠炎症反应起到一定抑制作用。

牛膝总皂苷调控Nampt/NAD/Sirt1轴诱导骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化

背景:研究表明,骨髓间充质干细胞可向髓核样细胞分化,但分化机制尚不明确。目的:利用牛膝总皂苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化,并探讨Nampt/NAD/Sirt1轴在其中的作用。方法:取第3代SD大鼠骨髓间充质干细胞,随机分成4组:(1)骨髓间充质干细胞组;(2)骨髓间充质干细胞+牛膝总皂苷组;(3)骨髓间充质干细胞+牛膝总皂苷+烟酰胺单核苷酸组(烟酰胺单核苷酸为促NAD合成的外源性小分子物质);(4)骨髓间充质干细胞+牛膝总皂苷+FK866组(FK866为烟酰胺磷酸核糖转移酶抑制剂)。连续诱导培养14d,阿尔新蓝染色法检测细胞内糖胺多糖含量,RT-PCR检测髓核样细胞相关基因COL2、Aggrecan、KRT19和PAX1 mRNA表达,Western blot检测COL2的蛋白表达,Sirt1测定试剂盒检测Sirt1活性,NAD^+/NADH试剂盒检测NAD+含量。结果与结论:(1)与骨髓间充质干细胞组相比,骨髓间充质干细胞+牛膝总皂苷组能够使糖胺多糖、髓核样细胞相关基因表达、COL2蛋白表达、Sirt1活性、NAD^+含量明显增加(P <0.05);(2)与骨髓间充质干细胞+牛膝总皂苷组相比,骨髓间充质干细胞+牛膝总皂苷+烟酰胺单核苷酸组糖胺多糖、髓核样细胞相关基因表达、COL2蛋白表达、Sirt1活性和NAD^+含量增加(P<0.05);相反,骨髓间充质干细胞+牛膝总皂苷+FK866组上述指标均降低(P <0.05);(3)结果表明,牛膝总皂苷可诱导大鼠骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化,Nampt/NAD/Sirt1轴在其中发挥促进作用。

血管内皮生长因子与转化生长因子的协同作用诱导兔骨髓间充质干细胞分化

目的研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和转化生长因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的协同作用对兔骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响及其可能机制。方法将细胞分为4组:对照组、腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)-VEGF组、AAV-TGF-β1组和VEGF+TGF-β1组。穿刺法抽取兔骨髓液,分离培养原代BMSCs,分别构建AAV-VEGF和AAV-TGF-β1腺病毒载体转染BMSCs,Western blot检测各组细胞中VEGF、TGF-β1的蛋白表达。流式细胞术检测细胞凋亡情况,CCK8法检测细胞增殖能力,Western blot检测髓核细胞标志SOX-9、Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达,以及P38MAPK信号通路相关蛋白P38、MAPKAPK2和HSP27的表达。加入P38MAPK的特异阻滞剂SB203580预处理BMSCs,检测VEGF和TGF-β1对BMSCs增殖、凋亡、分化及相关蛋白表达的影响。结果 VEGF和TGF-β1可通过调节P38MAPK信号通路抑制BMSCs凋亡,促进BMSCs增殖,并向类髓核细胞分化,且在其协同作用下效果显著。抑制P38MAPK信号通路可反转VEGF和TGF-β1对BMSCs增殖分化能力的促进作用。结论 VEGF和TGF-β1的协同作用能增强BMSCs增殖和分化的能力,提高胶原蛋白和蛋白聚糖等细胞外基质的表达,从而促进退变椎间盘的修复和再生。

赤芍总苷对脊髓损伤大鼠脊髓细胞凋亡的影响及机制

目的探讨赤芍总苷(TPG)对脊髓损伤(SCI)大鼠脊髓细胞凋亡的影响及机制。方法SD大鼠18只,随机分为对照组、SCI组与TPG组,每组6只。采用Allen法制备SCI大鼠模型。对照组大鼠切除椎板后,不予以脊髓打击直接缝合。TPG组在SCI模型建立成功后每24 h腹腔注射25 mg/kg TPG,SCI组和对照组腹腔注射同体积的生理盐水,共处理28 d。采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分法对大鼠进行行为学评分,流式细胞术检测脊髓细胞凋亡情况,Western blotting检测脊髓细胞凋亡蛋白cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的表达。采用试剂盒检测脊髓组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量。结果与对照组比较,SCI大鼠BBB评分明显降低,脊髓细胞凋亡率以及凋亡蛋白cleaved caspase-3、cleaved caspase-9表达明显增高,脊髓组织中MDA、LDH含量升高,SOD含量降低(P<0.05)。与SCI组比较,TPG组大鼠BBB评分明显增高,脊髓细胞凋亡率以及凋亡蛋白cleaved caspase-3、cleaved caspase-9表达明显降低,脊髓组织中MDA、LDH含量降低,SOD含量升高(P<0.05)。结论TPG对SCI大鼠脊髓细胞凋亡有抑制作用,其作用机制可能与TPG对氧化应激的调节有关。

骨形态发生蛋白9激活PI3K/Akt信号通路抑制退变髓核细胞的炎症反应和凋亡

目的研究骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)对退变髓核细胞炎症反应和凋亡的影响,并探究其与PI3K/Akt信号通路的关系。方法通过氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)培养建立退变髓核细胞模型;重组腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)将BMP9转染入人髓核细胞内(human nucleus pulposus cells,HNPCs),实验共分5组:Control组(正常培养的HNPCs)、OGD组(氧糖剥夺模型)、AAV组(氧糖剥夺模型,转染AAV空载体)、AAV-BMP9组(氧糖剥夺模型,转染AAV-BMP9),AAV-BMP9+LY294002组(AAV-BMP9组基础上添加PI3K抑制剂LY294002)。免疫荧光方法检测蛋白聚糖(Aggrecan)和Ⅱ型胶原(typeⅡcollagen,Col2a1)的表达;Western blot检测p-Akt和p-m TOR的蛋白表达;酶联免疫吸附实验检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的表达;流式细胞术检测细胞的凋亡。结果在氧糖剥夺培养模型中Aggrecan和Col2a1表达明显降低;AAV-BMP9组中p-Akt和p-m TOR的表达明显高于OGD组和AAV组(P<0.05);此外,AAV-BMP9组HNPCs分泌的TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8明显减少,细胞凋亡被显著抑制(P<0.05);LY294002的加入能够显著逆转BMP9的上述效果。结论 BMP9能够抑制退变HNPCs的炎症反应和凋亡,并且这种作用是通过激活PI3K/Akt信号通路实现的。

当归对氧化应激损伤的大鼠髓核细胞增殖和胞外基质合成的影响

目的:研究当归对氧化应激损伤的大鼠髓核细胞增殖和胞外基质合成的影响。方法:大鼠髓核细胞分为对照组、H_2O_2组、H_2O_2+当归组。H_2O_2组加入400μmol/L H_2O_2刺激6 h;H_2O_2+当归组先加入1 g/L当归溶液培养24 h,然后加入H_2O_2刺激6 h;对照组不进行任何处理。MTT检测细胞活力,Western blot检测增殖相关蛋白[增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞周期蛋白(Cyclin) D1],胞外基质相关因子[蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)、基质金属蛋白酶(MMP) 3和MMP9]以及Wnt/β-catenin通路相关因子(β-catenin和c-Myc)蛋白的表达,Real-time PCR检测胞外基质相关因子mRNA的表达。结果:与对照组相比,H_2O_2组细胞活力、PCNA和Cyclin D1蛋白的表达、Aggrecan和CollagenⅡmRNA和蛋白的表达均降低,MMP3和MMP9 mRNA与蛋白的表达、β-catenin和c-Myc蛋白的表达均升高;与H_2O_2组相比,H_2O_2+当归组以上指标均有改善(P均<0.05)。结论:当归可能通过抑制Wnt/β-catenin通路,促进氧化应激损伤后髓核细胞的增殖及胞外基质的合成。

补骨脂素调控SKP2/PTHrP/SIRT1轴缓解炎症环境下髓核细胞退变的作用

目的探讨补骨脂素对白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人髓核细胞(HNPCs)退变的影响及机制。方法体外培养HNPCs,用10 ng/ml IL-1β和50 ng/ml TNF-α诱导HNPCs 24 h使其发生退变,设置对照组、IL-1β+TNF-α组、补骨脂素(10 μmol/L、25 μmol/L和50 μmol/L)组、补骨脂素(25 μmol/L)+S期激酶相关蛋白2(SKP2)干扰或过表达组、补骨脂素+甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)重组蛋白(100 nmol/L)组、补骨脂素+PTHrP重组蛋白(100 nmol/L)+沉默信号调节子1(SIRT1)激活剂SRT1720(1 μmol/L)组。采用流式细胞术检测髓核细胞凋亡情况;ELISA法检测髓核细胞中IL-6、基质金属蛋白酶3(MMP-3)和MMP-13的表达水平;DCFDA探针法检测髓核细胞中活性氧(ROS)的水平;Western blotting检测髓核细胞中SKP2、PTHrP、SIRT1、细胞外基质(ECM)相关蛋白[二型胶原蛋白(COL Ⅱ)和蛋白聚糖蛋白]的表达水平;蛋白质免疫共沉淀(Co-IP)实验检测SKP2与PTHrP蛋白的相互作用;泛素化实验检测补骨脂素对SKP2介导的PTHrP泛素化水平的影响。结果补骨脂素以剂量依赖的方式抑制炎症环境下髓核细胞凋亡以及IL-6、MMP-3、MMP-13和ROS的生成(P<0.05或P<0.01),促进SKP2和ECM相关蛋白的表达(P<0.05)。与补骨脂素+杂乱干扰组比较,补骨脂素+SKP2干扰组SKP2和ECM相关蛋白的表达水平明显降低(P<0.05),髓核细胞凋亡率、IL-6、MMP-3、MMP-13和ROS水平明显增高(P<0.05或P<0.01)。Co-IP实验结果显示,SKP2与PTHrP蛋白存在相互作用。泛素化实验结果显示,与补骨脂素+空载体组比较,补骨脂素+SKP2过表达组PTHrP蛋白表达水平明显降低,SKP2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与补骨脂素组比较,补骨脂素+PTHrP重组蛋白组SIRT1和ECM相关蛋白表达水平明显降低(P<0.05),髓核细胞凋亡率、IL-6、MMP-3、MMP-13和ROS水平明显升高(P<0.05);与补骨脂素+PTHrP重组蛋白组比较,补骨脂素+PTHrP重组蛋白+SRT1720组PTHrP蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),SIRT1和ECM相关蛋白表达水平明显升高(P<0.05),髓核细胞凋亡率、IL-6、MMP-3、MMP-13和ROS水平明显降低(P<0.05)。结论补骨脂素可通过促进SKP2介导的PTHrP泛素化降解而活化SIRT1,抑制炎症环境下髓核细胞的凋亡。

重组腺相关病毒介导的BMP13和SOX9共转染促进骨髓间充质干细胞向类髓核细胞分化

目的观察骨形态发生蛋白13(bone morphogenetic protein 13,BMP13)和性别决定区Y框蛋白9(sex determining region Y box protein 9,SOX9)基因共转染对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向类髓核细胞分化的影响。方法通过腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)将目的基因导入BMSCs中;细胞分为4组:对照组、AAV-SOX9组、AAV-BMP13组和共转染组(AAV-SOX9+AAV-BMP13);应用实时荧光定量PCR技术检测mRNA表达水平;Western blot法检测蛋白表达水平;糖胺聚糖检测试剂盒检测糖胺聚糖的合成水平;MTT法检测细胞增殖。结果共转染组BMP13和SOX9的表达水平明显高于AAV-SOX9组、AAV-BMP13组和对照组(P<0.05);共转染组的糖胺聚糖合成水平、角蛋白19(keratin 19,KRT19)及蛋白聚糖(Aggrecan)和Ⅱ型胶原蛋白(typeⅡcollagen,Col2a1)的表达水平明显高于AAV-SOX9组、AAV-BMP13组和对照组(P<0.05);另外,AAV-SOX9和AAV-BMP13及共转染组的细胞增殖活性明显高于对照组(P<0.05),但AAV-SOX9组和AAV-BMP13组与共转染组的增殖活性相比差异无显著性(P>0.05)。结论 BMP13和SOX9双基因转染的BMSCs向类髓核细胞分化的能力明显高于单基因转染组,为椎间盘突出疾病的细胞治疗提供理论依据和参考。

负载重组人骨形态发生蛋白2磷酸钙骨水泥与纤维蛋白胶复合材料促进骨质疏松性骨折的愈合

背景:骨形态发生蛋白2是目前研究最广泛与诱导成骨活性最强的骨形态发生蛋白之一,但是单纯骨形态发生蛋白植入后会被组织液稀释及蛋白酶分解,不能保持持久的药物浓度,难以发挥有效的骨诱导作用。目的:实验以磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料作为骨形态发生蛋白2的载体,观察其对骨质疏松性骨折的修复效果。方法:取54只雌性SD大鼠,切除双侧卵巢制作骨质疏松模型,3个月后制作股骨中段骨折模型,随机分成3组,每组18只,克氏针内固定组骨折断端不注射任何材料;复合材料组骨折断端注射0.5m L磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料,载生长因子复合材料组骨折断端注射0.5m L负载重组人骨形态发生蛋白2的磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料。骨折后4,12周,进行股骨骨折标本X射线检查、Micro-CT检测、生物力学三点弯曲实验及病理观察。结果与结论:①载生长因子复合材料组骨折愈合评分高于克氏针内固定组、复合材料组(P <0.05);②载生长因子复合材料组骨折后4,12周的骨体积分数、骨小梁厚度及骨小梁数量均高于克氏针内固定组、复合材料组(P <0.05),骨小梁分离度均低于克氏针内固定组、复合材料组(P <0.05);③载生长因子复合材料组骨折后4,12周的最大载荷、刚度均高于克氏针内固定组、复合材料组(P <0.05),骨折后4周的弹性模量高于克氏针内固定组、复合材料组(P <0.05);④克氏针内固定组骨折后4周主要可见纤维软骨骨痂,骨折后12周骨痂重塑为板状骨,硬骨痂含量较少;复合材料组、载生长因子复合材料组骨折后4周可见明显的纤维性骨痂与软骨性骨痂,载生长因子复合材料组硬骨痂含量较复合材料组多,骨折后12周硬骨痂重塑为板状骨;⑤结果说明,负载重组人骨形态发生蛋白2的磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料,可促进骨质疏松性骨折的愈合,提高骨强度。

PELD治疗腰椎间盘突出症新进展

腰椎间盘突出症（lumbar disc herniation,LDH）是因椎间盘退变、纤维环破裂、髓核突出刺激和压迫神经根、马尾神经而产生腰部疼痛、下肢放射痛或麻木、会阴部麻木、刺痛,大小便功能障碍等症状的一种综合征,大部分患者通过保守可以治愈,不过仍有10%～20%的保守治疗效果不佳而需要手术治疗。

Paxillin对骨髓间充质干细胞向类髓核细胞分化的影响

目的 :探讨Paxillin对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向类髓核细胞分化的影响。方法 :取3周龄健康SD大鼠骨髓,采用全骨髓贴壁法培养BMSCs,传至第3代,用流式细胞仪对其表面标志分子进行鉴定。利用pc DNA3.1(-)/Myc-His B质粒构建真核表达载体pc DNA3.1-Paxillin。取第3代BMSCs分为3组:实验组,转染pc DNA3.1-Paxillin;阴性对照组,转染pc DNA3.1(-)/Myc-His B;空白对照组,不转染质粒。分别培养36h后,实验组和阴性对照经G418筛选,取3组BMSCs采用实时荧光定量PCR方法(q RT-PCR)检测各组Paxillin、蛋白多糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原α1(collagen typeⅡα1,COL2α1)、性别决定区Y框蛋白9(sex determining region Y box protein 9,SOX9)、角蛋白19(keratin19,KRT19)、配对盒1(paired box 1,PAX1)和叉头蛋白(forkhead box F1,FOXF1)的m RNA表达量;免疫印迹法(Western blot)检测Paxillin、KRT19、PAX1和FOXF1蛋白表达水平。结果:BMSCs原代培养至第3代的细胞形态大体一致,呈长梭形,细胞连接紧密且均匀分布,CD44、CD90呈现高表达(95.6%和96.8%),CD45、CD11则呈现低表达(1.82%和2.16%)。实验组中Paxillin的m RNA和蛋白表达量较阴性对照组和空白对照组升高,差异具有显著性(P<0.05);经G418筛选后的BMSCs和髓核细胞形态相似。实验组中COL2α1、SOX9、Aggrecan、KRT19、PAX1、FOXF1的m RNA表达量较阴性对照组和空白对照组显著性升高(P<0.05);实验组KRT19、PAX1和FOXF1的蛋白表达量显著性高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。结论 :Paxillin可以促进BMSCs向类髓核细胞分化,为椎间盘退变性疾病的细胞移植治疗提供基础。

自我效能感与社会支持在维持性血液透析患者抗逆力提升护理中的应用

目的:研究自我效能感与社会支持在维持性血液透析(MHD)患者抗逆力提升护理中的应用。方法:选取2018年1月至2020年1月血液透析科180例MHD患者作为研究对象。随机分为研究组与对照组,每组90例。对照组透析时采用常规护理方法,研究组在对照组基础上根据自我效能理论增加护理干预并给予社会支持护理,持续干预2月。比较两组护理前后抑郁自评量表(SDS)、焦虑自评量表(SAS)及自我效能(GSES)评分,利用抗逆力水平量表(CD-RISC)对两组护理前后抗逆力水平进行比较,采用社会支持量表(SSRS)对两组护理前后社会支持评分进行比较,利用匹兹堡睡眠障碍指数(PSQI)量表对两组睡眠质量进行比较,利用生活质量量表(QOL)两组护理前后生活质量进行比较。结果:研究组护理后SDS、SAS评分较对照组明显降低,GSES评分明显升高,差异有统计学意义(t=4.503,6.003,10.243;P<0.05);研究组护理后主观支持、客观支持、社会支持利用度评分明显高于对照组(t=5.981,9.474,5.971;P<0.05);研究组护理后力量、乐观、坚韧与控制评分明显高于对照组(t=2.209,13.982,6.398;P<0.05);研究组护理后PSQI评分明显低于对照组、QOL评分明显高于对照组(t=5.586,4.629;P<0.05)。结论:对MHD患者进行自我效能及社会支持干预可明显改善患者焦虑及抑郁情绪,提升患者社会支持及自我效能感,有效提升患者抗逆力,具有良好的应用价值。

转化生长因子β1对大鼠髓核细胞凋亡影响的实验研究

目的 :探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对大鼠髓核细胞凋亡的影响以及其作用机制。方法:采用序贯酶消化法分离培养SD大鼠髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs),实验用第3代培养的NPCs,分为6组:A组,空白对照组,用DMEM培养基常规培养,不加任何处理;B组,用含有终浓度为20ng/ml肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)的DMEM培养基培养;C组,用含有终浓度为50ng/ml TNF-α的DMEM培养基培养;D组,用含有终浓度为100ng/ml TNF-α的DMEM培养基培养;E组,用同时含有终浓度为100ng/ml TNF-α和10ng/ml TGF-β1的DMEM培养基培养;F组,在E组培养基的基础上加TGF-β1/smad通路抑制剂SB431542(设置终浓度为10μmol/L)进行培养。培养12h后,Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测细胞增殖活性,逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RTPCR)检测各组细胞中基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinases 3,MMP3)、凋亡相关蛋白(bcl-2-associated x protein,Bax)、蛋白聚糖(ACAN)、Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)m RNA相对表达量,Western blot检测各组细胞中MMP3、Bax、ACAN、CollagenⅡ、磷酸化的smad3蛋白(phosphorylate drosophila mothers against decapentaplegic protein 3,p-smad3)和Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)蛋白表达量。结果 :与A组相比,不同剂量的TNF-α(B^D组)均能够促进MMP3(B^D组依次为0.652+0.015、0.899+0.018、1.026+0.023)和Bax(B^D组依次为0.725+0.058、0.928+0.018和1.138+0.019)的表达,诱导髓核细胞的凋亡,并且呈现剂量依赖性关系。与D组相比,E组MMP3(0.568+0.015)和Bax(0.626+0.024)表达下调,ACAN(1.056+0.014)、CollagenⅡ(1.098+0.032)、p-smad3和Runx2表达量增高,差异有统计意义(P<0.05)。与E组相比,F组MMP3(1.015+0.015)和Bax(1.126+0.024)表达上调,ACAN(0.314+0.023)、CollagenⅡ(0.299+0.0.19)、p-smad3和Runx2表达量下降,差异有统计意义(P<0.05)。结论 :TGF-β1可能是通过激活smad/Runx2通路来拮抗TNF-α诱导的大鼠髓核细胞凋亡。

护理硕士专业学位研究生课程设置现状及思考

分析我国护理专业学位研究生课程设置概况,包括课程设置的目的、内容、教学方式、课程考核评价4个方面。通过对比分析课程体系的不足之处,提出针对性的改进策略,逐步完善护士硕士专业学位研究生课程体系构建,为今后培养临床专业护理人才奠定基础。