血型嵌合体一例血清学特点及基因学测序分析

目的:对一例疑似血型嵌合体进行血清学及基因学鉴定。方法:采用血清学标准方法鉴定ABO血型;PCR扩增ABO基因7个外显子及其侧翼序列,通过测序分析进行基因学定型;采用凝聚胺介质和Liss-coombs卡进行交叉配血试验。结果:血清学正定型表现为抗A凝集(强度为4+),抗B呈混合凝集(±)且抗B管底部有大量红细胞。反定型显示A、B、O型细胞均不凝集。家系调查显示其父为B型,母为A型,子为O型,正反定型均一致。测序结果显示ABO基因第6、7外显子存在3个等位基因A102、B101和O02,其中O02和B101来自于其父,A102来自于其母。配血试验表明AB型悬浮红细胞配血主、次侧均无溶血、无凝集;A、B、O型悬浮红细胞配血主侧无溶血、无凝集,次侧无溶血、有凝集。结论:患者是嵌合体血型。

多发性骨髓瘤全凝集血型处理及输血实践

目的:对多发骨髓瘤全凝集病例进行血清学及分子生物学定型,并探讨其输血实践。方法:初检血型呈全凝集者,红细胞37℃生理盐水洗涤3遍,正定型检测仍有凝集时,56℃水浴箱热放散1 min,再次洗涤后做正定型;血浆用多人份O型洗涤红细胞4℃进行吸收4 h,离心取上清做反定型,结果不理想者复做一次;仍未能判读者取上清置37℃水浴30 min再次如上方式进行反定型检测。经上述处理结果仍然不理想时,进一步应用二硫苏糖醇(DTT)处理检测红细胞或患者红细胞。同时采用中和抑制试验测定患者唾液中和血型物质及PCR扩增1～7外显子测序佐证血型。结果:血型全部得以确认;唾液中和试验与基因定型结果与血清学结果一致;配血试验血红蛋白均有提升。结论:全凝集患者血型定型正确,输血效果良好。

不规则抗体中抗-M抗体的检测及意义

目的:探讨不规则抗体检测中抗-M抗体的检测及其对血型鉴定和交叉配血试验的影响。方法:检测IgG性质抗体用2-巯基乙醇(2-Me)应用液破坏IgM型抗-M;推断抗-M抗体用自制NN型的多人份A细胞核B细胞制备反定型标准红细胞;处理冷凝集用37℃生理盐水洗涤4次后做正定型,洗涤后的红细胞加等量自身血清,在4℃吸收后做反定型。结果:在20 018例住院患者中,检出139例同种不规则抗体,其中17例存在抗-M抗体,抗-M抗体占不规则抗体的比率为12.23%(17/139)。NN型的反定型红细胞正反定型一致。选择与受血者ABO同型的MM型或MN型红细胞交叉配血,卡式配血结果不合;选择与受血者ABO同型的NN型红细胞交叉配血,盐水和抗人球蛋白介质均不凝集,卡式配血结果主次侧均相合。结论:患者血清中存在抗-M抗体影响血型定型及配血,筛选相应红细胞输注无输血不良反应。

ABO基因c.2T>C突变致GTA翻译异常引起的A_xB表型一例及机制分析

目的:对1例ABO正反定型不一致患者的血标本进行鉴定,并探索其潜在的分子机制。方法:血清学标准方法鉴定ABO血型,并进行血浆总体A糖基转移酶(glucanotransferase,GTA)活性测定。对ABO基因7个外显子及其侧翼序列行PCR扩增、直接测序或克隆后测序分析。结果:本例血清学鉴定为A_xB亚型;血浆总体GTA活性明显下降(效价为±);ABO基因外显子1的第2位核苷酸存在T>C错义突变。结论:ABO基因c.2T>C突变导致翻译起始位点被跨膜结构域或茎区域中的Met替代,从而形成N端截短的GTA的表达,进而引起此例患者A_xB表型。