利用人气道基底细胞体外构建类气管球

目的:利用人气道基底细胞体外培养类气管球。方法:利用河南省人民医院肺移植术中弃用的供肺分离并培养人气道基底细胞、肺成纤维细胞。将气道基底细胞和肺成纤维细胞1∶1混合,重悬于基质胶,用EpiX Base培养基培养,以单独培养的基底细胞或肺成纤维细胞为对照。观察是否形成类气管球及不同时间点类气管球的形态,并采用免疫荧光染色明确成熟类气管球的细胞成分。将气道基底细胞老年株或青年株分别和人肺成纤维细胞老年株或青年株联合培养,观察形成的类气管球的差别。结果:气道基底细胞单独培养或与肺成纤维细胞联合培养均可见类气管球形成,肺成纤维细胞单独培养无类气管球形成。类气管球在镜下呈球形,随着培养时间延长球体增大,14~21 d达峰值。免疫荧光染色可见KRT5+P63+基底细胞分布于类气管球球体表面,FOXJ1+纤毛细胞和MUC+分泌细胞分布在管腔内部。培养第20天,与基底细胞青年株相比,基底细胞老年株与成纤维细胞联合培养所形成的类气管球直径更大,数量更多。结论:人气道基底细胞体外培养可形成类气管球,人肺成纤维细胞和气道基底细胞联合培养可促进类气管球的形成。来自老年宿主的基底细胞体外培养所形成的类气管球的直径大于青年宿主且数量更多。

脑和肌肉ARNT样蛋白1水平在食管鳞癌组织的表达及其临床意义

目的:探讨脑和肌肉ARNT样蛋白1(BMAL1)在食管癌组织中表达水平及其与食管癌患者临床病理特征和预后的关系。方法:选取2021年2月至2023年2月河南省人民医院手术切除的77例食管癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用免疫组织化学分析两组组织中BMAL1蛋白表达水平;分析BMAL1表达水平与临床病理特征的关系。以BMAL1表达平均值作为阈值,分为高表达组和低表达组,分析BMAL1表达与预后的关系。组间计量数据比较采用t检验。结果:癌旁组织BMAL1蛋白和mRNA表达水平(1.69±0.28、2.42±0.29)明显低于食管癌组织中BMAL1蛋白和mRNA表达水平(0.87±0.10、1.10±0.28),差异有统计学意义(t=24.280、28.750,P<0.05)。不同年龄、性别和肿瘤大小患者BMAL1蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅲ期患者BMAL1蛋白表达水平(1.87±0.21)明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者(1.44±0.12),差异有统计学意义(t=10.520,P<0.05)。低分化患者BMAL1蛋白表达水平(1.87±0.21)明显高于中高分化患者(1.44±0.12),差异有统计学意义(t=16.710,P<0.05)。淋巴结转移患者BMAL1蛋白表达水平(1.84±0.24)明显高于未淋巴结转移患者(1.46±0.16),差异有统计学意义(t=7.392,P<0.05)。高表达组和低表达组患者3年生存率分别为37.84%(14/37)和62.50%(25/40),高表达患者术后生存率(37.84%)明显低于低表达组(62.50%),差异有统计学意义(Log-rank=10.342,P<0.05)。高表达组患者细胞核增殖抗原(Ki-67)表达阳性率[86.49%(32/37)]明显高于低表达组患者阳性率[42.50%(17/40)],差异有统计学意义(χ^(2)=7.569,P<0.05)。BMAL1表达水平、分化程度、TNM分期和淋巴结转移等特征与食管癌患者预后密切相关(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,BMAL1高表达水平是食管癌患者预后的独立危险因素[风险比(HR)=1.398,95%可信区间(CI):1.123~1.409,P<0.01]。结论:BMAL1在食管癌组织中呈高表达,与患者临床TNM分期、分化程度、淋巴结转移和Ki-67表达水平等临床病理特征和标志物呈正相关,BMAL1表达越高患者预后越差。