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表达可溶性程序性死亡受体1溶瘤腺病毒对B16/F10细胞增殖凋亡的影响及其机制
1
作者
张玉薇
刘广芝
+3 位作者
韩双印
袁蒙蒙
杨广英
秦涛
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第8期1441-1444,共4页
目的构建表达可溶性程序性死亡受体1(sPD1)溶瘤腺病毒并研究其对B16/F10细胞增殖凋亡影响及机制。方法构建表达sPD1溶瘤腺病毒并感染B16/F10细胞株,荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术对比分析病毒复制功能,噻唑蓝(MTT)法检测重组...
目的构建表达可溶性程序性死亡受体1(sPD1)溶瘤腺病毒并研究其对B16/F10细胞增殖凋亡影响及机制。方法构建表达sPD1溶瘤腺病毒并感染B16/F10细胞株,荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术对比分析病毒复制功能,噻唑蓝(MTT)法检测重组病毒抑制B16/F10生长;注射病毒于B16/F10皮下瘤小鼠模型中,观察肿瘤体积变化,EliSpot技术检测肿瘤浸润淋巴细胞数量。结果病毒处理B16/F10细胞6、24、36、48、60、72 h后,Ad5处理组病毒拷贝数增加倍数分别是0.99±0.10、1.12±0.05、1.57±0.15、3.59±1.03、6.26±0.74、9.69±1.46;Ad5-sPD1处理组病毒拷贝增加倍数分别是1.00±0.104、0.99±0.08、1.05±0.03、3.56±1.04、6.04±0.38、11.05±1.12,两组比较差异无统计学意义(P=0.754);分别使用不同病毒量,感染复数(MOI)为0、5、10、15、20的病毒处理B16/F10细胞72 h后,Ad5处理组细胞活力为(100.00±6.39)%、(101.60±5.21)%、(98.66±7.31)%、(93.50±4.54)%、(73.16±2.45)%;Ad5-sPD1处理组细胞活力为(100.00±6.38)%、(97.10±6.37)%、(96.96±7.44)%、(95.67±7.46)%、(74.49±4.14)%,两组比较差异无统计学意义(P=0.779);Mock(无病毒感染)、Ad5和Ad5-sPD1病毒治疗B16/F10皮下瘤小鼠模型,实验终止时,肿瘤体积分别是(3 638±1.823)、(2 603±336)、(1 097±532) cm^3,差异有统计学意义(Mock和Ad5:P=0.044,Mock和Ad5-sPD1:P=0.000,Ad5和Ad5-sPD1:P=0.000)。Mock、Ad5和Ad5-sPD1病毒分别注射小鼠模型,5 d后,γ-干扰素(IFN-γ)斑点数分别是19.4±7.75、149.8±25.18、314±32.34,各组间差异有统计学意义(Mock和Ad5:P=0.000,Mock和Ad5-sPD1:P=0.000,Ad5和Ad5-sPD-1:P=0.000)。结论表达sPD1溶瘤腺病毒通过阻断免疫抑制通路,增加肿瘤特异性淋巴细胞浸润,提高溶瘤腺病毒的抗肿瘤作用,抑制肿瘤生长。
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关键词
溶瘤腺病毒
肿瘤
免疫反应
程序性死亡受体1
原文传递
题名
表达可溶性程序性死亡受体1溶瘤腺病毒对B16/F10细胞增殖凋亡的影响及其机制
1
作者
张玉薇
刘广芝
韩双印
袁蒙蒙
杨广英
秦涛
机构
河南省人民医院 河南省肝胆胰腺疾病医学重点实验室
河南省
人民医院
干细胞研究中心
河南省
人民医院
肝胆
外科
河南
大学附属郑州颐和
医院
病理科
出处
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第8期1441-1444,共4页
基金
国家自然科学基金(31671440)
文摘
目的构建表达可溶性程序性死亡受体1(sPD1)溶瘤腺病毒并研究其对B16/F10细胞增殖凋亡影响及机制。方法构建表达sPD1溶瘤腺病毒并感染B16/F10细胞株,荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术对比分析病毒复制功能,噻唑蓝(MTT)法检测重组病毒抑制B16/F10生长;注射病毒于B16/F10皮下瘤小鼠模型中,观察肿瘤体积变化,EliSpot技术检测肿瘤浸润淋巴细胞数量。结果病毒处理B16/F10细胞6、24、36、48、60、72 h后,Ad5处理组病毒拷贝数增加倍数分别是0.99±0.10、1.12±0.05、1.57±0.15、3.59±1.03、6.26±0.74、9.69±1.46;Ad5-sPD1处理组病毒拷贝增加倍数分别是1.00±0.104、0.99±0.08、1.05±0.03、3.56±1.04、6.04±0.38、11.05±1.12,两组比较差异无统计学意义(P=0.754);分别使用不同病毒量,感染复数(MOI)为0、5、10、15、20的病毒处理B16/F10细胞72 h后,Ad5处理组细胞活力为(100.00±6.39)%、(101.60±5.21)%、(98.66±7.31)%、(93.50±4.54)%、(73.16±2.45)%;Ad5-sPD1处理组细胞活力为(100.00±6.38)%、(97.10±6.37)%、(96.96±7.44)%、(95.67±7.46)%、(74.49±4.14)%,两组比较差异无统计学意义(P=0.779);Mock(无病毒感染)、Ad5和Ad5-sPD1病毒治疗B16/F10皮下瘤小鼠模型,实验终止时,肿瘤体积分别是(3 638±1.823)、(2 603±336)、(1 097±532) cm^3,差异有统计学意义(Mock和Ad5:P=0.044,Mock和Ad5-sPD1:P=0.000,Ad5和Ad5-sPD1:P=0.000)。Mock、Ad5和Ad5-sPD1病毒分别注射小鼠模型,5 d后,γ-干扰素(IFN-γ)斑点数分别是19.4±7.75、149.8±25.18、314±32.34,各组间差异有统计学意义(Mock和Ad5:P=0.000,Mock和Ad5-sPD1:P=0.000,Ad5和Ad5-sPD-1:P=0.000)。结论表达sPD1溶瘤腺病毒通过阻断免疫抑制通路,增加肿瘤特异性淋巴细胞浸润,提高溶瘤腺病毒的抗肿瘤作用,抑制肿瘤生长。
关键词
溶瘤腺病毒
肿瘤
免疫反应
程序性死亡受体1
Keywords
Oncolytic adenovirus
Tumor
Immune response
Programmed cell death protein 1
分类号
R730.5 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
表达可溶性程序性死亡受体1溶瘤腺病毒对B16/F10细胞增殖凋亡的影响及其机制
张玉薇
刘广芝
韩双印
袁蒙蒙
杨广英
秦涛
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
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