CNV-seq技术在辅助生殖技术妊娠流产胚胎染色体异常中的研究价值

目的分析低深度全基因组测序技术(CNV-seq)在辅助生殖技术(ART)妊娠流产胚胎染色体异常中的研究价值。方法选定南阳市第一人民医院2020年6月至2022年6月接诊的98例ART妊娠流产患者,采集所有患者流产物100 mg,以CNV-seq技术检测胚胎染色体情况,同时进行染色体G显带核型分析,比较CNV-seq检查结果与核型检查结果,分析孕妇既往流产次数、孕周、年龄与染色体异常发生率的关系。结果98例患者共检出染色体异常70例,染色体异常率为71.43%,以常染色体重排或缺失、45,X染色体异常最为常见,异常率为14.29%。其次是10三体,占12.86%;13三体,占11.43%;47,XYY,占10.00%;21三体,占10.00%;3三体,占8.57%;2三体,占5.71%;22三体,占4.29%;16三体,占2.86%;8三体,占2.86%;47,XXX,占2.86%。染色体异常发生率自然流产次数≥3次者(90.00%)高于自然流产次数<3次者(66.67%)(P<0.05)。孕周≥12周者染色体异常发生率(57.14%)低于孕周<12周者(82.14%)(P<0.05)。染色体异常发生率年龄≥35岁者(82.50%)高于年龄<35岁者(63.79%)(P<0.05)。结论CNV-seq在ART妊娠流产诊断中具有较高的临床价值,可明确染色体异常类型,辅助临床对患者遗传学病因作出诊断。且ART妊娠流产多发生于孕早期,随着孕妇年龄增大、流产次数增多,染色体异常发生率会明显增高。

黄芩苷对多囊卵巢综合征大鼠颗粒细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨黄芩苷对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠颗粒细胞增殖和凋亡的影响及对磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路的调节作用。方法48只大鼠成功建立PCOS模型,并随机分为模型组、黄芩苷低剂量组、黄芩苷高剂量组和阳性对照组,每组12只,另取12只大鼠作为对照组。黄芩苷低剂量组、黄芩苷高剂量组大鼠分别灌胃25、50 mg∙kg^(−1)黄芩苷,阳性对照组大鼠灌胃0.3392 mg∙kg^(−1)炔雌醇环丙孕酮片(达英-35),对照组和模型组大鼠灌胃等体积生理盐水,每日1次,连续3周。用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immuno⁃sorbent assay,ELISA)检测黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、睾酮(testos⁃terone,T)以及雌二醇(estradiol,E2)含量;用HE染色观察卵巢组织病理损伤,细胞增殖检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测颗粒细胞存活率;用流式细胞仪检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测PI3K、磷酸化磷脂肌醇3-激酶(phospho PI3K,p-PI3K)、Akt以及p-Akt蛋白相对表达量。结果对照组大鼠可见黄体,未见囊状扩张卵泡;模型组大鼠卵巢体积变大,少见黄体,可见囊状扩张卵泡;黄芩苷低剂量组、黄芩苷高剂量组及阳性对照组大鼠卵巢体积变小,可见黄体,囊状卵泡扩增不明显。与对照组比较,模型组FSH和E2水平、颗粒细胞存活率以及p-PI3K和p-Akt蛋白相对表达量降低,LH、T水平和颗粒细胞凋亡率升高(P<0.05);与模型组比较,黄芩苷低剂量组、黄芩苷高剂量组和阳性对照组FSH、E2水平,颗粒细胞存活率及p-PI3K和p-Akt蛋白相对表达量升高,LH、T水平及颗粒细胞凋亡率降低,其中阳性对照组各指标水平变化最显著,其次是黄芩苷高剂量组(P<0.05)。结论黄芩苷可促进PCOS大鼠卵巢颗粒细胞增殖,抑制凋亡,改善卵巢组织病理损伤,其可能是通过激活PI3K/Akt信号通路发挥作用的。

当归提取物对卵巢功能不全大鼠卵巢功能的作用

目的探讨当归提取物对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠卵巢功能的改善是否与Nrf2/HO-1通路介导的炎性调节有关。方法取60只SD雌性大鼠,其中48只通过雷公藤多苷片建立POI模型,造模成功后随机分为模型组及当归提取物低、高剂量组和西药组,其余12只为对照组。当归提取物低、高剂量组分别给予当归提取物25、100 mg·kg^(-1),连续灌胃15 d,西药组给予戊酸雌二醇0.12 mg·kg^(-1),连续灌胃15 d,对照组及模型组给予等量生理盐水,灌胃15 d。测定血清中E_(2)、AMH、LH和FSH的水平;HE染色观察各组大鼠卵巢组织的病理变化和卵泡计数;用RT-qPCR和Western blot检测卵巢组织中Nrf 2和HO-1 mRNA和蛋白的表达情况。结果与模型组比较,其余3组血清E_(2),AMH,原始卵泡、窦前卵泡、窦状卵泡的数量,Nrf 2、HO-1 mRNA和蛋白的表达水平增加,FSH、LH、TNF-α、IL-4、IL-6水平和闭锁卵泡数量减少(P<0.05)。与当归提取物低剂量组比较,当归提取物高剂量组和西药组血清E_(2)、AMH、卵泡数量、Nrf 2、HO-1 mRNA和蛋白的表达水平增加,FSH、LH、TNF-α、IL-4、IL-6水平和闭锁卵泡数量减少(P<0.05)。当归提取物高剂量组与西药组上述指标比较,差异无统计学意义。结论当归提取物可通过激活Nrf 2/HO-1信号通路改善炎性因子水平,在一定程度上修复POI大鼠的卵巢功能,发挥卵巢保护作用。