白藜芦醇调控Wnt信号通路增强替莫唑胺抗脑胶质瘤作用的体内研究

目的探讨白藜芦醇于脑胶质瘤模型体内增强替莫唑胺抗脑胶质瘤作用的分子机制。方法将人源性恶性胶质瘤细胞系T98G移植入BALB/C-nu雌性裸鼠中构建人脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型。造模5 d后将造模成功的48只裸鼠按随机数字表法分为溶剂对照组、白藜芦醇组、替莫唑胺组、联合用药组、Wnt信号通路激动剂组、Wnt信号通路抑制剂组,每组8只,并分别予二甲基亚砜10 mg/kg、白藜芦醇10 mg/kg、替莫唑胺25 mg/kg、白藜芦醇10 mg/kg+替莫唑胺25 mg/kg、白藜芦醇10 mg/kg+替莫唑胺25 mg/kg+氯化锂2 mg/kg、白藜芦醇10 mg/kg+替莫唑胺25 mg/kg+IWR-15 mg/kg腹腔注射,1次/d,持续30 d。给药期间持续观察各组裸鼠的生存状况,每隔5天采用MRI检测肿瘤体积。给药30 d后,采用TUNEL染色检测肿瘤细胞的凋亡情况,采用免疫荧光染色检测肿瘤组织中O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)、β-连环蛋白的免疫荧光强度,采用Western blotting检测Wnt信号通路相关蛋白(Wnt2、β-连环蛋白)、MGMT、糖原合成激酶3β(GSK3β)蛋白的表达水平。结果肿瘤体积检测显示:与替莫唑胺组相比,联合用药组、Wnt信号通路抑制剂组造模后第20、25、30、35天的肿瘤体积均明显减小,差异均有统计学意义(P<0.05)。与联合用药组相比,Wnt信号通路抑制剂组造模后第20、25、30、35天的肿瘤体积均明显减小,Wnt信号通路激动剂组造模后第20、25、30、35天的肿瘤体积均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。TUNEL染色显示:与替莫唑胺组相比,联合用药组、Wnt信号通路抑制剂组的肿瘤细胞凋亡率均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与联合用药组相比,Wnt信号通路抑制剂组的肿瘤细胞凋亡率明显升高,Wnt信号通路激动剂组的肿瘤细胞凋亡率明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光染色显示:与联合用药组相比,Wnt信号通路抑制剂组中MGMT、β-连环蛋白的免疫荧光强度明显降低,Wnt信号通路激动剂组中MGMT、β-连环蛋白的免疫荧光强度明显增强。Western blotting检测显示:与联合用药组相比,Wnt信号通路抑制剂组中Wnt2、β-连环蛋白和MGMT的蛋白表达均明显降低,GSK-3β的蛋白表达明显升高;Wnt信号通路激动剂组中Wnt2、β-连环蛋白和MGMT的蛋白表达均明显升高,GSK-3β的蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论白藜芦醇通过降低Wnt2、β-连环蛋白的表达抑制Wnt信号通路,导致MGMT表达下降,从而增强替莫唑胺抗脑胶质瘤作用。

儿童烟雾病的临床特征、手术治疗及疗效分析

目的分析儿童烟雾病(MMD)的临床特征、手术治疗及疗效。方法回顾性分析2017年6月至2020年6月河南省人民医院收治的17例3~14岁的MMD患儿。17例患儿共27侧病变,其中26侧行脑-硬膜-肌肉-血管融通术(EDMS),1侧行保守治疗。术后6个月对患儿进行临床随访。采用磁共振血管造影(MRA)或数字减影血管造影(DSA)和核磁共振灌注成像(PWI)或动脉自旋标记(ASL)评估患儿术后远期脑血运重建;采用改良Rankin量表评分(mRS)评估患儿神经功能恢复情况。结果术后6个月MRA或DSA显示,26侧出现颈外动脉系统向脑皮质代偿供血,PWI或ASL显示脑灌注缺血情况明显改善;24侧(92.3%)术后患儿神经功能缺损症状得到改善,2侧(7.7%)术后患儿症状稳定,未再出现新发的神经功能缺损症状。3侧术后患儿出现一过性癫痫发作,1侧术后出现头皮局部坏死,无脑梗死和脑出血等严重并发症出现。术后6个月17例患儿的mRS评分为(0.2±0.4)分。结论儿童MMD临床特征和影像学表现与成人MMD存在差异,采用EDMS治疗儿童MMD较安全,可以明显改善脑灌注情况,短期随访效果较好。