河南省10所三级医院胸外科护士肺癌围手术期肺康复的知信行现状调查

目的调查胸外科护士对肺癌围手术期肺康复的知信行现状,并探索其影响因素,为推动临床肺康复相关培训提供依据。方法本研究为横断面调查研究。采用便利抽样法,于2022年5—8月抽取河南省10所三级医院的513名胸外科护士作为调查对象。采用自行编制的胸外科护士肺癌围手术期肺康复知信行问卷对其进行调查,采用多重线性回归分析护士知信行现状的影响因素。共回收有效问卷485份,有效回收率为94.54%(485/513)。结果485名胸外科护士的肺癌围手术期肺康复知信行总分、知识维度、信念维度及行为维度得分分别为(186.25±33.55)、(76.36±16.44)、(43.27±6.39)、(66.62±15.71)分。多重线性回归分析结果显示,胸外科护士肺癌围手术期肺康复知信行总分的影响因素为职务、是否了解肺康复内容、参加肺康复培训次数、是否为患者实施过肺康复(P<0.05)。结论胸外科护士对肺癌围手术期肺康复信念积极,但知识及行为水平亟待提高。护理管理者应积极开展围手术期肺康复培训,鼓励胸外科护士更新自我知识体系,强化护士肺康复执行能力,进一步推动肺康复相关工作的开展。

食管癌患者外周血中白细胞介素-1β和组织中程序性死亡分子1的表达对预后的影响及临床意义

目的探讨食管癌患者外周血中白细胞介素(IL)-1β和组织中程序性死亡分子1(PD-1)的表达情况及其对患者临床病理特征和预后的影响。方法选取2018年1月至2020年5月于河南科技大学第一附属医院接受手术治疗的食管癌患者127例,根据术后3年患者的存活情况,将患者分为存活组(n=95)和死亡组(n=32)。收集患者临床资料,免疫组织化学检测食管癌组织中PD-1、程序性死亡配体1(PD-L1)的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血中IL-6、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。Cox回归分析影响患者术后3年死亡的危险因素。绘制IL-1β、PD-1不同表达患者的3年Kaplan-Meier生存曲线,log-rank检验比较3组的生存率。结果死亡组年龄≥60岁、淋巴结转移、浸润至肌层、肿瘤直径>3 cm、IL-1β高水平、TNF-α高水平和PD-1阳性表达患者比例均高于生存组,IL-6高水平患者比例低于生存组,组间比较均有统计学差异(P<0.05)。浸润至肌层、肿瘤直径>3 cm、IL-1β高水平和PD-1阳性表达为影响患者术后死亡的独立危险因素。IL-1β正常水平+PD-1阴性组、IL-1β高水平+PD-1阳性组和IL-1β正常水平+PD-1阳性组/IL-1β高水平+PD-1阴性组患者的3年生存率分别为92.4%、13.3%和84.2%,组间比较有统计学差异(χ2=82.318,P<0.01),且IL-1β高水平+PD-1阳性组患者生存率最低。结论PD-1阳性表达和IL-1β高水平为影响食管癌患者死亡的独立危险因素,且PD-1阳性表达+IL-1β高水平患者的生存率低。

胸外科护士对肺切除术后胸腔引流管护理知信行现状的调查研究

目的探讨胸外科护士对肺切除术后胸腔引流管护理的知信行现状及其影响因素,旨在为临床胸外科专科护理人才培养提供依据。方法采用便利抽样法,选取2020年8月13日—11月13日河南省319名护士作为研究对象,采用自行设计的肺切除术后胸腔引流管护理知信行调查表进行调查。共发放问卷319份,回收有效问卷300份,有效回收率为94.04%。结果300名胸外科护士对肺切除术后胸腔引流管护理知信行总分、知识维度、态度维度和行为维度得分分别为(72.09±6.65)、(7.96±2.51)、(26.04±2.24)、(38.09±4.78)分。多重线性回归分析结果显示,胸外科护士对肺切除术后胸腔引流管护理知识的主要影响因素为文化程度、职称及职务(P<0.05);态度的影响因素为工作年限(P<0.05);行为的影响因素为知识、态度、职务及是否参加过胸腔引流培训(P<0.05);知信行总分的影响因素为职称(P<0.05)。结论胸外科护士对肺切除术后胸腔引流管护理态度积极,但知识及行为水平有待提高。护理领导者应根据护士的不同特征开展胸腔引流管护理培训,同时需要鼓励护士主动学习新知识,不断更新自我知识体系,从而改变护理行为,提高胸外科护理质量。

延续性护理干预对肺癌术后患者癌性疲乏与生活质量的影响研究

肺癌是发生于肺部的临床常见恶性肿瘤,也是目前发病率和病死率增长最快的恶性肿瘤之一,肺癌在我国也已经取代肝癌成为第一位的恶性肿瘤死亡原因[1]。手术是早期肺癌常用且有效的治疗方案,但是患者术后往往合并可虚弱乏力、疲劳及沮丧等癌因性疲乏症状,从而对手术疗效及患者的生活质量造成严重影响[2]。传统护理模式下的护理服务仅限于住院期间提供,肺癌术后患者出院后的护理需求无法得到满足。近年来,临床上越来越重视延续性护理的应用,该护理模式可以将护理服务由院内延伸致院外,患者在出院后依然可以得到专业的护理干预,从而提高了患者的治疗依从性,促进了患者的康复[3]。本研究以肺癌术后患者为研究对象,探讨了延续性护理对患者癌性疲乏与生活质量的影响,现报告如下。

精细化营养支持对食管癌患者术后营养状况、恢复情况及生活质量的影响

目的 探讨精细化营养支持对食管癌患者术后营养状况、恢复情况及生活质量的影响。方法 按照随机数字表法将120例食管癌根治术患者分为对照组(n=60)和观察组(n=60),对照组患者给予常规干预,观察组患者在对照组的基础上给予精细化营养支持。比较两组患者的营养指标[白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)、血红蛋白(Hb)]、术后恢复指标、术后并发症发生情况及生活质量。结果 干预后,两组患者的ALB、PA、Hb水平均高于本组干预前,且观察组患者的ALB、PA、Hb水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。观察组患者术后首次肛门排气时间、首次排便时间、肠鸣音恢复时间及首次进食时间均明显短于对照组(P﹤0.01)。观察组患者术后吻合口狭窄和功能性胃排空障碍的发生率均低于对照组(P﹤0.05);两组患者反流性食管炎、严重腹泻和吻合口瘘的发生率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。干预后,两组患者生活质量评定量表(QOLS)中心理功能、身体功能、生理功能和社会功能评分均高于本组干预前,且观察组患者的上述评分均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论 精细化营养支持可改善食管癌患者术后营养状况,缩短术后恢复时间,对减少并发症和提高患者生活质量具有积极意义。

吉非替尼治疗表皮生长因子受体突变型非小细胞肺癌患者的效果及影响因素分析

目的观察吉非替尼治疗表皮生长因子受体(EGFR)突变型非小细胞肺癌(NSCLC)患者的疗效并探讨影响因素。方法选取150例EGFR突变型NSCLC患者的临床资料,所有患者均给予吉非替尼口服治疗,连续治疗6个疗程,评估其临床疗效,并对可能影响EGFR突变型NSCLC患者临床疗效的相关因素进行单因素和多因素分析。结果150例患者中,总缓解患者48例(32.00%)设为缓解组,剩余102例患者设为对照组。缓解组和对照组患者性别、肿瘤分期、病理类型和肿瘤直径比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。Logistic回归分析结果显示,性别、肿瘤分期、病理类型和肿瘤直径均为EGFR突变型NSCLC患者临床疗效的影响因素(P﹤0.05)。治疗期间,150例患者药物不良反应总发生率为28.67%。结论吉非替尼治疗EGFR突变型NSCLC患者有一定的临床疗效,性别、肿瘤分期、病理类型和肿瘤直径均为EGFR突变型NSCLC患者临床疗效的影响因素。

二维码矩阵宣教联合一对一培训主要照顾者对肺癌术后恢复的影响

目的:探讨二维码矩阵宣教联合一对一培训对肺癌术后主要照顾者的影响,以期为今后临床治疗提供指导。方法:对2019年9月至2021年9月某医院收治的132对肺癌患者及主要照顾者进行研究,按照随机数字表法分为观察组与对照组,各66例。所有患者均经手术治疗,对照组和观察组分别给予二维码矩阵宣教培训、二维码矩阵宣教联合一对一培训。对两组患者术后并发症、视觉模拟评分(VAS)、肺功能进行比较,并对两组照顾者各项护理实践情况进行比较。结果:与对照组相比,观察组患者的肺不张/感染和并发症总发生率较低;术后3 d、4 d、5 d的VAS评分较低;与对照组相比,干预前观察组患者的第1秒用力呼气量(FEV1)、用力肺活量(FVC)、最大呼气流量(PEF)、FEV1/FVC水平比较无明显差异(P>0.05);与干预前相比,干预后两组的FEV1、FVC、PEF水平均升高,但与对照组相比,无明显差异(P>0.05);与对照组相比,观察组照顾者的各护理相关知识和操作的实践正确率均较高,差异有统计学有意义(P<0.05)。结论:二维码矩阵宣教联合一对一培训能够改善肺癌术后主要照顾者的疾病相关知识和技能,提高各项操作正确率,缓解患者术后疼痛,减少并发症的发生率,但对肺功能无明显影响。

营养支持联合吞咽功能训练对食管癌根治术患者营养状况及吞咽功能的影响

目的探讨营养支持联合吞咽功能训练对食管癌根治术患者营养状况及吞咽功能的影响。方法选取我院2018年5月至2019年5月收治的行食管癌根治术的84例患者,随机分为两组各42例。对照组给予常规护理联合吞咽功能训练,观察组在对照组基础上给予营养支持。干预1周后,比较两组的营养状况及吞咽功能。结果干预后,两组的PAB、 ALB、 LYM水平均较干预前提高,且观察组显著高于对照组(P <0.05)。干预后,两组的SSA评分均较干预前降低,且观察组显著低于对照组(P<0.05)。结论营养支持联合吞咽功能训练可有效改善食管癌根治术患者的营养状况,提高其吞咽功能。

circDDX17靶向miR-223-3p/RIP3调控非小细胞肺癌细胞增殖及凋亡

目的探讨circDDX17通过靶向miR-223-3p/RIP3分子轴调控非小细胞肺癌细胞增殖及凋亡的分子机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人正常肺上皮细胞株BEAS-2B和非小细胞肺癌H1299、A549、H446细胞中circDDX17、miR-223-3p、受体相互作用蛋白3(RIP3)的表达水平。分别将pcDNA、pcDNA-circDDX17、anti-miR-con、anti-miR-223-3p、pcDNA-circDDX17与miR-con、pcDNA-circDDX17与miR-223-3p mimics转染至H1299细胞。采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,平板克隆实验检测细胞增殖能力,双荧光素酶报告实验验证circDDX17与miR-223-3p、miR-223-3p与RIP3的靶向关系,Western blot法检测CyclinD1、CDK2、Cleaved caspase-3、Bax蛋白的表达水平。结果与BEAS-2B比较,H1299、A549、H446细胞中circDDX17 mRNA表达水平降低,miR-223-3p mRNA表达水平升高,RIP3 mRNA的表达水平降低(均P<0.05)。pcDNA-circDDX17组细胞活力[(69.46±4.68)%]、细胞克隆数[(83.49±7.86)个]、S期细胞比例[(22.52±1.41)%]、CyclinD1、CDK2蛋白表达水平均低于pcDNA组[分别为(97.54±7.72)%、(205.03±13.37)个、(28.69±1.49)%,均P<0.05],pcDNA-circDDX17组细胞G0/G1期细胞比例[(64.45±3.56)%]、细胞凋亡率[(18.36±1.63)%]、Cleaved caspase-3、Bax蛋白表达水平均高于pcDNA组[分别为(51.33±2.76)%和(5.21±0.54)%,均P<0.05];anti-miR-223-3p组细胞活力[(72.64±5.44)%]、细胞克隆数[(78.16±8.23)个]、S期细胞比例[(21.34±1.59)%]、CyclinD1、CDK2蛋白表达水平均低于anti-miR-con组[分别为103.47±6.25、(169.32±14.53)个、(28.43±1.26)%,均P<0.05],anti-miR-223-3p组细胞G0/G1期细胞比例[(62.86±3.28)%]、细胞凋亡率[(14.64±1.67)%]、Cleaved caspase-3、Bax蛋白表达水平均高于anti-miR-con组[分别为(51.33±2.71)%和(4.83±0.39)%,均P<0.05]。circDDX17与miR-223-3p存在结合位点,miR-223-3p与RIP3存在结合位点。pcDNA-circDDX17+miR-223-3p组细胞活力[(135.45±9.28)%]、细胞克隆数[(174.64±10.68)个]、S期细胞比例[(26.39±2.25)%]、CyclinD1、CDK2蛋白表达水平均高于pcDNA-circDDX17+miR-con组[分别为(101.56±6.68)%、(107.65±7.62)个、(21.64±1.72)%,均P<0.05],pcDNA-circDDX17+miR-223-3p组细胞G_(0)/G_(1)期细胞比例[(56.64±2.76)%]、细胞凋亡率[(8.34±0.76)%]、Cleaved caspase-3、Bax蛋白表达水平均低于pcDNA-circDDX17+miR-con组[分别为(64.03±3.48)%和(15.21±1.18)%,均P<0.05]。结论circDDX17可靶向调控miR-223-3p/RIP3分子轴从而抑制非小细胞肺癌细胞增殖及诱导细胞凋亡。

环状RNA C190促进非小细胞肺癌进展的分子机制

目的探讨环状RNA(circRNA)C190对非小细胞肺癌进展的影响及其分子机制。方法人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)、非小细胞肺癌NCI-H358、NCI-H1299、A549和NCI-H1568细胞提取总RNA,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析细胞中circRNA C190的表达水平;选取表达差异最显著的NCI-H1299作为研究对象,采用RNA干扰技术建立对照、circRNA C190敲降和circRNA C190过表达细胞系,分别为对照组、circRNA C190 KD组和circRNA C190 OE组。采用细胞计数实验分析3组细胞的活力;采用流式细胞术分析3组细胞的周期和凋亡水平;体外移植瘤实验分析3组细胞在裸鼠皮下成瘤能力。生物信息学和双荧光素酶报告基因分析circRNA C190的靶基因。组间计量数据比较采用t检验。结果人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)circRNA C190表达水平(0.99±0.10)明显低于非小细胞肺癌NCI-H358、NCI-H1299、A549和NCI-H1568细胞(1.43±0.14、1.90±0.17、1.48±0.10、1.40±0.10),差异有统计学意义(t=6.349、11.440、8.779、7.070,P<0.05)。对照组细胞吸光度值(1.45±0.14)明显高于circRNA C190 KD组细胞(1.04±0.13),差异有统计学意义(t=4.834,P<0.05)。对照组细胞吸光度值(1.45±0.14)明显低于circRNA C190 OE组细胞(1.84±0.09),差异有统计学意义(t=5.257,P<0.05)。对照组细胞肿瘤体积和肿瘤重量[(502.83±63.84)mm^(3)、(4.43±0.49)g]明显高于circRNA C190 KD组细胞[(352.33±44.72)mm^(3)、(1.70±0.34)g],差异有统计学意义(t=4.729、11.300,P<0.05)。对照组细胞吸光度值[(502.83±63.84)mm^(3)、(4.43±0.49)g]明显低于circRNA C190 OE组细胞[(671.50±52.29)mm^(3)、(7.61±0.80)g],差异有统计学意义(t=5.006、8.326,P<0.05)。对照组细胞G_(0)/G_(1)期比例[(44.09±2.79)%]明显低于circRNA C190 KD组细胞[(54.44±2.54)%],差异有统计学意义(t=6.711,P<0.05)。对照组细胞G_(0)/G_(1)期比例[(44.09±2.79)%]明显高于circRNA C190 OE组细胞[(33.32±2.05)%],差异有统计学意义(t=7.611,P<0.05)。对照组细胞凋亡比例[(4.77±0.78)%]明显低于circRNA C190 KD组细胞[(14.36±2.40)%],差异有统计学意义(t=9.333,P<0.05)。对照组细胞吸光度值[(4.77±0.78)%]明显低于circRNA C190 OE组细胞[(1.59±0.93)%],差异有统计学意义(t=6.405,P<0.05)。circRNA C190是miR-200c-3p的海绵。结论circRNA C190在肺癌细胞中表达水平增加,敲降其表达显著抑制细胞增殖和迁移,过表达则促进细胞增殖和迁移,主要通过结合miR-200c-3p发挥生物学作用。

微小RNA-148a-3p与溶质载体家族7成员11在肺癌组织中表达及对肿瘤细胞铁死亡的影响

目的观察微小RNA(miRNA,miR)-148a-3p与溶质载体家族7成员11(SLC7A11)在肺癌组织的表达及其对肿瘤细胞铁死亡的影响。方法选取河南省人民医院胸外科2020年6月至2023年6月收治的肺癌临床样本作为研究对象,癌旁组织作为对照研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质免疫印迹计数分析miR-148a-3p与SLC7A11的表达水平。人非小细胞肺癌细胞H1299分为miRNA对照组和miR-148a-3p组,采用慢病毒感染构建细胞系。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验分析两组细胞的增殖能力;采用体外移植瘤分析两组细胞在裸鼠体内的体积和重量;采用蛋白质免疫印迹分析铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4表达水平;生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-148a-3p靶基因,并分析靶基因表达水平。组间计量数据比较采用t检验。结果癌旁组织中miR-148a-3p表达水平(1.02±0.19)明显高于肺癌组织(0.54±0.19),差异有统计学意义(t=14.790,P<0.05)。癌旁组织中SLC7A11信使RNA(mRNA)表达水平(0.66±0.13)明显低于肺癌组织(1.48±0.17),差异有统计学意义(t=27.180,P<0.05)。miRNA对照组细胞吸光度(A)值(1.98±0.11)明显高于miR-148a-3p组细胞(1.48±0.19),差异有统计学意义(t=5.674,P<0.05)。miRNA对照组细胞克隆形成率[(85.07±4.50)%]明显高于miR-148a-3p组细胞[(53.68±8.89)%],差异有统计学意义(t=7.714,P<0.05)。miRNA对照组细胞肿瘤体积[(888.40±90.22)mm^(3)]明显高于miR-148a-3p组细胞[(609.78±102.92)mm^(3)],差异有统计学意义(t=6.438,P<0.05)。miRNA对照组细胞肿瘤重量[(5.34±0.75)g]明显高于miR-148a-3p组细胞[(2.28±0.71)g],差异有统计学意义(t=9.379,P<0.05)。SLC7A11是miR-148a-3p的靶基因。miRNA对照组细胞SLC7A11(0.78±0.07)明显高于miR-148a-3p组细胞(0.48±0.09),差异有统计学意义(t=7.580,P<0.05)。miRNA对照组细胞谷胱甘肽过氧化物酶4(1.09±0.09)明显高于miR-148a-3p组细胞(0.39±0.09),差异有统计学意义(t=15.480,P<0.05)。结论miR-148a-3p在肺癌组织中表达显著下调,通过SLC7A11调节肺癌细胞铁死亡,进而影响肺癌的生长和发展。

圆柱瘤基因在非小细胞肺癌中的表达及其对增殖和转移特性的影响

目的探讨圆柱瘤基因(CYLD)在非小细胞肺癌中的表达及其对增殖和转移特性的影响。方法选取2021年6月到2023年12月阜外华中心血管病医院、河南省人民医院和郑州大学人民医院收治的93例非小细胞肺癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析组织中CYLD mRNA表达水平;采用对照慢病毒和CYLD过表达慢病毒感染人非小细胞肺癌H1299细胞系,建立对照组和CYLD组,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、EdU和体外移植瘤分析CYLD对细胞增殖的影响;采用划痕实验、Transwell实验和体外移植瘤分析CYLD对非小细胞肺癌的转移的影响。采用蛋白质印迹法(Western blot)分析CYLD对细胞细胞核增殖抗原(Ki-67)、c-MYC、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和活化因子蛋白1(AP1)蛋白表达水平的影响。组间计量数据比较采用t检验。结果癌旁组织CLYD蛋白表达水平(1.02±0.17)明显高于非小细胞肺癌组织(0.49±0.29),差异有统计学意义(t=15.300,P<0.05)。癌旁组织CLYD mRNA表达水平(1.52±0.23)明显高于非小细胞肺癌组织(0.68±0.12),差异有统计学意义(t=30.860,P<0.05)。对照组细胞活力[(86.84±6.05)%]明显高于GLYD组细胞[(57.95±3.79)%],差异有统计学意义(t=9.909,P<0.05)。对照组细胞EdU阳性率[(82.97±5.65)%]明显高于GLYD组细胞[(49.95±9.43)%],差异有统计学意义(t=7.352,P<0.05)。对照组细胞成瘤体积[(919.09±61.86)mm3]明显高于GLYD组细胞[(639.93±51.24)mm3],差异有统计学意义(t=8.512,P<0.05)。对照组细胞划痕愈合率[(83.49±4.20)%]明显高于GLYD组细胞[(46.71±5.15)%],差异有统计学意义(t=13.560,P<0.05)。对照组细胞划痕愈合数[(141.83±11.48)个]明显高于GLYD组细胞[(87.17±7.70)个],差异有统计学意义(t=9.686,P<0.05)。对照组细胞体内转移灶[(11.17±2.79)个]明显高于GLYD组细胞[(5.67±2.07)个],差异有统计学意义(t=3.884,P<0.05)。对照组细胞细胞Ki-67、c-MYC、Cyclin D1、JNK和AP1蛋白表达水平(0.95±0.10、1.20±0.06、0.93±0.06、1.48±0.09、1.31±0.08)明显高于GLYD组细胞(0.63±0.07、0.81±0.10、0.67±0.12、1.04±0.13、0.63±0.07),差异有统计学意义(t=6.612、9.613、4.657、6.724、15.770,P<0.05)。结论CYLD在非小细胞癌组织中呈低表达,过表达CYLD可抑制非小细胞肺癌的增殖和转移能力,主要与JNK1信号通路相关。

半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3抑制剂对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的探讨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）．3抑制剂对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法45只肺缺血再灌注损伤模型大鼠随机分为模型组、低剂量组和高剂量组；同时选取15只大鼠作为假手术组。低剂量组和高剂量组分别经尾静脉注射z-VAD-FMK5mg／kg和15mg／kg，模型组和假手术组给予尾静脉注射等体积的生理盐水。治疗12h后，取肺组织，测定肺组织中氧化应激指标[丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和活性氧水平（ROS）]和炎性因子水平[肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1β和IL-6]；采用Westernblot分析凋亡相关蛋白水平[凋亡诱导因子（AIF）、Caspase．3、B细胞淋巴瘤／白血病-2（bcl-2）和bcl-2相关x蛋白（bax）]；采用原位缺口末端标记法（TUNEL）染色分析肺组织中细胞凋亡水平。结果与对照组比较，模型组、低剂量组和高剂量组MDA和ROS水平明显增加，而SOD水平显著降低（均P=0．000）。与模型组比较，低剂量组和高剂量组MDA和ROS水平明显下降，而SOD水平显著升高（均P=0．000）。与假手术组比较，模型组、低剂量组和高剂量组TNF-α、IL-1β和IL-1β等炎性因子水平显著升高，而与模型组比较，低剂量组和高剂量组上述炎性因子显著下调（均P=0．000）。与假手术组比较，模型组、低剂量组和高剂量组AIF、Caspase-3和bax蛋白水平显增加，而bcl-2水平显著下调；与模型组比较，低剂量组和高剂量组AIF、Caspase-3和bax蛋白水平明显下降，而bcl-2水平显著升高。与假手术组（3．43±0．67）比较，模型组、低剂量组和高剂量组肺组织细胞凋亡水平（25．32±3．21、17．39±2．97和11．33±2．56）显著升高，差异有统计学意义（均P=0．000）。与模型组比较，低剂量组和高剂量组肺组织中细胞凋亡水平显著下降，差异有统计学意义（均P=0．000）。与低剂量组比较，高剂量组大鼠肺组织中细胞凋亡水平下降更为显著，差异有统计学意义（P=0．000）。结论Caspase-3抑制剂z-VAD．FMK可显著降低氧化应激、炎症以及肺细胞凋亡，对肺组织起到保护作用。

长链非编码RNA MIF-AS1调控非小细胞肺癌增值、侵袭和转移的机制研究

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)MIF-AS1/微小RNA(miRNA,miR)-370-3p/丝裂原活化蛋白激酶9(MAP3K9)分子轴调控非小细胞肺癌(NSCLC)增殖、侵袭及迁移的分子机制。方法收集河南省人民医院2017年5月至2019年1月NSCLC患者20例标本,其中男12例,女8例,年龄(52.37±10.34)岁。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)与蛋白质印迹法(Western blot)检测NSCLC患者癌组织及9例细胞株中MIF-AS1、miR-370-3p、MAP3K9的表达水平;分别用si-MIF-AS1、si-NC、si-MIF-AS1+抗-miR-370-3p或si-MIF-AS1+pcDNA-MAP3K9转染A549细胞,采用噻唑蓝(MTT)法、Transwell实验检测转染细胞的增殖、侵袭、迁移能力;Western blot检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、p21、p27、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、MMP-14蛋白的表达;双荧光素酶报告基因验证MIF-AS1对miR-370-3p或miR-370-3p对MAP3K9的靶向调控作用,应用SPSS 21.0统计软件分析。结果MIF-AS1、MAP3K9在NSCLC组织(2.49±0.25、2.24±0.22)及A549(2.54±0.24、2.31±0.23)、H1299(2.11±0.21、2.44±0.24)、PC-9细胞(2.26±0.23、2.16±0.22)中的表达较癌旁组织(1.00±0.09、1.02±0.09)、正常肺上皮细胞BEAS-2B(1.01±0.09、1.00±0.09)明显升高(t=25.078,P<0.05;F=94.367,P<0.05),差异有统计学意义。miR-370-3p在NSCLC组织(0.42±0.04)及A549(0.34±0.03)、H1299(0.53±0.05)、PC-9细胞(0.44±0.04)中的表达较癌旁组织(1.01±0.08)、正常肺上皮细胞BEAS-2B(1.00±0.08)明显降低(t=29.500,P<0.05;F=269.552,P<0.05),差异有统计学意义;转染si-MIF-AS1显著抑制NSCLC细胞增殖(24 h:0.27±0.03,48 h:0.36±0.03,72 h:0.48±0.04)、侵袭[(24.33±3.14)个]及迁移[(32.46±3.34)个]能力(P<0.01),差异有统计学意义,上调p21(0.64±0.06)、p27(0.77±0.07)蛋白的表达(t=17.441,P<0.05;t=17.726,P<0.05),差异有统计学意义,下调Cyclin D1(0.29±0.03)、MMP-2(0.25±0.03)、MMP-9(0.34±0.03)、MMP-14(0.29±0.03)蛋白的表达(t=17.732,P<0.05),差异有统计学意义;双荧光素酶报告基因证实MIF-AS1与miR-370-3p靶向结合,以及miR-370-3p与MAP3K9靶向结合;转染si-MIF-AS1+抗-miR-370-3p或si-MIF-AS1+pcDNA-MAP3K9后可抑制si-MIF-AS1对NSCLC细胞增殖、侵袭及迁移的作用。结论LncRNA MIF-AS1通过调控miR-370-3p/MAP3K9分子轴促进NSCLC细胞增殖、侵袭及迁移。

微小RNA-146-5p靶向钙调磷酸酶调节因子1对非小细胞肺癌增殖和凋亡的影响

目的观察微小RNA(miRNA,miR)-146-5p靶向钙调磷酸酶调节蛋白1(RCAN1)对非小细胞肺癌增殖和凋亡的影响。方法选取2015年6月至2019年6月河南省人民医院收集的89例非小细胞肺癌和癌旁组织样本作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析非小细胞肺癌组织和癌旁组织miR-146-5p表达水平;在非小细胞肺癌A549胞系中采用慢病毒建立对照miRNA和miR-146-5p敲降细胞株(miR-control组和miR-146-5p KD组),采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析两组细胞增殖能力,采用流式细胞术分析两组细胞凋亡水平;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-146-5p靶基因,并分析靶基因对非小细胞肺癌增殖的影响。组间比较采用t检验。结果与癌旁组织miR-146-5p表达水平(1.02±0.19)比较,非小细胞肺癌组织中miR-146-5p表达水平(3.16±0.30)显著上调,差异有统计学意义(t=3.910,P<0.05)。与miR-control组细胞比较,miR-146-5p KD组细胞增殖显著下降,差异有统计学意义(F=3.013,P<0.05)。与miR-control组细胞凋亡率(4.30±0.98)%比较,miR-146-5p KD组细胞凋亡水平(29.65±5.01)%显著增加,差异有统计学意义(t=5.011,P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶基因证实RCAN1是miR-146-5p的靶基因。在miR-control组中,过表达RCAN1蛋白后细胞增殖能力明显低于空载体的细胞,差异有统计学意义(F=3.029,P<0.05),而在miR-146-5p KD组细胞中过表达RCAN1蛋白后细胞增殖能力低于空载体的细胞,差异有统计学意义(F=3.091,P<0.05)。结论miR-146-5p在非小细胞肺癌中呈高表达,导致抑癌基因RCAN1表达显著下调,促进非小细胞肺癌的进展。

微小RNA-1290靶向Beclin 1对食管癌增殖、凋亡和迁移的影响

目的:探讨微小RNA(miRNA,miR)-1290靶向Beclin 1对食管癌增殖、凋亡和迁移的影响及其分子机制。方法:收集2016年12月到2019年6月河南省人民医院收治的98例食管癌组织和癌旁组织,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析miR-1290表达;采用慢病毒感染Eca-109食管癌细胞,建立miR-1290敲降细胞系和对照细胞系,分别为实验组和对照组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,采用流式细胞术检测细胞凋亡能力;采用Transwell分析细胞迁移能力。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-1290的靶基因;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-1290靶蛋白表达水平。组间数据比较采用t检验。结果:与癌旁组织(1.23±0.19)比较,食管癌组织miR-1290表达水平(3.01±0.22)显著增加,差异有统计学意义(t=2.091,P<0.05)。与对照组细胞(1.89±0.17)比较,实验组细胞吸光度值(1.08±0.12)显著下降,差异有统计学意义(t=2.817,P<0.05)。与对照组细胞凋亡率[(5.49±1.25)%]比较,实验组细胞凋亡率[(29.21±3.84)%]显著增加,差异有统计学意义(t=4.219,P<0.05)。与对照组细胞迁移数量[(139.28±18.62)个]比较,实验组细胞迁移数量[(84.59±8.59)个]显著下降,差异有统计学意义(t=3.188,P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因显示Beclin 1是miR-1290的靶基因。与癌旁组织(1.09±0.19)比较,食管癌组织中Beclin 1蛋白表达水平(0.41±0.15)显著下降,差异有统计学意义(t=3.001,P<0.05)。与对照组细胞(0.51±0.11)比较,实验组细胞Beclin 1蛋白表达水平(0.98±0.20)显著增加,差异有统计学意义(t=2.018,P<0.05)。结论:miR-1290通过靶向调控Beclin 1的表达促进食管癌细胞增殖、凋亡和迁移。

微小RNA-92靶向信号转导与转录激活因子3对肺癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的探讨微小RNA(miR)-92靶向信号转导与转录激活因子3(STAT3)对肺癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法选取2021年1月到2022年1月我院收集的77例非小细胞肺癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析分析癌旁组织和肺癌组织miR-92表达水平。采用对照慢病毒和miR-92慢病毒感染非小细胞肺癌A549细胞,建立稳定细胞系,分别命名为对照组和miR-92组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验分析两组细胞增殖能力;采用流式细胞术分析两组细胞凋亡能力;采用Transwell实验分析两组细胞的侵袭能力。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-92靶基因。采用蛋白质印迹法(Western blot)分析细胞和肿瘤组织靶基因的表达水平。组间计量数据比较采用t检验。结果癌旁组织miR-92表达水平(1.22±0.21)明显高于非小细胞肺癌组织miR-92表达水平(0.31±0.10),差异有统计学意义(t=35.041,P<0.05)。对照组细胞吸光值(1.99±0.08)明显高于miR-92组细胞吸光值(1.36±0.09),差异有统计学意义(t=13.28,P<0.05)。对照组细胞克隆形成率[(70.70±8.48)%]明显高于miR-92组细胞克隆形成率[(35.26±5.99)%],差异有统计学意义(t=9.030,P<0.05)。对照组细胞凋亡比例[(2.89±0.86)%]明显低于miR-92组细胞凋亡比例[(20.58±2.79)%],差异有统计学意义(t=16.02,P<0.05)。对照组细胞半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3蛋白表达水平(0.91±0.11)明显低于miR-92组细胞(1.44±0.16),差异有统计学意义(t=7.012,P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(100.86±12.80)个]明显高于miR-92组细胞迁移数量[(55.67±11.79)个],差异有统计学意义(t=6.870,P<0.05)。STAT3是miR-92靶点。对照组细胞STAT3蛋白表达水平(1.14±0.13)明显高于miR-92组细胞(0.36±0.11),差异有统计学意义(t=12.490,P<0.05)。结论miR-92通过STAT3调节着非小细胞肺癌的增殖、凋亡和侵袭等恶性细胞生物学行为。

长链非编码RNA MT1JP靶向微小RNA-18a-5p对非小细胞肺癌恶性细胞生物学的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)MT1JP靶向微小RNA(miR)-18a-5p对非小细胞肺癌恶性细胞生物学的影响。方法选择2018年6月到2021年6月河南省人民医院收治的71例非小细胞肺癌和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肿瘤组织和癌旁组织lncRNA MT1JP和miR-18a-5p表达水平。采用对照慢病毒和lncRNA MT1JP慢病毒感染A549细胞,建立lncRNA组和MT1JP组细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和EdU染色分析两组细胞增殖;采用Transwell分析两组细胞侵袭;采用划痕实验分析两组细胞迁移能力。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析lncRNA MT1JP的靶基因。组间比较采用t检验。结果癌旁组织lncRNA MT1JP表达水平(1.00±0.17)明显高于肺癌组织lncRNA MT1JP表达水平(0.37±0.18),差异有统计学意义(t=21.330,P<0.05)。癌旁组织miR-18a-5p表达水平(1.08±0.18)明显低于肺癌组织lncRNA MT1JP表达水平(2.23±0.20),差异有统计学意义(t=36.040,P<0.05)。lncRNA组细胞活力(1.67±0.09)和细胞EdU染色阳性率[(61.83±4.88)%]明显高于MT1JP组细胞活力(1.10±0.05)和细胞EdU染色阳性率[(33.17±3.31)%],差异有统计学意义(t=12.940、10.760,P<0.05)。miR-NC组细胞活力(1.63±0.06)和EdU染色阳性率[(61.33±4.46)%]明显高于miR-18a-5p沉默组细胞活力(1.14±0.09)和和EdU染色阳性率[(33.00±4.73)%],差异有统计学意义(t=10.760、10.680,P<0.05)。lncRNA组细胞划痕愈合率[(70.22±3.41)%]和侵袭数量[(111.83±10.09)个]明显高于MT1JP组[(35.42±3.82)%]和侵袭数量[(64.17±7.81)个],差异有统计学意义(t=16.620、9.153,P<0.05)。miR-NC组划痕愈合率[(73.72±3.82)%]和侵袭数量[(117.33±7.79)个]明显高于miR-18a-5p沉默组[(43.40±4.70)%]和侵袭数量[(56.67±10.29)个],差异有统计学意义(t=10.540、11.520,P<0.05)。结论lncRNA MT1JP在非小细胞肺癌中低表达,通过靶向miR-18a-5p,进而参与非小细胞肺癌的增殖、迁移和侵袭等过程。

靶向葡萄糖-6-磷酸脱氢酶对食管癌细胞细胞化疗耐药的影响及其机制

目的探讨葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)在食管癌细胞中表达水平及其对细胞化疗耐药的影响和分子机制。方法选取2021年1月至2022年3月河南省人民医院收集的65例食管癌标本和对应癌旁组织作为研究对象,采用蛋白质印迹法(Western blot)分析食管癌和癌旁组织G6PD表达水平;在人食管癌细胞株EC109细胞采用浓度梯度递增法建立紫杉醇耐药细胞株EC109/DOX,分别采用对照短发卡RNA(shRNA)和G6PD shRNA慢病毒感染EC109/DOX细胞系,建立对照组和G6PD KD组;采用G6PD抑制剂处理24 h后。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析不同处理的细胞增殖能力;采用流式细胞术分析不同处理细胞的耐药能力。采用Western blot分析不同处理对谷胱甘肽S-转移酶P1(GSTP1)表达水平的影响。组间比较采用t检验。结果癌旁组织中G6PD表达水平(0.97±0.16)明显低于食管癌组织中G6PD蛋白表达水平(2.34±0.28),差异有统计学意义(t=32.670,P<0.05)。紫杉醇耐药组患者G6PD蛋白表达水平(2.14±0.16)明显高于紫杉醇化疗敏感组患者G6PD蛋白表达水平(2.56±0.22),差异有统计学意义(t=8.280,P<0.05)。EC109细胞G6PD蛋白表达水平(0.95±0.07)明显低于EC109/DOX细胞G6PD蛋白表达水平(2.21±0.23),差异有统计学意义(t=11.870,P<0.05)。对照组细胞紫杉醇处理24 h和48 h后吸光度值(1.25±0.03、1.98±0.08)明显高于G6PD KD组细胞24 h和48 h吸光度值(0.87±0.02、1.42±0.07),差异有统计学意义(t=21.631、12.571,P<0.05)。对照组细胞紫杉醇处理48 h后凋亡比例[(12.94±1.78)%]明显低于G6PD KD组细胞凋亡比例[(34.56±4.03)%],差异有统计学意义(t=10.961,P<0.05)。紫杉醇处理的EC109/DOX细胞凋亡水平[(12.83±2.25)%]明显低于6-AN和紫杉醇共处理的EC109/DOX细胞凋亡水平[(43.36±4.53)%],差异有统计学意义(t=13.500,P<0.05)。紫杉醇处理对照组和G6PD KD组细胞48 h后,对照组细胞GSTP1蛋白表达水平(12.94±1.78)明显高于G6PD KD组细胞(34.56±4.03),差异有统计学意义(t=6.490,P<0.05)。紫杉醇处理的EC109/DOX细胞GSTP1蛋白表达水平(1.97±0.05)明显高于6-AN和紫杉醇共处理的EC109/DOX细胞GSTP1蛋白表达水平(1.17±0.14),差异有统计学意义(t=12.260,P<0.05)。结论葡萄糖-6-磷酸脱氢酶通过调节GSTP1蛋白表达水平,进而调控着食管癌细胞对紫杉醇耐药性。

Linc00152/微小RNA-150/β-连环蛋白轴对非小细胞肺癌增殖、迁移和上皮-间充质转化的影响

目的探讨Linc00152/微小RNA(miR)-150/β-连环蛋白(β-catenin)轴对非小细胞肺癌增殖、迁移和上皮-间充质转化的影响。方法人非小细胞肺癌细胞A549随机分为Linc00152 KD组和长链非编码RNA(lncRNA)对照组,分别采用Linc00152短发卡RNA(shRNA)和lncRNA对照慢病毒感染,建立Linc00152敲降细胞系。采用噻唑蓝(MTT)、克隆形成实验、划痕实验和蛋白质印迹法(Western blot)分析Linc00152对细胞增殖、迁移和上皮-间充质转化的影响。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析Linc00152和miR-150关系及其靶基因。采用Western blot分析靶基因蛋白表达水平。计量数据比较采用t检验。结果 lncRNA对照组细胞Linc00152表达水平(1.24±0.22)明显高于Linc00152 KD组Linc00152表达水平(0.42±0.12),差异有统计学意义(t=4,819,P<0.05)。lncRNA对照组细胞吸光值(2.11±0.18)明显高于Linc00152 KD组(1.75±0.12),差异有统计学意义(t=4,819,P<0.05)。lncRNA对照组细胞迁移数量[(152.65±10.43)个]明显高于Linc00152 KD组[(97.47±9.43)个],差异有统计学意义(t=5.081,P<0.05)。lncRNA对照组细胞上皮标志蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平(1.23±0.11)明显低于Linc00152 KD组细胞(2.54±0.33),差异有统计学意义(t=4.909,P<0.05)。lncRNA对照组细胞间质标志蛋白波形蛋白(Vimentin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达水平(1.02±0.09、1.03±0.11)明显高于Linc00152 KD组细胞(0.26±0.07、0.34±0.09),差异有统计学意义(t=4.127、3.298,P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因显示Linc00152的靶miRNA是miR-150,而miR-150的靶基因是β-catenin。lncRNA对照组细胞miR-150表达水平(1.08±0.15)明显低于Linc00152 KD组miR-150表达水平(2.87±0.18),差异有统计学意义(t=3.179,P<0.05)。lncRNA对照组细胞β-catenin蛋白表达水平(1.24±0.22)明显高于Linc00152 KD组β-catenin蛋白表达水平(0.42±0.12),差异有统计学意义(t=4.819,P<0.05)。结论 Linc00152在非小细胞肺癌中表达上调,下调Linc00152可显著抑制非小细胞肺癌的增殖、迁移和上皮-间充质转化,其作用机制可能是Linc00152通过吸附miR-150促进β-catenin表达。