舒洛地特对糖尿病肾病患者足细胞损伤的影响

目的探讨舒洛地特对糖尿病肾病(DN)患者足细胞损伤的影响。方法选择2018年3月至2020年2月阜外华中心血管病医院收治的136例DN患者为研究对象,按照随机数字表法将患者分为观察组和对照组,每组68例。2组患者均给予皮下注射胰岛素或口服降糖药降低血糖、血管紧张素转换酶抑制剂和血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂降血压、他汀类药物降血脂等常规治疗措施,观察组患者在常规治疗基础上给予舒洛地特治疗,2组患者均连续治疗4个月。对2组患者治疗前后24 h尿蛋白定量及血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)和尿沉渣中podocin、mindin及nephrin蛋白水平进行比较,并观察治疗期间2组患者的不良反应。结果2组患者治疗前24 h尿蛋白定量及Scr、BUN水平比较差异无统计学意义(P>0.05),2组患者治疗后24 h尿蛋白定量及Scr、BUN水平显著低于治疗前(P<0.05);治疗后,观察组患者24 h尿蛋白定量及Scr、BUN水平显著低于对照组(P<0.05)。治疗前2组患者尿沉渣中podocin、mindin、nephrin蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05),2组患者治疗后尿沉渣中podocin、mindin、nephrin蛋白水平显著低于治疗前(P<0.05);治疗后,观察组患者尿沉渣中podocin、mindin、nephrin蛋白水平显著低于对照组(P<0.05)。2组患者治疗前血清ANGPTL4水平比较差异无统计学意义(P>0.05),2组患者治疗后血清ANGPTL4水平显著高于治疗前(P<0.05);治疗后,观察组患者血清ANGPTL4水平显著高于对照组(P<0.05)。治疗期间,对照组和观察组患者不良反应发生率分别为8.82%(6/68)、11.76%(8/68),2组患者治疗期间不良反应发生率比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.319,P>0.05)。结论舒洛地特可有效减轻DN患者肾小球足细胞损伤,改善肾功能。

miR-133b通过下调转胶蛋白抑制食管鳞癌细胞的增殖和侵袭能力

目的观察miR-133b在食管鳞癌中的表达,并探讨其对食管鳞癌细胞增殖和侵袭能力的影响及分子机制。方法采用实时荧光定量PCR方法检测63例食管鳞癌组织及对应的癌旁组织、食管鳞癌细胞(Eca109、EC9706、EC1、TE1、KYSE70)和正常食管上皮细胞Het-1A中miR-133b的表达。将miR-133b类似物、miR-133b抑制剂及阴性对照转染TE1细胞,分别采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法和Transwell小室实验检测miR-133b对TE1细胞增殖和侵袭能力的影响。采用TargetScan和miRDB在线软件预测miR-133b的靶基因,并利用双荧光素酶报告载体证实其潜在的靶基因。采用Western blot方法检测miR-133b过表达对转胶蛋白2(TAGLN2)及上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白上皮型钙黏附素(E-cadherin)、神经型钙黏附素(N-cadherin)、Snail、Slug和波形蛋白(Vimentin)表达的影响。结果63例食管鳞癌组织miR-133b的相对表达水平为0.295±0.040,显著低于正常癌旁组织(1.002±0.011,P<0.001)。miR-133b mRNA的表达与食管鳞癌分期、淋巴结转移和预后均有关。食管鳞癌细胞Eca109、EC9706、EC1、TE1和KYSE70中miR-133b的相对表达水平分别为0.679±0.031、0.391±0.008、0.236±0.016、0.031±0.005和0.099±0.020,均显著低于正常食管上皮细胞Het-1A(1.005±0.016,均P<0.001)。miR-133b类似物转染能上调TE1细胞中的miR-133b水平达6.199±0.627,并抑制TE1细胞的增殖和侵袭能力,而miR-133b抑制剂转染能下调TE1细胞中的miR-133b水平至0.182±0.023,并增强TE1细胞的增殖和侵袭能力。最为显著的是,TAGLN-3′UTR-WT转染的细胞中,miR-133b类似物转染组的相对荧光素酶的活性(0.320±0.018)显著低于阴性对照组(1.010±0.036,P<0.001);而TAGLN-3′UTR-MUT转染的细胞中,miR-133b类似物转染组和阴性对照组的相对荧光素酶活性分别为1.019±0.056和1.008±0.021,差异无统计学意义(P>0.05)。miR-133b上调能显著抑制食管鳞癌TE1细胞中TAGLN2蛋白的表达,并且上调E-cadherin的表达,下调N-cadherin、Snail、Slug和Vimentin的表达。结论miR-133b可能通过调控TAGLN2的表达在食管鳞癌细胞的增殖和侵袭中发挥作用,可能成为食管鳞癌潜在的分子治疗靶点。

微RNA-147b抑制食管鳞状细胞癌细胞增殖和侵袭的机制

目的探讨微RNA（microRNA，miR）-147b在食管鳞状细胞癌（以下简称＂鳞癌＂）中的表达及其在细胞增殖、细胞周期和侵袭中的分子机制。方法采用实时荧光定量PCR（qPCR）检测食管鳞癌组织和细胞中miR-147b的表达。将阴性对照（NC）和miR-147b抑制剂转染食管鳞癌EC1和EC9706细胞。试验分为两组：NC组和miR-147b抑制剂组，采用qPCR检测上述细胞中miR-147b的表达，采用CCK-8、流式细胞术和Transwell小室检测分别检测miR-147b表达下调对食管鳞癌细胞增殖、细胞周期和侵袭的影响。利用双荧光素酶报告载体分析其直接作用的靶基因。采用qPCR和Western印迹检测miR-147b表达下调对靶基因NDUFA4表达的影响，进一步利用qPCR检测NDUFA4在食管鳞癌组织中的表达，并分析其表达与miR-147b表达的相关性。结果食管鳞癌组织（3.03±0.27）和细胞中miR-147b的相对表达水平均显著高于癌旁组织（1.00±0.01）和正常食管上皮细胞，差异均有统计学意义（均P〈0.01），并且miR-147b高表达与食管鳞癌患者的临床分期、浸润深度、组织学分级及淋巴结转移均密切相关（均P〈0.05），临床分期、淋巴结转移和miR-147b是食管鳞癌患者的独立预后因素。miR-147b表达下调能显著抑制食管鳞癌细胞的增殖、静止细胞周期在G0/G1期和降低其侵袭能力。NDUFA4是miR-147b直接作用的靶基因，miR-147b抑制剂显著增加食管鳞癌EC1和EC9706细胞中NDUFA4的表达。NDUFA4在食管鳞癌组织中表达显著下调，其与miR-147b的表达负相关（r＝-0.765，P〈0.001）。结论miR-147b表达的下调显著抑制食管鳞癌的增殖和侵袭能力，且可以改变其细胞周期分布。

腺苷负荷心肌超声造影检测2型糖尿病患者心肌血流灌注异常

目的探讨腺苷负荷心肌超声造影检测2型糖尿病患者心肌血流灌注异常的临床应用价值。方法选取2019年5月至2020年1月阜外华中心血管病医院内分泌科临床诊断为2型糖尿病患者26例作为糖尿病组,同期性别、年龄相匹配的健康体检者28例为对照组,进行常规超声心动图、静息及腺苷负荷左心室心肌超声造影检查,脱机分析得出心肌灌注时间-强度曲线的平台期信号强度(A值)、曲线上升斜率(K值)及A×K值。结合年龄、性别、病程、体质指数、糖化血红蛋白水平等一般资料,对两组结果进行统计学分析。结果静息状态下,不论整体还是分节段,糖尿病组A值与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05),而糖尿病组心肌灌注参数K值及A×K值明显低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);负荷状态下,不论整体还是分节段,糖尿病组心肌灌注参数的A值、K值及A×K值均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);负荷状态心肌灌注异常的检出率明显高于静息状态,差异有统计学意义(P<0.05);糖尿病组的心肌血流量储备与其病程及糖化血红蛋白水平呈负相关(r=-0.580,P=0.020;r=-0.481,P=0.013)。结论腺苷负荷心肌超声造影可以检测2型糖尿病患者左室心肌血流灌注异常,具有重要的临床应用价值。