铁皮石斛人工种子制备关键技术研究

以铁皮石斛原球茎为繁殖体,初步建立适合铁皮石斛的人工种子制备工艺,为铁皮石斛的高效繁育提供一条新技术途径。结果表明,经过优化组合,以MS+100g/L土豆汁+0.5mg/L NAA+30g/L海藻酸钠+30g/L蔗糖+1.0g/L保水剂+1.0g/L木薯淀粉+0.1g/L活性炭(AC)为人工胚乳,在2%CaC12中反应15min后获得的铁皮石斛人工种子呈规则的圆球形、富有弹性,培养15d后失水率为11.17%,培养60d后萌发率达到92.86%。此配方为制备铁皮石斛人工种子的最优组合。

植物激素对三七愈伤组织增殖的影响

通过优化激素组合提高三七愈伤组织继代培养的增殖效率.挑选质地均一、生长良好的三七愈伤组织,分别在2,4-D、6-BA和KT三种激素的不同组合培养基上培养,然后测定愈伤组织的质量变化.单因素试验结果表明,培养基中2,4-D为1.0mg/L时愈伤组织增殖速率最大,达到353.74%;2,4-D浓度为1.0mg/L,6-BA浓度为0.5mg/L时,愈伤组织增殖速率达到403.46%;2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L时,随着KT浓度的增大,虽然愈伤组织的质量继续增加,但是出现不同程度的褐化,且随着KT浓度的增大而更加严重.根据正交试验得出激素最优组合为2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.2mg/L+KT 0.3mg/L,三七愈伤组织生长良好,增殖速率达到490%.

响应面法优化羊肚菌深层发酵条件

研究了羊肚菌深层发酵培养基中玉米粉和黄豆粉配比和发酵条件,确定了羊肚菌深层发酵最佳配比的培养基以及最佳的发酵温度、起始pH和摇床转速.通过单因素确定培养基中玉米粉和黄豆粉的最佳配比,在单因素试验的基础上采用三因素三水平的响应面分析法确定羊肚菌液体发酵的培养条件.结果以羊肚菌菌丝体生物量和胞外多糖浓度为响应面和等高线,在分析各个因素的显著性和交互作用后,得出羊肚菌液体发酵的最佳温度25.33℃、起始pH 6.13、摇床转速154.33r/min.在最佳发酵条件下,发酵144h,羊肚菌的菌丝体生物量和胞外多糖浓度达到最高,分别为7.78g/L和130.97mg/L.

HPLC法测定罗氟司特有关物质

目的 建立HPLC法对罗氟司特进行质量分析.方法 高效液相色谱法,Welch Ultimate XB-C18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,流动相0.01 mol/L磷酸氢二钾溶液∶乙腈=50∶50,流速为1.0 mL/min,检测波长为215 nm.结果 罗氟司特与有关物质及各中间体分离较好;罗氟司特含量浓度的线性范围为0.121～12.09 μg/mL （r=0.999 9）;三批样品中总杂含量分别为0.16％、0.16％、0.16％.结论 该方法操作简便、快捷、结果准确、可靠,可用于罗氟司特的质量控制.

三七种子无菌育苗技术的研究

目的研究获得生长整齐、健壮的三七幼苗的途径。方法将消毒后的三七种子置于培养基上进行无菌培养,对影响种子萌发和幼苗生长的因素进行优化。结果 20℃条件下培养60 d后,MS、1/2MS、B5、N6四种培养基中,MS培养基种子萌发率最高,达到80%,而N6培养基上种子萌发率最低;在种子培养过程中,暗培养条件下的种子萌发速度和萌发率均高于光照培养条件;去除果皮的种子出芽率最高,并且染菌率低。当将种子用赤霉素溶液处理,明显提高萌发率,20℃条件下培养45 d后,300 mg/L赤霉素溶液处理的种子出芽率接近90%。结论去掉三七种子的果皮,用浓度为300 mg/L的赤霉素浸泡后置于MS培养基中,在黑暗条件培养萌发效果最好。