mRNA疫苗在动物传染病中的研究进展及应用

与传统疫苗相比,mRNA疫苗具有安全性高、有效性好、研发周期短等特点,使其在传染病的预防和控制方面具有得天独厚的优势。目前,mRNA疫苗在新型冠状病毒(COVID-19)肺炎、流感、埃博拉病毒病、寨卡病毒病等人类疾病的防控中取得了巨大进展,但动物用mRNA疫苗研究尚不深入。因此,开发动物用mRNA疫苗来预防和控制家畜、家禽、野生动物等的传染性疾病,成为动物疫病和公共卫生领域的重要研究方向之一。全面探讨了动物传染病mRNA疫苗的设计、制备、递送系统、应用、优势、挑战以及前景,为研制和开发动物传染病mRNA疫苗提供参考。

猪繁殖与呼吸综合征病毒的免疫保护机制及疫苗研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的高变异性、免疫逃逸以及异源毒株间的交叉保护效果差,致使现有疫苗保护效力的持久性和有效性受限。本文归纳了PRRSV国内外流行毒株的进化和抗原变异以及毒株中和表位的免疫保护机制研究现状,系统分析了传统疫苗、反向遗传学构建的嵌合疫苗、基因工程疫苗、干扰素诱导激活疫苗以及纳米疫苗等的研究进展,提出了通过不断改良佐剂、改进接种方式等途径开发新型PRRSV疫苗,有望加快终结PRRS的全球流行,为研发安全高效的新型PRRSV疫苗提供了参考。

减毒鼠伤寒沙门菌Ⅲ型分泌系统介导Apoptin对肿瘤细胞糖酵解的影响

为进一步探讨重组减毒鼠伤寒沙门菌Ⅲ型分泌系统介导Apoptin对肿瘤细胞糖酵解的影响,将重组减毒鼠伤寒沙门菌∆crp∆asdSL1344(pYA3493-SopE-Apoptin)和互补菌株∆crp∆asdSL1344(pYA3493-SopE)分别于体外感染黑色素瘤B16F10细胞,于感染后12 h和24 h收集细胞,检测细胞内丙酮酸、乳酸含量以及丙酮酸激酶、己糖激酶的活性。结果显示,重组菌感染组能极显著下调丙酮酸含量(P<0.01);在感染24 h后,重组菌组乳酸含量极显著低于互补菌组和细胞对照组(P<0.01)。丙酮酸激酶和己糖激酶活性检测结果显示,重组菌组丙酮酸激酶活性和己糖激酶活性均显著低于互补菌组和细胞对照组(P<0.05)。以上结果表明,减毒鼠伤寒沙门菌Ⅲ型分泌系统介导Apoptin能抑制肿瘤细胞糖酵解的能力,通过下调丙酮酸和乳酸含量,降低丙酮酸激酶和己糖激酶活性,导致肿瘤细胞发生明显的代谢变化。

油酸钠诱导绵羊原代肝细胞脂肪变性模型的建立

脂肪肝综合征是绵羊的高发病,为了建立绵羊原代肝细胞脂肪变性模型用于研究该病的发病机制,本试验采用改良的两步灌流法分离获取羊原代肝细胞,培养24 h后给予不同浓度油酸钠诱导12 h,采用CCK-8法检测肝细胞活力,酶联免疫吸附法(ELISA)检测谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)含量,油红O染色观察细胞脂滴聚集情况,确定诱导浓度;随后用该浓度油酸钠诱导羊原代肝细胞,确定诱导时间;确定模型构建条件后,采用荧光定量PCR检测模型肝细胞中Toll样受体4(TLR4)、核因子激活的B细胞的κ-轻链增强子(NF-κB)、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶2(HMGCS2)、乙酰辅酶A(ACACA)、线粒体三功能蛋白(MTP)共5种脂代谢基因的转录水平。结果显示,与未诱导的空白对照组相比,当油酸钠浓度为0.50 mmol/L时,肝细胞活性显著降低(P<0.05),ALT、AST含量均显著升高(P<0.05),肝细胞内出现明显脂肪沉积,且随着油酸钠诱导浓度的升高而增加。用0.50 mmol/L油酸钠诱导时间越长,肝细胞活性越低,ALT、AST含量越高,诱导12 h时油红O染色可见肝细胞出现大量脂肪沉积。因此确定诱导条件为0.50 mmol/L油酸钠诱导12 h。与空白对照组相比,模型组肝细胞中TLR4、NF-κB、MTP和ACACA基因的表达水平显著增高(P<0.05),HMGCS2基因的表达水平显著降低(P<0.05)。结果表明,在绵羊原代肝细胞培养基中添加0.50 mmol/L油酸钠诱导12 h可建立羊原代肝细胞脂肪变性模型。

聚乙烯亚胺纳米基因递送系统的研究进展

基因治疗在恶性肿瘤、感染性疾病、自身免疫性疾病、罕见病等重大难治性疾病的治疗中表现出巨大潜力。基因递送载体是基因治疗能否成功实施的关键所在,聚乙烯亚胺(PEI)是一种被广泛研究的阳离子基因递送载体,在不同细胞系和转染条件下均展现出稳定高效的基因转染效果,其中PEI25k更被视作基因转染的“黄金标准”。为解决PEI在基因递送中存在的体内转染效率低、细胞毒性大、靶向性低和负载基因溶酶体降解等问题,该文对基于PEI设计构建新型纳米递送系统用于基因治疗的研究进展进行综述,主要包括高相对分子质量线性PEI、多糖、亲水性的聚合物和右旋糖酐修饰的PEI,交联的低相对分子质量PEI,基于PEI的无机纳米递送载体以及基于PEI的药物与基因共递送载体系统,以期为进一步构建高效低毒的基因递送系统提供理论指导。

表达猫瘟病毒VP2蛋白重组减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-VP2)构建及特性研究

为构建稳定表达猫瘟病毒(FPV)免疫原性蛋白VP2减毒鼠伤寒沙门菌重组菌株,以洛阳分离株基因组为模板扩增VP2基因,并克隆至原核表达载体pYA3493,然后电转化至减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd,构建重组菌株SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-VP2),并对其表型及生长特性、遗传稳定性、生物被膜、运动性以及毒力等进行分析。结果显示,携带FPVVP2基因重组减毒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-VP2)重组菌构建成功并表达出外源蛋白;SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-VP2)的生化、生长特性与空载体互补菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493)相似,较亲本菌株SL1344失去了利用麦芽糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇等碳源能力,生长速度、运动性、生物膜形成能力相较亲本株SL1344均发生了显著降低,但小鼠LD50较亲本株提高126倍。结果表明,成功构建了稳定携带FPV VP2蛋白新型减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-VP2),该重组菌能够有效递呈所携带外源基因并稳定表达,为进一步预防FPV感染和新型疫苗研发提供理论依据。

一例猫创伤性疝合并股骨远端生长板骨折的诊断和治疗

猫的创伤性膈疝是指隔肌因外伤而受损或破裂,导致腹腔内的器官进入胸腔的情况。这种情况可能是由于车祸、跌落、或其他外力导致的胸部或腹部严重撞击造成的。创伤性膈疝可能导致严重的健康问题,如胃肠道受压迫、呼吸困难、休克等。症状可能包括呼吸急促、呕吐、腹痛、脱水以及体内器官功能障碍等。如果发生了创伤性隔疝,需要紧急就医。治疗通常需要进行紧急手术以修复受损的隔肌并将腹腔内的器官放回到原位。手术后,动物通常需要在恢复期间接受特殊的护理和监测,以确保身体能够康复并避免并发症的发生。