家兔大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混合感染的诊断及药物敏感性分析

2021年3—4月份,河南省某兔场家兔连续出现精神不振、食欲减退及腹泻症状,发生腹泻2~3 d后死亡。为了确定引起该兔场家兔感染的病原菌及筛选有效的治疗药物,无菌采集病死兔的肝脏、肺脏及肠道等具有典型病变的组织样品进行细菌的分离培养、革兰氏染色、生化试验、PCR鉴定及小鼠致病性试验,并对分离到的菌株进行药敏试验。结果表明:通过对病死兔器官组织分离培养及生化鉴定,得到一株革兰氏阴性短杆菌和一株革兰氏阳性球菌,初步判定分离菌为大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,分别命名为HN-X01和LY-X01。HN-X01株eaeA基因和LY-X01株16S rDNA基因PCR扩增分别得到833 bp和480 bp大小的目的条带,与预期结果相符。测序结果经比对分析显示,分离菌株HN-X01与大肠杆菌参考株的核苷酸相似性为96.20%~97.07%,分离菌株LY-X01与金黄色葡萄球菌参考株的核苷酸相似性为99.53%~99.91%。小鼠注射分离菌株HN-X01后在48 h内全部死亡,注射LY-X01后在72 h内死亡率为75%,表明分离菌株HN-X01、LY-X01均具有一定毒力。两种分离菌株对头孢哌酮均表现敏感,对环丙沙星、哌拉西林均表现中介,对青霉素、红霉素、卡那霉素等均表现耐药。说明此次兔场暴发的疾病由大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混合感染引起,且这两种分离菌株对多种抗生素具有耐药性。