几种天然植物提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用

选择合适的溶剂体系,用维生素C(Vc)作为阳性对照物,采用分光光度法测定了不同浓度的茶多酚、丹皮酚及金银花叶子总黄酮提取物(乙酸乙酯相)对酪氨酸酶活性的抑制作用.结果表明:采用1%丙三醇和1%吐温-80(体积比1∶1)混合液作溶剂可显著增加丹皮酚和金银花叶子总黄酮提取物在水中的溶解度;茶多酚、丹皮酚、金银花叶子总黄酮提取物对酪氨酸酶的活性都有一定的抑制作用,其抑制作用从强到弱依次为Vc、Vc∶丹皮酚=1∶2(质量比)、Vc∶丹皮酚=1∶1(质量比)、茶多酚、茶多酚∶丹皮酚=2∶1(质量比)、丹皮酚、金银花叶子总黄酮提取物.

几种天然黄酮类化合物对二苯代苦味肼自由基的清除作用

采用循环伏安法、示差脉冲伏安法对四种天然黄酮类化合物清除二苯代苦味肼自由基(DPPH)的能力进行了探讨.研究表明:此法可直接观测样品对DPPH的清除作用,而且灵敏度高、准确可靠,是一种检测自由基及物质对其清除作用的有效方法.

蛋白A与联硫基二(琥珀酰亚胺丙酸盐)修饰电化学免疫传感器测定雌二醇(英文)

将抗体结合蛋白A和交联剂联硫基二(琥珀酰亚胺丙酸盐)(DTSP)组成的骨架修饰到电极表面,再将单克隆雌二醇抗体与骨架中的蛋白A相结合,制备出电化学免疫传感器.利用样品雌二醇与辣根过氧化酶所标记的雌二醇同传感器表面抗体的竞争性结合,将该传感器用于测定溶液中样品雌二醇的浓度;利用方波伏安法监测电化学还原辣根过氧化酶催化产生的苯醌分子的电流,以还原电流为纵坐标,以雌二醇浓度为横坐标绘制标准曲线.结果表明,雌二醇浓度在50～1 500ng.L-1范围内与方波伏安还原电流呈良好的线性关系,灵敏度为0.51μA.ng-1.L,检测限为50ng.L-1.所制备的免疫传感器良好的分析性能得益于蛋白A和DTSP所组成的骨架,该骨架能够增加免疫分子组分在电极表面的修饰量,并能够控制抗体在电极上的结合方位,使其抗原结合位点朝向电极外端,减少结合空间阻碍.

萘酰亚胺-多胺缀合物NNINspm通过PI_3 K/Akt信号通路诱导肝癌细胞凋亡

目的探讨新型萘酰亚胺-多胺缀合物NNINspm对多胺转运体的识别及诱导肝癌HepG2细胞凋亡的机制。方法以MTT法检测细胞毒性;流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率及线粒体膜电位的变化;高内涵活细胞成像系统检测NNINspm对多胺转运体识别及Akt易位的影响;Western blot检测NNINspm对cytochrome C、14-3-3、Bad、Bcl-xL、mTOR、p70S6K、Cdk4、p27kip1、Akt、Caspase-3、Caspase-9等蛋白表达的影响。结果NNINspm具有良好的多胺转运体识别能力及肿瘤细胞靶向性,其通过抑制Akt磷酸化从而引起一系列的信号分子发生改变,如14-3-3蛋白与Bad解离并与Bcl-xL结合,随后引起cytochromeC释放及caspase-9及caspase-3活化并最终诱导细胞凋亡;此外,NNINspm诱导mTOR和p70S6K脱磷酸化,Cdk4下调及p27kip1上调并最终诱导细胞周期阻滞于G0/G1期。结论NNINspm通过PI3K/Akt信号途径诱导肝癌HepG2细胞凋亡。

怀山药化学成分研究

目的：研究怀山药Dioscoreaopposite的化学成分。方法：采用硅胶柱色谱分离纯化，薄层色谱及波谱进行化合物结构鉴定。结果：从乙醇提取物中分离并鉴定了12个化合物，分别为棕榈酸（1），β-谷甾醇（2），油酸（3），β-谷甾醇醋酸酯（4），5-羟甲基-糠醛（5），壬二酸（6），β-胡萝卜苷（7），环（苯丙氨酸-酪氨酸）（8），环（酪氨酸-酪氨酸）（9），柠檬酸单甲酯（10），柠檬酸双甲酯（11），柠檬酸三甲酯（12）。结论：化合物3—12为首次从山药中分离得到，其中化合物8，9为首次从薯蓣科植物中分离得到的环二肽类型化合物，化合物9为新天然产物。

中药材重金属污染现状的统计分析

目的:分析中药材重金属含量及污染现状。方法:以相关文献中提供的铜、铅、砷、镉、汞的含量数据为基础,用SPSS 13.0软件进行统计分析;并以《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》为标准,判断各种重金属元素含量超标情况。结果:中药材中存在不同程度的重金属污染。铜、铅、砷、镉、汞超标率分别为21.0%,12.0%,9.7%,28.5%,6.9%;单样本同一批次药材中存在2种、3种、4种重金属同时超标的现象,平均超标率分别为4.6%,1.5%,0.7%;36种常见中药材中桔梗、细辛、黄连等药材重金属含量较高,枸杞子、两头尖、西洋参、枳壳中5种重金属含量均没有超标;不同产地药材重金属污染的种类及程度均存在一定的差别;栽培药材铜和铅的含量高于野生药材,砷的含量则是野生高于栽培。结论:作者较详细、系统的报道了中药材重金属污染现状,为进一步深入开展中药材重金属研究提供了依据。

怀山药多糖铁(Ⅲ)的组成及性能表征

目的：对怀山药多糖铁（Ⅲ）复合物的性能进行表征并分析其组成。方法：从性状、溶解性及稳定性方面分析怀山药多糖铁的理化性质，利用红外及透射电镜技术分析怀山药多糖铁的表面结构。采用高温炉灰化法、湿法消化法和直接溶解法对怀山药多糖铁进行样品处理，用邻菲罗啉分光光度法测定复合物中铁含量。硫酸（苯酚法测定怀山药多糖铁中多糖含量。结果：怀山药多糖铁是无定形棕红色粉末，易溶于水，在pH3．8—11．6不沉淀、不水解。怀山药多糖铁是以聚合的β-FeOOH微核为核心，多糖在其表面配合形成的多糖铁（Ⅲ）表面复合物。3种样品处理方法测得的铁质量分数分别为17．05％，16，53％，17．10％。硫酸-苯酚法测得多糖质量分数为16．27％。结论：怀山药多糖铁（Ⅲ）为首次报道，生理条件下性质稳定，有望开发为新型补铁剂。

黄连抗氧化活性研究

利用DPPH、FRAP和ABTS三种抗氧化活性分析方法对黄连植物不同部位的有机溶剂提取部分进行抗氧化评价,将所测定结果与Trolox进行比较,发现黄连植物不同部位抗氧化活性不同。其中,黄连须根的抗氧化活性最高;同一部位中,乙酸乙酯和甲醇提取物抗氧化活性一般要高于石油醚提取物。在三种方法中,黄连不同部位的提取物清除自由基的能力均随浓度增大而增大;三种方法之间有很好的相关性,以FRAP法与DPPH法相关性最好(r=0.9261,P<0.01)。

兔抗人DR5分子多克隆抗体的制备与初步应用

目的获得兔抗人DR5的多克隆抗体,并对多克隆抗体进行初步鉴定。方法皮下注射DR5免疫日本大耳白兔,加强免疫得到抗血清,应用蛋白G纯化获得多克隆抗体。对纯化的抗体进行ELISA、免疫印迹、细胞凋亡活性等初步鉴定。结果经纯化后的抗体效价为1∶32000;Western blot分析该抗体能够识别相对分子质量26000的sDR5;可以明显导致肿瘤细胞Jurkat凋亡,Western blot检测到随着抗体诱导时间的延长Jurkat细胞Bcl-2蛋白表达减少,Cyt-C、Bax、有活性的caspase3和caspase9蛋白的表达增加。结论所制备的多克隆抗体可应用于ELISA、免疫印迹和诱导肿瘤细胞凋亡活性及机制等实验,为确定DR5分子的组织及细胞分布和定位等提供了有力的工具。

怀山药化学成分研究(Ⅱ)

采用硅胶柱层析方法从怀山药(dioscorea opposita thunb)乙醇提取物中分离出了3个化合物,通过理化性质及波谱法进行结构鉴定,分别为7-羰基-β-谷甾醇(Ⅰ),尿嘧啶(Ⅱ),腺苷(Ⅲ).化合物Ⅰ～Ⅲ均为首次从薯蓣属植物中分离得到.腺苷应是怀山药中的有效成份之一,可以作为建立怀山药及怀山药产品质量标准的指标性成分.

铬天青S分光光度法测定茶汤中的铝含量

采用浓缩-湿法消化对茶汤进行前处理,用分光光度法测定茶汤中的铝含量,建立了浓缩-湿法消解-铬天青S分光光度法测定茶汤中铝的方法。实验结果表明,本方法前处理简单易行,检测结果准确度、灵敏度高、精密度好,在0～6μg/25mL浓度范围内,呈良好的线性关系,相关系数r=0.9997,样品的加标回收率在96.7%～100%,RSD为1.84%,该法方便、简单、快速、准确、可靠,适合茶汤中铝的测定。

茶多酚-锌(Ⅱ)配合物的合成及抗氧化活性

首次以信阳废次茶和氯化锌为原料,合成了茶多酚-锌(Ⅱ)配合物(TP-Zn),利用红外光谱、紫外-可见吸收光谱和热分析技术对其结构及性质进行表征和分析.以1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH.)、邻苯三酚自氧化反应产生超氧阴离子自由基(O2-.)和Fenton反应产生羟基自由基(.OH)为模型,用紫外-可见分光光度法分别测定茶多酚及其配合物对模型中DPPH.、O2-.和.OH的清除作用.结果表明:茶多酚-锌(Ⅱ)配合物清除DP-PH.、O2-.和.OH的能力强于茶多酚,其浓度与抗氧化活性呈一定的量效关系.

闪式提取法提取枣果皮中多酚的工艺研究

利用闪式提取法提取枣果皮中的多酚。考察了乙醇体积分数、料液比、提取时间和提取次数对枣果皮中多酚得率的影响。根据考察结果,运用正交实验方法对影响多酚得率的条件进行优化,然后进行验证实验。结果表明,最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数为60%,料液比1∶35(g/mL),提取时间为2min,提取3次;在此条件下,多酚得率达到13.62mg/g。该工艺与超声波提取相比,简单、迅速、得率高,可用于枣果皮中多酚的提取。

安石榴苷的研究进展

安石榴苷是石榴皮多酚的主要成分,具有抗氧化、抗癌、抗菌、抗病毒、抗炎等多种药理学功效.本文作者主要对国内外关于安石榴苷的研究进行了综述,详细阐述了安石榴苷的结构、提取分离方法、含量测定、活性及代谢方式等研究进展,以期为安石榴苷的开发应用提供参考依据.

中空ZSM-5分子筛微球及其吸附与催化性能

首先利用聚乙二醇作为软模板合成出具有一定介孔结构的ZSM-5分子筛微球,再通过快速可控碱刻蚀的方法,成功制备出尺寸均一的中空分子筛微球。利用X射线衍射(XRD)、氮气吸附等温线分析(N2 isotherm)、扫描和透射电子显微镜(SEM,TEM)对所制备的中空分子筛微球进行了表征,并研究了中空分子筛微球对有机物废水的吸附性能和对大分子的催化裂解性能。结果表明,刻蚀后分子筛结晶度略有下降,但是介孔度和孔体积明显提升。中空分子筛微球外径在600 nm,壳层厚度在100 nm左右。此外,该中空结构不仅对苯等有机分子具有吸附富集作用,其饱和吸附量几乎达到了常规分子筛微球的3倍,并且六次循环使用后的吸附容量依然保持基本不变,显示出较高的吸附容量和循环使用稳定性。在异丙苯和三异丙苯裂解反应中中空分子筛微球也显示出较高的催化活性。

抗DR5抗体对食管鳞癌的细胞毒作用及机制

目的:探讨抗人DR5功能性单克隆抗体mDRA-6对食管鳞癌EC9706和109细胞的细胞毒作用及其作用机制。方法:利用MTT法检测mAb mDRA-6对食管癌细胞的细胞毒作用;在显微镜下观察食管癌细胞死亡的形态变化;以琼脂糖凝胶电泳检测食管癌细胞中的DNA片段化。利用流式细胞术检测食管癌细胞表面DR5表达、细胞凋亡率和线粒体膜电位;利用caspase抑制剂分析mAb mDRA-6的细胞毒作用机制。结果:mAb mDRA-6对食管鳞癌细胞有显著的细胞毒作用,并呈剂量和时间依赖性,但对食管上皮细胞NEC细胞没有毒性。经mAb mDRA-6处理,食管鳞癌细胞出现典型的细胞凋亡特征:细胞膜皱缩,出泡,染色质浓缩,形成凋亡小体以及DNA片段化等。流式细胞术检测结果显示,食管癌细胞表面表达DR5,而食管上皮细胞NEC细胞不表达;经1.2μg/ml的mAb mDRA-6作用24小时后,大多数食管鳞癌EC9706和109细胞的表面均表达磷脂酰丝氨酸。Caspase 8的抑制剂几乎完全抑制mAb mDRA-6诱导的细胞凋亡,Caspase 9抑制剂的则影响小。此外,在mAb mDRA-6诱导的食管癌细胞凋亡的早期,线粒体膜电位不改变,在凋亡的晚期,线粒体膜电位降低。结论:mAb mDRA-6主要通过死亡受体信号传导途径诱导细胞凋亡,对食管鳞癌细胞产生细胞毒作用,其在以TRAIL/DR5系统进行的肿瘤治疗和探讨DR5功能结构域方面具有广阔的应用前景。

HPLC法同时测定忍冬叶中9种活性成分的研究

为了有效利用忍冬植株,建立了同时检测忍冬叶中新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、芦丁、木犀草苷、金丝桃苷、异绿原酸C、木犀草素和槲皮素9种活性成分含量的HPLC分析方法,并用于忍冬叶中活性成分的定量测定,为忍冬叶多指标质量评价标准提供理论依据和方法参考.

荧光增白剂4,4′-二(4-磺酸钠苯乙烯基)二苯甲酮的合成

用Heck反应合成了4,4′-二(4-磺酸钠苯乙烯基)二苯甲酮.对Heck反应条件进行了改进,使用壳聚糖负载钯为催化剂并考察了催化剂的回收再利用情况.通过研究影响该反应的各种因素,如反应时间、反应温度、原料配比等,优化了实验条件,得到了较好的结果.

异烟肼对斑马鱼的发育毒性及其机制研究

目的以新型模式生物斑马鱼为模型,评价药物对斑马鱼胚胎和幼鱼发育毒性和行为学的影响。方法用不同浓度的异烟肼处理发育至6 h的斑马鱼胚胎,于给药后24,48和72 h观察幼鱼的死亡率、孵化率及形态学变化。用不同浓度的异烟肼处理发育至72 h的斑马鱼幼鱼,于给药后24,48和72 h观察幼鱼的死亡率、畸形率、体长及形态变化,分析幼鱼行为学轨迹,HE染色检测斑马鱼脏器病理学改变,并考察异烟肼对幼鱼抗氧化体系的影响。结果在斑马鱼胚胎的发育毒性实验中发现,异烟肼具有明显的胚胎致死效应和致畸效应,剂量高于16 mmol·L-1时胚胎孵化率显著降低。异烟肼对斑马鱼胚胎的发育毒性主要有卵凝结、心包囊水肿,脊柱弯曲,发育迟缓等。剂量低于4 mmmol·L-1对斑马鱼胚胎无明显的发育毒性。在斑马鱼幼鱼的发育毒性实验中发现,异烟肼对斑马鱼幼鱼的发育过程有明显的致畸作用,主要表现为脊柱弯曲、卵黄囊吸收延滞、鱼鳔缺失、胸鳍发育不全、尾部弯曲和体长减小等。异烟肼给药组幼鱼触壁反射活动和行为轨迹明显减少,运动距离、运动时间和运动次数显著降低,说明给药后幼鱼活动减少,行为受抑制。病理切片显示异烟肼导致幼鱼肝脏细胞肿胀,肝细胞核萎缩,肝脏空泡化严重,肠管壁变薄,肠绒毛受损严重,肌肉细胞发生不同程度的萎缩、坏死。异烟肼导致斑马鱼幼鱼机体ROS、MDA水平显著升高,SOD活力显著下降。实时荧光定量PCR结果显示,与抗氧化相关的基因表达水平紊乱。如SOD1和L-FABP转录水平显著下降,GSTP2和CYP3A转录水平显著上升。表明异烟肼导致斑马鱼幼鱼抗氧化能力下降,脂质过氧化严重,发生氧化应激反应。结论异烟肼对斑马鱼胚胎和幼鱼有明显的致畸作用,对幼鱼的运动行为有抑制作用,并随着浓度的增加和作用时间延长而增强。

高速逆流色谱法分离制备华山参中东莨菪内酯

采用高速逆流色谱法从华山参乙醇提取液的氯仿萃取物中分离得到了一种高纯度的香豆素类化合物,东莨菪内酯.所用体系为正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水(体积比3∶5∶3∶5),上相做固定相,下相做流动相.分离所得东莨菪内酯的纯度经高效液相色谱检测达到97%.该方法操作简单、方便、快捷,可用于华山参中香豆素类化合物——东莨菪内酯的分离制备.