艾叶的炮制历史沿革及现代研究进展

艾叶为菊科植物艾Artemisia argyi Lévl.et Vant.的干燥叶,是我国常用传统中药。笔者通过查阅传统医药古籍、现代标准规范及文献资料,利用Cytoscape软件对艾叶炮制及炮制品功效的历史沿革进行梳理和可视化呈现。艾叶炮制最早可追溯至汉代,鼎盛于宋代和明代;古代炮制方法较多,包括净制、切制、炒制、辅料制(醋、酒、盐、制炭、米泔水、硫磺、药汁、枣泥制)和其他制法(焙制、绞汁、制绒);现代常用炮制方法包括净制、醋制、制炭和制绒等,与古代炮制方法相比较为单一;生熟艾叶功效及应用差异明显,虽艾叶古今炮制作用皆以减少毒副作用和增强温经止血等功效为主,但现代药理研究仅见净艾叶、醋艾叶和醋艾炭,其他炮制品未见延承研究,炮制机制尚不明确。建议在后续探索研究时,研究者可结合药用植物艾的本草特征和中药饮片艾叶的炮制特色,建立多维度炮制标准研究体系,以系统探索艾叶炮制前后的转化规律,清晰阐述其炮制的科学内涵。

丹参水溶性提取物丹参酚酸B的制备及应用

探讨丹参水溶性提取物丹参酚酸B的制备及其生物转化应用研究。以丹参酚酸B的出膏率和提取率为评价指标,比较丹参水溶性提取法包括水煎煮回流法、超声提取法、渗漉提取法,采用高效液相色谱(HPLC)法测定。研究发现,常规水煎煮回流法中丹参酚酸B提取率最高可达72.59%,远高于超声提取法的63.72%和渗漉提取法的65.69%(P<0.05)。丹参酚酸B的生物转化应用结果显示,100 g丹参酚酸B可以制备出14.2 g丹参素(纯度≥95%)和35.8 g Prewalskinic acid A(纯度≥91%),转化效率高。对丹参水溶性提取物丹参酚酸B的制备工艺进行了相关研究,获得了简便、高效、科学的工艺路线,该研究为丹参的进一步开发和实际应用奠定了理论和实践基础。

柳茶多糖对高热环境秀丽隐杆线虫运动的影响及其机制研究

目的研究纯化后柳茶多糖对高热环境秀丽隐杆线虫运动的影响。方法超声辅助提取制备的柳茶多糖经DEAE Sepharose Fast Flow葡聚糖凝胶和Sephadex G100葡聚糖纯化后得到两种柳茶多糖(SLP-1和SLP-2)对其进行结构分析及高热线虫运动试验。结果SLP-1和SLP-2是13.5 kDa左右的含硫酸根的三螺旋结构酸性多糖。SLP-1多糖是由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、果糖和阿拉伯糖组成,而SLP-2多糖不含果糖。在提高秀丽隐杆线虫热刺激运动能力上,SLP-2表现更为优异,其机制是通过上调热休克因子1信使核糖核酸(heat shock factor 1 messenger ribonucleic acid,hsf-1 mRNA)来抵御高热环境对机体造成的损伤,上调热休克蛋白16.2信使核糖核酸(heat shock protein 16.2 messenger ribonucleic acid,hsp-16.2 mRNA)、热休克蛋白70信使核糖核酸(heat shock protein 70 messenger ribonucleic acid,hsp-70 mRNA)和热休克蛋白90信使核糖核酸(heat shock protein 90 messenger ribonucleic acid,hsp-90 mRNA)表达以保护衰老相关蛋白结构的稳定,还可通过调节核因子红细胞系2相关因子2-血红素加氧酶-1(nuclear factor erythroid 2-related factor 2-heme oxygenase 1,Nrf2-HO-1)途径以提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的表达,从而提高抗氧化系统的总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)活性,,避免生成丙二醛(malondialdehyde,MDA)。结论柳茶多糖SLP-2是一种提高机体在高热环境中运动能力的功能性食品添加剂。

沙苑子总黄酮对雄性生殖功能障碍模型大鼠的改善作用及机制研究

目的:研究沙苑子总黄酮(TFA)对腺嘌呤诱导的雄性生殖功能障碍模型大鼠的改善作用及机制。方法:将雄性SD大鼠分为空白组、模型组、阳性组(五子衍宗丸,2 g/kg)和TFA低、中、高剂量组(0.05、0.1、0.2 g/kg),每组12只。各组雄性大鼠每日早上9:00灌胃相应药物,并于同日下午3:00灌胃腺嘌呤混悬液以复制生殖功能障碍模型(空白组除外),连续给药35 d。给药结束后,将各组雄性大鼠与雌性大鼠按1∶1合笼交配7 d后取出,检测致雌鼠受孕率;采用酶联免疫吸附法检测雄性大鼠血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、促黄体激素(LH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平;摘取雄性大鼠睾丸、附睾、精囊腺、胸腺、肾,并计算其脏器指数;采用苏木精-伊红(HE)染色法观察雄性大鼠睾丸、附睾及肾组织的病理学变化;采用免疫组织化学染色检测雄性大鼠肾组织中B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)、Caspase-9的蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组雄性大鼠致雌鼠受孕率,睾丸、附睾、精囊腺、胸腺指数,血清中T、E2、SOD、GSH-Px水平,肾组织中Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(P<0.01);肾指数和血清中FSH、LH、MDA、Scr、BUN水平,肾组织中Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);睾丸组织中生精小管直径变细、间距较宽,生精细胞排列紊乱;附睾管管壁增厚、排列疏松、间质增大,管腔增生萎缩、腔内精子聚集成团;肾组织中肾间质纤维增生,肾小管内可见大量黄色结晶。与模型组比较,阳性组和TFA中、高剂量组雄性大鼠致雌鼠受孕率,睾丸、附睾、精囊腺、胸腺指数,血清中T、E2、SOD、GSH-Px水平,肾组织中Bcl-2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),肾指数和血清中FSH、LH、MDA、Scr、BUN水平,肾组织中Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);TFA低剂量组上述指标变化趋势相同,且大部分有显著性差异(P<0.05或P<0.01);各给药组雄性大鼠睾丸、附睾、肾组织病理学变化均明显减轻。结论:TFA对腺嘌呤诱导的雄性大鼠的生殖障碍具有显著改善作用,其机制可能与降低性激素FSH、LH水平和下调肾组织中凋亡相关蛋白表达,升高性激素T、E2水平和改善机体氧化应激水平有关。

芩柏汤通过调节TLR2/IκB-α/IL-1β通路保护溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜的研究

目的 研究芩柏汤是否可通过调节TLR2/IκB-α/IL-1β通路保护溃疡性结肠炎大鼠的肠黏膜。方法 建立溃疡性结肠炎大鼠模型并随机分5组,另取9只SD大鼠记为正常组。美沙拉嗪组予以5%美沙拉嗪灌肠,芩柏汤低、中、高剂量组予以6%、12%、24%芩柏汤灌肠,模型组与正常组予以蒸馏水灌肠。记录DAI和结肠黏膜Luk评分,ELISA法检测血清IL-1β、IL-4、IL-10水平,HE染色观察病理变化,RT-qRCR法检测TLR2、IκB-α、NF-κB、IL-1β mRNA表达,Western blot法检测蛋白表达及其磷酸化水平。结果 美沙拉嗪组和芩柏汤各剂量组均可减轻结肠黏膜组织病理损伤。与模型组比较,美沙拉嗪与芩柏汤各剂量组DAI、Luk评分,血清IL-1β、IL-4水平,结肠黏膜组织TLR2、IκB-α、NF-κB、IL-1β mRNA表达,结肠黏膜组织TLR2、IκB-α、胞核NF-κB、IL-1β、p-IκB-α蛋白表达均降低(P<0.05),血清IL-10水平和结肠黏膜组织胞浆NF-κB蛋白表达均升高(P<0.05);芩柏汤中、高剂量组p-IκB-α/IκB-α表达比值均升高(P<0.05)。结论 芩柏汤可减轻溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜组织病变和炎症反应,可能与抑制TLR2/IκB-α/IL-1β通路有关。

益肾补骨汤调节去卵巢大鼠骨代谢的作用研究

目的研究益肾补骨汤对去卵巢大鼠骨代谢的调节作用。方法取51只大鼠建立去卵巢大鼠模型,另取10只大鼠设置为假手术组。将建模成功的大鼠随机分为尼尔雌醇组、高剂量益肾补骨汤组、中剂量益肾补骨汤组、低剂量益肾补骨汤组及空白模型组,每组各10只,灌胃治疗。对比各组大鼠股骨、胫骨骨密度,骨代谢指标;观察骨组织形态学变化;检测大鼠胫骨组织中基因和蛋白表达。结果模型组骨密度均较正常组下降,血清骨形成指标均下降、骨吸收指标均升高,胫骨组织病理改变严重,且骨形成蛋白-2(BMP-2)、Smad-1/5/8、Runt相关转录因子2(Runx 2)、骨保护素(OPG)mRNA和蛋白表达水平及p-Smad1/5/8水平均下降,而核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、核因子κB受体活化因子(RANK)mRNA和蛋白表达水平均升高,尼尔雌醇组和益肾补骨汤三个剂量组对上述指标均有改善作用。益肾补骨汤的作用效果呈剂量依赖性,且益肾补骨汤中剂量作用与尼尔雌醇组接近,其余每两组间对比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论益肾补骨汤可提高去卵巢大鼠骨密度,促进骨形成,减少骨吸收,推侧其机制可能与调控BMP/Smads通路、OPG/RANKL/RANK通路有关。

熊果酸调控外泌体介导的miR-155-5p保护脓毒症大鼠心肌组织的作用研究

目的研究熊果酸通过外泌体介导微小核糖核酸-155-5p(micro ribonucleic acid-155-5p,miR-155-5p)对脓毒症大鼠心肌的保护作用。方法从60只SD雄鼠中随机挑出50只为建模大鼠,通过腹腔注射内毒素(lipopolysaccharide,LPS)法建立脓毒症大鼠模型。余下10只为正常对照组。将建模成功大鼠随机分为5组,熊果酸高、中、低剂量组、GW4869组、模型组。熊果酸高、中、低剂量组腹腔注射5 mg/kg LPS+50%二甲基亚砜(dimethylsurfoxide,DMSO)后立即尾静脉注射熊果酸120、80、40 mg/kg+50%DMSO混合液;GW4869组腹腔注射5 mg/kg LPS+50%DMSO后立即尾静脉注射鞘磷脂酶抑制剂GW48692.5μg/g+50%DMSO混合液;模型组大鼠腹腔注射5 mg/kg LPS+50%DMSO后,尾静脉注射等体积生理盐水;正常对照组仅腹腔注射等体积生理盐水后,尾静脉注射等体积生理盐水。另将各组外泌体与原代培养乳鼠心肌细胞共培养,设置未加外泌体仅加入等体积PBS的心肌细胞为PBS对照组;通过脂质体转染技术将miR-155-5p minic转染至大鼠心肌细胞,将转染miR-155-5p心肌细胞与动物实验中各组外泌体共培养24 h,另设置未转染miR-155-5p minic且不加外泌体仅加入等体积PBS的心肌细胞为PBS对照组,仅转染miR-155-5p minic且不加外泌体的心肌细胞为miRNA-155-5p minic转染组和GW4869+熊果酸+miR-155-5p minic组(其中熊果酸分别设置低、中、高剂量)。结果模型组和GW4869组大鼠心肌细胞出现明显空泡样变、核肿胀,组织水肿明显,可见明显炎性浸润,熊果酸3剂量组大鼠心肌组织病变均出现好转;各组均从外周血中分离出外泌体;模型组和熊果酸3剂量组外泌体中miR-155-5p表达水平均高于正常对照组(P<0.05),GW4869组外泌体中miR155-5p表达水平低于正常对照组(P<0.05);经培养鉴定证实所取细胞为乳鼠心肌细胞;模型组、GW4869组、熊果酸3剂量组白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素6(interleukin-6,IL-6)水平均高于磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)对照组和正常对照组(P<0.05),熊果酸3剂量组上述指标水平均低于模型组和GW4869组(P<0.05);miR-155-5p minic转染乳鼠心肌细胞后miR-155-5p minic转染组细胞中miR-155-5p表达水平升高(P<0.05)。将各组外泌体与miR-155-5p minic转染后细胞共孵育,GW4869组细胞培养基中IL-1β、IL-6浓度均高于其余各组(P<0.05),模型组+miR-155-5p minic均高于miR-155-5p minic转染组(P<0.05),GW4869+熊果酸高剂量+miR-155-5p minic组与miR-155-5p minic转染组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论熊果酸可改善脓毒症大鼠心肌病变,且可通过抑制外泌体中miR-155-5p表达水平,抑制心肌细胞炎症反应。

丹参酮ⅡA对CVB3感染的小鼠原代心肌细胞氧化损伤及凋亡的影响及其机制研究

目的探讨丹参酮ⅡA对病毒性心肌炎细胞损伤和凋亡的影响及潜在的作用机制。方法以柯萨奇B3m病毒(CVB3)感染小鼠原代心肌细胞构建病毒性心肌炎体外模型。实验分为5组:正常对照组、丹参酮ⅡA(TanⅡA)组、模型(CVB3)组、丹参酮ⅡA治疗(CVB3+TanⅡA)组和利巴韦林治疗(CVB3+Rib)组。细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞活性,试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量,ELISA法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),流式细胞术检测细胞凋亡水平,Westerm blot检测细胞中剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Toll样受体4(TLR4)的表达和核转录因子κB(NF-κB)活化水平。结果与正常对照组相比,CVB3组心肌细胞活性下降,SOD和GSH-Px活性降低,MDA含量增多,炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平明显上升,凋亡率增加,Cleaved Caspase-3、TLR4和p-NF-κB的表达明显上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。丹参酮ⅡA和利巴韦林能够提高CVB3诱导的细胞活性,提高SOD和GSH-Px活性,降低MDA含量,减少IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌,抑制细胞凋亡,下调Cleaved Caspase-3、p-TLR4和NF-κB的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA通过TLR4/NF-κB信号通路减轻氧化应激和炎症反应,降低CVB3诱导心肌细胞损伤和凋亡。

基于云时代背景下医学实验室智能化管理模式的研究

医学学科本身具有实践性强的特点,实验室在医学专业教育中充当着不可或缺的角色。本文通过分析医学实验室管理过程中的问题与不足,紧跟社会发展,搭载信息采集、网络管理技术,构建实验室智能化管理模式,同时采用建立实验平台和改革管理模式等方法对学校的医学实验室管理进行探讨,有助于解决实验室管理难题,更有利于加强实验室管理的科学化、规范化、制度化,更好地发挥实验室的功能,提升实验室的安全建设。

UPLC-qTOF-MS/MS法测定透骨草中有效成分

建立了超高效液相色谱(UPLC)与电喷雾四极杆飞行时间质谱(ESI-qTOF-MS)相结合的方法用于快速分离和鉴定透骨草中的成分。样品在ACQUITY UPLC HSS T3 C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)上以0.1%甲酸(溶剂A)和乙腈(溶剂B)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.25 mL/min。通过UPLC-qTOF-MS/MS对透骨草进行色谱分析,确定了47个化合物的特征,其中15个化合物通过与参考标准的比较得到了明确的鉴定。为了进行定量分析,使用UPLC-DAD在210,260和326 nm的波长下同时检测了来自12个批次透骨草样品的15种主要化合物。该方法在精密度、重复性、稳定性、准确度等方面进行了验证。本研究为透骨草的整体质量控制提供了潜在的方法。

冠心病患者血清C1q/CTRP1、Lp-PLA2、MCP-1变化及与动脉粥样硬化严重程度的关系分析

目的探讨冠心病(CHD)患者血清补体C1q/TNF相关蛋白1(C1q/CTRP1)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、人巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)变化及与动脉粥样硬化严重程度的相关性。方法选取2017年12月至2021年1月我院收治的CHD患者150例作为观察对象,行冠状动脉CT血管成像(CCTA)检查,根据CCTA结果将患者分为轻中度狭窄组和重度狭窄组;同期在本院接受健康体检的50例健康人员作为健康对照组。检测全部研究对象血清C1q/CTRP1、Lp-PLA2、MCP-1水平的变化,借助于个体工作特征(ROC)曲线及其曲线下面积(AUC)分析CHD患者血清C1q/CTRP1、Lp-PLA2、MCP-1的诊断效能;Logistic回归分析C1q/CTRP1、Lp-PLA2、MCP-1与CHD患者动脉粥样硬化严重程度的相关性。结果150例CHD患者行冠状动脉CT血管成像(CCTA)检查存在不同程度的冠状动脉粥样硬化,轻中度狭窄组和重度狭窄组患者分别为70、80例;重度狭窄组血清C1q/CTRP1、Lp-PLA2、MCP-1水平高于轻中度狭窄组、健康对照组(P<0.05),轻中度狭窄组以上指标水平高于健康对照组(P<0.05);ROC结果显示:血清C1q/CTRP1、Lp-PLA2、MCP-1单独及联合预测ACI患者预后的AUC分别为0.901、0.795、0.794、0.935,95%CI分别为0.860~0.941、0.728~0.861、0.717~0.871、0.902~0.968,截断值为8.68、126.32 ng/mL、110.96 pg/mL,联合预测的AUC大于单独预测的AUC(P<0.05);经多因素Logistic分析C1q/CTRP1≥8.68、Lp-PLA2≥126.32 ng/mL、MCP-1≥110.96 pg/mL是CHD动脉粥样硬化严重程度的危险因素。结论CHD患者血清C1q/CTRP1、Lp-PLA2、MCP-1水平在监测CHD病情进展中有一定的临床价值,且影响CHD冠状动脉粥样硬化严重程度的危险因素是血清C1q/CTRP1、Lp-PLA2、MCP-1水平升高而导致。

基于调节肠道菌群的功能性低聚糖改善肥胖的研究进展

肥胖是机体脂肪积聚过多的一种典型的能量过剩疾病,是导致2型糖尿病和心血管疾病等一系列代谢性疾病的主要原因之一,已成为威胁全球健康的重大公共卫生问题。肠道菌群作为机体能量代谢调控的重要参与者,在肥胖及相关代谢性疾病的发生发展中起着关键作用,通过饮食干预调节肠道菌群,进而改善机体健康状况将是未来的研究热点之一。已有研究表明,功能性低聚糖作为一类典型的新型益生元,可调节肠道菌群结构及其代谢产物的水平,影响机体能量代谢过程,改善肥胖及相关代谢性疾病。本文主要对肠道菌群在肥胖中的潜在作用机制,以及常见功能性低聚糖调节肠道菌群改善肥胖的作用效果进行综述,以期为通过靶向肠道菌群精准干预肥胖及相关代谢性疾病提供一些新的潜在防治策略。

抗生素诱导的呼吸道菌群缺失对小鼠RSV感染的影响

目的探究抗生素雾化暴露引起的呼吸道菌群缺失对小鼠呼吸道合胞病毒(RSV)感染的影响,为临床合理使用抗生素提供指导意见。方法32只BALB/c小鼠分为2组:雾化ddH_(2)O对照组和雾化ABX组合抗生素组,处理6 d后,进行细菌16S rRNA基因PCR检测,构建呼吸道菌群缺失小鼠模型。上述2组组内再随机分为2小组,即PBS对照组(ddH_(2)O+PBS,ABX+PBS)和RSV感染组(ddH_(2)O+RSV,ABX+RSV),饲养至第14天。检测和分析各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中的炎症细胞和相关细胞因子(TNF-α、IL-8、IL-10及MCP-1)的数量和水平,观察肺组织病理学状况及检测病毒载量。结果BALF中细菌DNA提取和16S rRNA基因PCR检测显示,雾化ABX组合抗生素处理能够有效地剔除呼吸道菌群。BALF中炎症细胞和相关细胞因子检测显示,ABX+RSV组炎症细胞总数明显增多(P<0.05),分类以巨噬细胞和淋巴细胞为主;且细胞因子TNF-α、IL-8、MCP-1及IL-10水平显著升高(均P<0.05)。肺部HE染色显示,感染RSV后ddH_(2)O+RSV组和ABX+RSV组小鼠肺部损伤明显加重(均P≤0.01),与ddH_(2)O+RSV组相比较,ABX+RSV组的病毒载量明显升高(t=2.7160,P=0.0217)。结论雾化ABX组合抗生素不仅能够有效地剔除呼吸道菌群,而且明显增加了小鼠感染RSV的风险,导致呼吸道炎症加重,以及病毒载量升高。

艾司西酞普兰对PCI术后的非ST段抬高型急性冠脉综合征患者的心理状态及心功能的影响

目的 探究艾司西酞普兰对经皮冠状动脉介入(PCI)术后的非ST段抬高型急性冠脉综合征(NSTE-ACS)患者的心理状态及对心功能的影响。方法 选取我院2017年6月~2020年6月109例NSTE-ACS行PCI术后的患者为研究对象,根据治疗方案不同分为对照组和观察组。对照组予瑞舒伐他汀口服及心理治疗,观察组在对照组基础上增加艾司西酞普兰口服治疗,对比两组心理状态、心功能、生活质量。结果 观察组治疗2月末HAMA、HAMD评分及CPP、sLOX-1、BNP、LVESD、LVEDD水平低于对照组,PH、PS、SR、EN评分及LVEF水平高于对照组(P<0.05)。结论 艾司西酞普兰可以改善PCI术后的NSTE-ACS患者的心理状态,改善心功能,提高生活质量。

miR-195对心力衰竭患者心肌细胞增殖及CDCA4蛋白表达的影响

目的探究miR-195对心力衰竭患者心肌细胞增殖及CDCA4蛋白表达的影响。方法选取河南省人民医院2018年4月—2019年4月收治的120例心力衰竭患者,将NYHA分级Ⅰ级、Ⅱ级共67例患者纳入轻症组,Ⅲ级、Ⅳ级共53例患者纳入重症组,采集两组血清均行实时定量PCR法检测血清miR-195水平,行细胞转染、细胞增殖试验,对比两组患者心肌细胞增殖能力;进行Westerm Blot检验检测CDCA4蛋白表达水平。结果重症组血清miR-195相对表达量为(5.42±0.76),高于轻症组;转染48、72、96 h,重症组吸光度值均低于轻症组;重症组CDCA4蛋白相对表达量为(0.68±0.26),低于轻症组,差异具有有统计学意义(P<0.05)。结论心力衰竭患者病情越严重,血清miR-195水平越高,CDCA4蛋白表达越低,心肌细胞增殖能力越受到抑制。