貂源铜绿假单胞菌耐药性及生物学特性

为了解貂源铜绿假单胞菌流行株基本特性,对分离的20株铜绿假单胞菌进行药物敏感性试验、血清型鉴定、 ToxA 基因检测、强毒株筛选及绝对致死量(LD 100 )测定。结果表明,铜绿假单胞菌分离株耐药现象比较严重,对氨苄西林、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻吩、头孢噻肟、头孢西丁、头孢唑林和四环素不敏感,对妥布霉素敏感率为95%;铜绿假单胞菌分离株的血清型为G型和B型,分别占85%和15%;20株铜绿假单胞菌均能检测出毒素基因 ToxA;小鼠致死性试验表明,铜绿假单胞菌分离株之间毒力差异很大,少数菌株如ZHDL9、ZHDL6等均表现出较强的毒力。以菌株ZHDL9为代表株建立小鼠鼻腔感染模型,采用建立的感染模型测定得菌株ZHDL9对小鼠的LD 100 为5×10 7 cfu。由此可见,分离的20株铜绿假单胞菌对临床常用抗生素耐药严重,对妥布霉素的敏感率为95%,提示该种抗生素可用于临床治疗水貂出血性肺炎,而菌株ZHDL9可作为生物制品研发的候选菌株。

铜绿假单胞菌F_(190—342)-I_(21—83)基因的克隆及其融合蛋白的原核表达

为了研究铜绿假单胞菌外膜蛋白F和I的重要表位,根据已公布的F和I基因序列设计2对特异性引物,以分离的水貂源铜绿假单胞菌ZHDL9基因组为模板,扩增重要的表位基因F_(190—342)(F1)和I_(21—83)(I2),并对得到的2段基因序列进行生物信息学分析。结果表明,PCR扩增所得F1和I2两段基因序列高度保守,不存在核苷酸的插入和缺失;通过融合PCR技术将得到的F1基因和I2基因无缝连接,得到651 bp的融合基因F1I2。将融合基因F1I2克隆至原核表达载体p ET-28a,成功构建了融合表达质粒p ET-28a-F1I2;将pET-28a-F1I2转化大肠杆菌BL21 (DE3),成功构建重组菌株BL21(pET-28a-F1I2),并对重组菌株进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测表明,成功表达了融合蛋白F1I2,且融合蛋白能够被His镍柱纯化; Western Blotting检测表明,表达的融合蛋白F1I2与铜绿假单胞菌ZHDL9菌株感染的水貂血清具有较好的反应原性。

一例羔羊痢疾的诊治

2012年12月的某日，笔者接到孟津县小浪底镇一养羊户的电话。称其羊群中，发现一些出生2～3日的羔羊现体温不到37℃的情况，发病后1～2d死亡。笔者赶到该场，对羊群及病羊进行了观察：发现病羊有如下临床症状：精神沉郁，低头弓背，不想吃奶，不久发生腹泻，排腥臭、褐色水样粪便，粪便呈黄绿色、黄白色甚至灰白色，粪便带血并含有黏液和气泡，肛门失禁、眼窝塌陷、卧地不起；测量体温36．7℃；经询问场主，羊群购买回场后，没有进行疫苗接种。根据临床症状和发病日龄初步诊断为羔羊痢疾。羔羊痢疾是出生羔羊的一种急性传染病，其特征是持续性下痢。该病常可使羔羊大批死亡。

猪腹泻的病因浅析及鉴别诊断

春季天气多变,温差较大,猪群中腹泻病发病较多。简要介绍了猪腹泻病的原因及诊断方法。