河南省实验动物中心实验动物设施的建设

河南省实验动物中心新建实验动物大楼及标准化SPF实验动物和动物实验设施是河南省实验动物的重点建设项目。投资 6 0 0万元。作者作为该设施建设的主要参与者 ,对标准化SPF设施的建立进行了大量的调查和研究 ,并付诸于实践 ,使建成的设施各项指标均达到了国家标准 。

河南省实验动物设施建设情况及存在问题分析与对策

实验动物设施是保证实验动物和动物实验质量的重要支撑条件。河南省实行实验动物合格证制度以来 ,1996年至 2 0 0 3年 6月共完成新 (改 )建实验动物设施面积 2 170 5m2 ,投入资金达 4 35 5万元 ,发放合格证 6 0个。对《河南省实验动物质量管理实施办法》实施前后实验动物设施建设的两个发展阶段进行了总结分析 ,认为加强对新 (改 )建实验动物设施的论证和管理 ,是保证设施质量 ,减少损失的有效途径 ,并就存在的问题进行了分析 。

深切怀念中国实验动物科学界泰斗——河南省实验动物事业的功勋人物刘瑞三先生

突闻刘瑞三先生仙逝,深感悲痛。震惊之余,不禁令人回忆起几十年前刘先生为河南省实验动物科技发展作出的重大贡献。1河南省实验动物中心的建立1982年,在昆明召开了全国第一次实验动物工作会议,大家充分认识到实验动物科学既是生命科学的组成部分,又是生命科学的重要研究条件,几乎可以说,近代生命科学的每一项重大成果都要应用实验动物。

促进动物实验规范化管理的探索与尝试

河南省在实验动物许可证制度实施前，各单位的软件建设和管理水平明显滞后，普遍存在，重硬件轻软件，重条件轻管理，重宏观轻过程的情况，因此，加强动物实验软件建设和动物实验规范化管理成为我省实验动物标准化的工作重点。但在国家《实验动物许可证管理办法》（试行）中，仅有“具有健全有效的质量管理制度”要求，

SPF级实验动物设施内的现代化通讯系统

SPF级实验动物设施是一个对环境洁净度要求很高的全封闭系统 ,其人员和物品的进出必须遵守严格的消毒制度 ,以免造成环境污染。 SPF级设施内现代化通讯系统的应用保证了设施正常运转使用 ,同时方便与外界进行信息通讯 ,为实验人员提供了便利 ,提高了工作质量及管理水平。

日本庆应大学SPF级实验动物设施情况介绍

目的 通过对日本庆应大学新建SPF级实验动物设施情况的分析 ,并与国内 (重点以河南省实验动物中心 )SPF设施情况进行横向比较 ,一方面找出两者之间的差距和不同进行讨论 ;另一方面 ,以国际实验动物设施为参照 ,对国内实验动物设施的运行管理及经费的预测和评估做一个初步的资料准备。意义 找出中日实验动物领域中的差距 ,学习国际先进的技术及管理方法 。

苦参素对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脑内神经干细胞增值的影响

目的观察苦参素对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠的治疗作用及对脑内神经干细胞标志物-巢蛋白Nestin、转录因子Sox-2表达的影响,探讨苦参素对EAE大鼠的治疗机制。方法将60只雌性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和治疗组,每组20只。用新鲜豚鼠全脊髓匀浆免疫诱导建立EAE模型,自免疫后第11天(发病初期)起,治疗组大鼠每日腹腔注射苦参素6.70 ml/kg(250 mg/kg),同时正常组与模型组注射等量生理盐水。每天观察并记录大鼠的体重变化及神经功能学评分。给药1 w后将大鼠处死,取脊髓和大脑,免疫组织化学法检测脑内Nestin的表达,RT-PCR法测定脑内SOX-2含量的变化。结果与模型组相比,治疗组大鼠神经功能评分明显降低,Nestin阳性细胞数和SOX-2的表达均显著增加(P<0.05)。结论苦参素对EAE大鼠有治疗作用,其机制可能与增加中枢神经系统中神经干细胞的数量有关。

微卫星DNA在近交系小鼠遗传监测中的应用

用7对引物对5种不同品系近交系小鼠的微卫星位点进行多态性分析。结果显示,不同品系及同品系不同个体近交系小鼠的扩增产物在7个微卫星位点上均出现一清晰条带,在不同品系小鼠之间筛选出4个(D3Mit22、D6Mitl92、D6Mit36、D6Mitl49)具有多态性的位点;同品系内不同个体之间没有多态性。结果表明,所检测的小鼠符合近交系要求,筛选出的4个微卫星位点可用于国内有关近交系小鼠的遗传背景监测。

突变系无毛小鼠近交系的繁殖性能观察

目的 :观察突变系无毛小鼠近交系的繁殖性能 ,找出最佳保种方式。方法 :从 2 1代到 2 9代分别采用无毛纯合子雄性与有毛杂合子雌性、有毛杂合子雌雄、无毛纯合子雌雄、有毛杂合子雄性与无毛纯合子雌性 4种交配方式 ,对其生产胎数、胎平均产仔数、离乳数、无毛小鼠的生产机率等进行观察统计。结果 :前 2种交配方式 ,生育小鼠中均有无毛小鼠 ,生产胎数以 2或 3胎为主 ,平均产仔数和平均离乳率无明显差异 ,但无毛纯合子雄性与有毛杂合子雌性交配 ,无毛小鼠的生产机率明显高于有毛杂合子雌雄交配 (P <0 .0 1)。后 2种交配方式 ,无毛纯合子雌性受孕较难 ,即使受孕 ,所产仔鼠于生后不久全部死亡 ,无一存活至离乳日龄。结论 :无毛突变系的繁殖保种最好采取无毛基因纯合的雄性 (具有繁殖力 )和有毛杂合子的雌性交配。

无毛小鼠同类系的建立

目的 :培育包含无毛基因的同类系小鼠新品系 ,明确无毛基因在不同遗传背景下的表达方式。方法 :将无毛基因通过杂交互交导入法分别导入 6 15、C57BL/6、BALB/c、DBA/2共 4种近交系。结果 :已完成 4代导入 ,杂交的第 1代、第 3代均表现有毛 ,第 2代、第 4代互交育出 6 15、C57BL/6、BALB/c、DBA/2共 4种无毛小鼠 ,其脱毛规律同豫医无毛小鼠。结论 :无毛基因可以在不同的遗传背景下表达。

近交系豫医无毛小鼠G显带带型分析及模式图

目的 :观察近交系豫医无毛小鼠染色体G显带 ,并绘制出其染色体G带带型模式图。方法 :取近交系豫医无毛小鼠骨髓细胞制备染色体标本片 ,以胰酶法获取分散充分 ,带型清晰的早中期及中期分裂相。结果 :同一个中期细胞中染色体的带没有Nesbitt模式图的带多 ,不同细胞中带最多的染色体 ,其带的数目和位置与Nesbitt模式图基本一致。在核型分析的基础上绘制了近交系豫医无毛小鼠G带模式图 ,描述了各号染色体G带带型特征。结论 :近交系豫医无毛小鼠G带模式图的绘制 。

豫医无毛小鼠寿命观察

目的 :通过对豫医无毛小鼠寿命的观察 ,探讨突变基因对无毛小鼠寿命的影响。方法 :在正常生产繁殖状态下 ,随机选取无毛小鼠雌雄各 50只 ,杂合子有毛小鼠雌雄各 2 5只 ,饲养条件、营养状况、实验方法等均相同 ,观察每只小鼠自然衰老的过程 ,并计算出各自的寿命。结果 :纯合子无毛小鼠平均寿命雌性为 (30 3 .3± 35 .0 )d、雄性为 (2 61 .6± 41 .2 )d ,杂合子有毛小鼠平均寿命雌性为 (382 .7± 35 .7)d、雄性为 (353 .0± 37.2 )d。纯合子无毛小鼠与杂合子同性别有毛小鼠寿命相比差异有统计学意义 (P <0 .0 1 )。结论 :突变基因可能对无毛小鼠的寿命有影响 。

豫医无毛小鼠生殖及乳腺功能观察

目的 :研究皮肤无毛对豫医无毛雌鼠的生殖、乳腺功能的影响。方法 :将无毛雌性小鼠与正常小鼠交配 ,统计胎次 ,妊娠 ,胎产子数 ,离乳数 ,离乳率。并与有毛雌鼠比较。结果 :无毛雌鼠卵巢发育正常 ,乳腺发育基本正常 ,但泌乳能力差异很大 ,功能正常的只有 30 % ,与有毛雌鼠相比 ,无毛雌鼠妊娠率 (2 3 %～ 70 % ) ,胎产子数(5 .3～ 6 .8)、离乳数 (0～ 1 .5只 )及离乳率均低 (0～ 2 6 % ) ,幼鼠死亡率高 (74.6 %～ 1 0 0 % )。结论 :皮肤无毛导致无毛小鼠泌乳能力。

近交系豫医无毛小鼠STR位点的遗传检测

目的 :探讨近交系豫医无毛小鼠 (YYHL)短串联重复序列 (STR)位点的遗传多态性。方法 :随机选择位于小鼠 3、4、7、1 6号染色体上的 5个STR位点 ,用PCR技术对近交系YYHL、DBA近交系小鼠及昆明小鼠进行多态性分析。结果 :5对引物在近交系YYHL各基因座上均出现一条带 ,其中D7Nds1、D3Mit2 2、D1 6Mit4三基因座表现为多态性 ,D3Mit2 1、D4Mit2二基因座表现为单态性。结论 :D7Nds1、D3Mit2 2、D1 6Mit4三基因座可用于检测近交系小鼠遗传特异性 ,结合近交系豫医无毛小鼠皮肤移植实验 ,近交系豫医无毛小鼠符合近交要求。

人羊膜间充质干细胞移植对荷瘤鼠C6胶质瘤生长的抑制

背景:实验室前期课题成果显示,脐血或羊膜间充质干细胞具有亲肿瘤及抑瘤特性。目的:探讨人羊膜间充质干细胞对C6胶质瘤细胞生长的抑制作用。设计、时间及地点:细胞学体内对照观察,于2008-06/09在郑州大学微生物与免疫教研室完成。材料:胎盘来源于郑州大学一附院妇产科健康剖宫产产妇,C6胶质瘤细胞株由北京神经外科研究所惠赠,10只BALR/c裸鼠由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。方法:无菌条件下取胎盘,分离部分羊膜,体外分离培养人羊膜间充质干细胞,传至第3代用于实验。10只裸鼠背部双侧皮下注射含3×106个C6胶质瘤细胞的DMEM/F12培养基,建立双侧荷瘤鼠模型。成功造模后,模型对照组于裸鼠左侧皮下注射DMEM/F12培养基50μL,细胞移植组于同一裸鼠右侧皮下注射含2×106个羊膜间充质干细胞的等量DMEM/F12培养基。主要观察指标:肿瘤生长情况,周围组织浸润及新生血管形成等病理学观察,免疫组化法检测肿瘤中细胞周期素D1的表达。结果:细胞移植后14,21d,细胞移植组肿块体积明显小于模型对照组(F=54.127,P<0.05)。模型对照组瘤体呈结节状,部分肿瘤组织中心有坏死现象,内部有新生血管形成,肌层及皮肤浸润较明显,已达腹膜;细胞移植组瘤体分叶较少,无新生血管形成,仅有局部的皮肤浸润,未见肌层浸润。模型对照组细胞周期素D1蛋白呈阳性表达,而细胞移植组表达阳性率较低。结论:人羊膜间充质干细胞可明显抑制荷瘤鼠C6胶质瘤细胞的生长,同时可抑制细胞周期素D1蛋白的异常表达。

豫医无毛小鼠主要免疫器官组织学观察

Objective: The purpose of this study is to observe histological structure of major immune organs of Yuyi hairless mice.Methods: By using Weigert′s hematoxylin and eosin staining.Results: The histological structure of spleen and lymph node of Yuyi hairless mice was normal at different ages.Thymus was showed with thicker cortex in one month and two months.Thymus shrank in fat tissues in eight months,showed a medulla structure without cortex.Thymus bodies were not found at different ages.Conclusion: The major immune organs of Yuyi hairless mice were normal in one month and two months,thymus shrank without cortex in eight months.

豫医无毛小鼠与昆明小鼠部分血液生化特性的比较研究

目的：比较豫医无毛小鼠与昆明小鼠血液生化特性有无差异。方法：测定总蛋白（ＴＰ）、白蛋白（ＡＬ）、丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）、天冬氨酸转氨酶（ＡＳＴ）、γ谷氨酰转肽酶（γＧＴ）、碱性磷酸酶（ＡＫＰ）均采用卫生部临床检验中心推荐的常规微量检测方法。结果：豫医无毛小鼠ＡＬ和ＡＬＴ测定值显著高于昆明小鼠（Ｐ＜００５）。结论：豫医无毛小鼠具有某些独特的生化特性。