狗脊多糖通过miR-181c调控IL-1β介导的骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡

目的探讨狗脊多糖(CBPS)通过调节miR-181c表达调控软骨细胞增殖和凋亡的潜在机制。方法以白细胞介素(IL)-1β联合CBPS干预软骨细胞,qRT-PCR、噻唑蓝(MTT)和流式细胞仪检测细胞中miR-181c表达及细胞增殖和凋亡。检测过表达miR-181c联合IL-1β处理对细胞增殖和凋亡的影响。采用MTT、流式细胞仪和Western印迹检测下调miR-181c表达联合CBPS对IL-1β介导的细胞增殖和凋亡及细胞中肿瘤坏死因子(TNF)-α、金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1和基质金属蛋白酶(MMP)-13蛋白表达的影响。结果IL-1β组miR-181c表达水平(0.41±0.06)明显低于Control组(1.00±0.14,t=6.709,P=0.000)。IL-1β组48 h及72 h细胞活力均明显低于Control组,而细胞凋亡率明显高于Control组(均P<0.05);miR-181c组miR-181c表达水平(4.72±0.35)明显高于miR-con组(1.06±0.12,P<0.05)。与Control组(1.00±0.08)相比,IL-1β组miR-181c表达水平(0.35±0.05)显著降低(P<0.05),IL-1β+miR-181c组miR-181c表达水平(0.81±0.11)明显高于IL-1β+miR-con组(0.38±0.07,P<0.05),基本恢复至正常水平。IL-1β组48 h及72 h细胞活力均明显低于Control组,而细胞凋亡率均明显高于Control组(均P<0.05);IL-1β+CBPS组48 h及72 h细胞活力均明显高于IL-1β+PBS组,而细胞凋亡率均明显低于IL-1β+PBS组(均P<0.05)。IL-1β组48 h、72 h细胞活力及细胞凋亡率均明显低于Control组(P<0.05);IL-1β+CBPS组48 h及72 h细胞活力及细胞凋亡率均明显高于IL-1β+PBS组(P<0.05)。IL-1β+CBPS组TNF-α及MMP-13水平明显低于IL-1β+PBS组,而TIMP-1水平明显高于IL-1β+PBS组(均P<0.05);IL-1β+CBPS+anti-miR-181c组TNF-α及MMP-13水平均明显高于IL-1β+CBPS+anti-miR-con组,而TIMP-1水平明显低于IL-1β+CBPS+anti-miR-con组(均P<0.05)。结论CBPS能够通过上调miR-181c表达,促进软骨细胞增殖并诱导凋亡,同时降低MMP-13/TIMP-1比值和TNF-α分泌。