河南省某猪场圆环病毒病免疫程序制订及效果评估

为了解河南省某规模化猪场按规定的免疫程序接种猪圆环病毒2型(PCV2)灭活疫苗后猪体内的PCV2抗体水平,随机采集90份免疫猪的血液样品(后备母猪、1胎母猪、2胎母猪、3胎以上母猪、3周龄、6周龄、9周龄、11周龄、19周龄猪各10份),通过ELISA检测PCV2抗体。结果显示,除3周龄猪抗体阳性率为90%以外,其他各猪群抗体阳性率均为100%,猪群没有发生圆环病毒病和其他传染病,猪群生产性能正常。检测结果证明商品猪3周龄首免,3周后二免;后备母猪配种前免疫,间隔3周二次免疫;经产母猪产前1个月免疫的免疫程序是科学合理的。

猪链球菌病实验室检测技术研究进展

猪链球菌能感染人和动物,引起仔猪的败血症、脑膜炎、关节炎、心内膜炎等;感染人,引起人的死亡。因此,对猪链球菌进行快速、特异性检测,具有重要的流行病学意义和临床应用价值。对猪链球菌的血清学、分子生物学和高通量等检测技术研究进展进行了阐述,以期为检测猪链球菌提供参考。

猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型与副猪嗜血杆菌混合感染的诊断及病原分析

为确定河南开封某猪场发生猪呼吸系统疾病综合征(PRDC)的病原,本研究无菌采集病死保育猪肺脏、心脏和脾脏等组织样品,进行细菌学检验和药敏试验,通过PCR/RT-PCR检测样品中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪流感病毒(SIV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪肺炎支原体(Mhp)等病原,并对核酸阳性病毒性病原的抗原结构基因进行测序和遗传演化分析。结果表明,通过细菌分离培养、形态观察、卫星现象观察和16S rRNA基因鉴定,从病死保育猪体内分离鉴定出1株副猪嗜血杆菌(Hps),药敏实验表明该菌株对对氨苄西林、阿莫西林克拉维酸、头孢噻呋和四环素几种药物敏感。核酸检测PRRSV和PCV2核酸阳性,分别命名为PRRSV/HN-2019和PCV2/HN11-2019;进一步对PRRSV/HN-2019和PCV2/HN11-2019的结构基因分析发现,PRRSV/HN-2019与与NADC30分支的毒株亲缘关系较近,属于NADC30-like毒株;PCV2/HN11-2019与PCV-2d分支的毒株亲缘关系较近,属于PCV-2d分支。综上所述,本研究确定该猪场存在PRRSV、PCV2和Hps的混合感染,为该猪场下一步的PRDC有效防控提供了参考依据。

河南地区猪源沙门菌血清型4,[5],12:i:-的分离鉴定及耐药性分析

沙门菌血清型4,[5],12:i:-作为鼠伤寒沙门菌单相变种的一个代表,自从20世纪90年代中期开始,在人类和动物中的流行不断增加。为调查沙门菌血清型4,[5],12:i:-在河南地区猪中的流行情况,本研究于2015年9月~2018年12月,从河南不同地区送检的63个病例中,分别采集发病仔猪的肺脏、心血、肝脏等样品,进行沙门菌的分离培养。通过染色镜检、PCR法对分离菌株进行鉴定,采用凝集法和鞭毛相抗原诱导转化方法鉴定分离菌株的血清型,采用双重PCR对沙门菌血清型4,[5],12:i:-分离菌株的鉴定结果进一步验证。采用肉汤稀释法测定分离菌株的耐药性。沙门菌的分离鉴定结果显示,从送检的63个病例中,共分离到6株沙门菌,阳性率为9.52%(6/63),其中3株为沙门菌血清型4,[5],12:i:-,另外3株为猪霍乱沙门菌和猪霍乱沙门菌孔成道夫变种。药敏试验结果显示,所有沙门菌分离菌株对氨苄青霉素、磺胺甲基异恶唑、萘啶酸和氯霉素均耐药,且呈多重耐药表型,其中沙门菌血清型4,[5],12:i:-分离菌株对卡那霉素、庆大霉素、阿奇霉素、四环素均耐药,而猪霍乱沙门菌和猪霍乱沙门菌孔成道夫变种分离菌株的耐药性较低。本研究首次报道沙门菌血清型4,[5],12:i:-在我国猪群中的流行情况,且其耐药性较强,可能给临床用药带来困难,对公共卫生安全构成潜在威胁。

仔猪沙门菌、猪繁殖与呼吸综合征病毒和圆环病毒混合感染的报道

仔猪副伤寒,又称为猪沙门菌病,是由鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、猪伤寒沙门菌等多种病原引起的一种重要的人兽共患病[1]。近年来,关于猪繁殖与呼吸综合征病毒与圆环病毒混合感染的报道较多[2-4],但是由沙门菌、猪繁殖与呼吸综合征病毒和圆环病毒三者的混合感染报道却极少[5]。笔者于2018年10月接诊1例病猪,通过临床诊断和实验室检测,确定为仔猪沙门菌、猪繁殖与呼吸综合征病毒和圆环病毒混合感染,报告如下。

猪流产胎儿中猪繁殖与呼吸综合征病毒的检测及GP5抗原分析

河南某规模化猪场,按照每年4次高致病性猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗免疫接种,2016年11月,妊娠后期母猪陆续产死胎。为确诊病因,采集死产胎儿肺脏组织,采用RT-PCR方法,扩增PRRSV NSP2基因部分片段(根据产物片段大小,能区分高致病性与经典毒株)和ORF5全长基因,结果显示,NSP2片段扩增大小约为418bp,表明检测毒株是高致病性PRRSV毒株;ORF5全长基因扩增结果,与预期大小片段一致。为分析猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫失败的原因,利用DNA Star软件,将检测毒株ORF5基因序列与其他17种PRRSV毒株ORF5基因序列构建遗传进化树,并对检测毒株与其他9种高致病性PRRSV毒株ORF5基因推导的氨基酸序列进行分析、比较及GP5抗原性分析。结果显示,ORF5序列分析表明,检测毒株与2015年福建分离毒株FJYR、河南分离毒株TJbd14-2同源性最高,分别为97.2%和97.0%,与美洲型经典毒株VR-2332同源性为87.7%,与欧洲型毒株Lelystad virus、NMEU09-1亲缘关系最远,分别为62.8%和62.6%;根据ORF5DNA序列推导氨基酸序列分析表明,与其他9种高致病性PRRSV毒株相比,从病料中检测毒株的GP5共有13个位置发生变异;GP5抗原指数分析表明,第30-40、51-63位抗原性,相比其他9种高致病性PRRSV毒株显著降低,据此推测这是导致免疫失败的根本原因,导致该猪场母猪流产的病原为一种变异的美洲型高致病性猪繁殖与呼吸综合征毒株。

猪日本乙型脑炎及猪细小病毒复合PCR检测方法的建立

根据GenBank上登录的日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)与猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)参考基因序列,设计合成2对特异性引物,在建立优化单项PCR检测方法的基础上,建立了PPV-JEV复合PCR检测方法,可扩增出预期的238 bp和152 bp特异性片段。该方法敏感性高、稳定性好、特异性强,临床样品检测结果与单项PCR检测结果符合率100%,该方法适合JEV和PPV的联合检测和鉴别诊断。

猪流行性腹泻病病毒RT-PCR分子诊断及部分S基因同源性分析

2018年3月,河南焦作市某猪场发生疑似猪流行性腹泻(PED)感染,而该猪场进行过PED疫苗免疫,为确诊病原,采集患病仔猪肠管内容物,利用RT-PCR法,扩增猪流行性腹泻病毒(PEDV)部分S基因片段,并将产物送基因公司测序。所获测序结果,运用DNAStar和MEGA5软件,与GeneBank下载的不同毒株S基因片段进行同源性分析。结果显示:RT-PCR扩增产物与预期大小一致,为969bp;该毒株部分S基因与经典毒株CV777同源性为94.8%,亲缘关系较远;与近年来流行毒株同源性为98.1%～99.1%,亲缘关系较近。PEDV变异毒株的出现可能是导致免疫失败的重要原因。

一例腹腔浆膜炎型猪链球菌病的诊断与防治

2018年5月,河南新密某养猪场连续有几头仔猪突然发病,其中2头急性死亡,腹腔内有大量网状纤维素性物质覆盖。为确诊病因,采集病料,经过常规分离培养、染色镜检和PCR检测,成功分离并鉴定为猪链球菌。选择10种抗菌药物,利用纸片扩散法,进行药敏试验。药敏试验结果表明,分离菌株对青霉素、阿莫西林、氨苄西林、红霉素、四环素、强力霉素、恩诺沙星、环丙沙星均敏感,对氯霉素、林可霉素耐药。本次试验对猪链球菌病的诊断与防治提供一定参考依据。

猪流行性腹泻的诊断与防控

湖北省某规模化养猪场在2017年2月份到5月份暴发了急性腹泻病,哺乳仔猪的发病率最高,为79.60%,死亡率66.35%,其次为保育猪,发病率为52.33%,死亡率为37.67%。种猪以及育肥猪虽然也感染了猪流行性腹泻,但死亡率并不高。随机采集疑似病猪病料36份,通过反转录聚合酶链式反应检测,确诊为猪流行性腹泻病毒感染。母猪粪样17份,阳性率52.94%;公猪粪样2份,阳性率100%;仔猪粪样15份,阳性率26.67%;仔猪呕吐物1份,阳性率0%。通过及时采取返饲等综合防控措施使本病得到有效控制。

常见影响猪繁殖性能的疾病

影响猪繁殖性能的疾病,又称为猪繁殖障碍性疾病,是影响养猪企业经济效益的重要疾病类型,如何解决好繁殖障碍疾病是许多猪场都很头痛的问题。文章从影响猪繁殖性能的疾病概况,常见繁殖障碍疾病的主要表现及其解决方案等方面进行了阐述,针对猪繁殖障碍问题,给出了工作思路,期望对读者有所帮助。

副猪嗜血杆菌病诊断与耐药分析

2017年3月,河南省清丰县某猪场育肥猪发生咳嗽、腹式呼吸、体温升高等症状,为确诊病因,采集典型病猪的肺、心血,分离出一种细菌,通过染色镜检、氧化酶触酶试验和PCR分子鉴定,最终确定出分离菌为副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS),编号为qff01。选择14种药物,采用纸片扩散法,对已确定为副猪嗜血杆菌的分离菌株进行药敏试验,其结果表明分离菌株对头孢噻呋钠、阿莫西林-克拉维酸、恩诺沙星、头孢曲松、阿奇霉素等药物敏感,对氨苄西林、四环素、氯霉素、土霉素、磺胺甲恶唑/甲氧苄啶耐药。本研究结果对该猪场的副猪嗜血杆菌病防治工作提供了一定的参考依据。

猪源绿脓杆菌的分离鉴定及16S rRNA基因同源性分析

从解剖病变为心包炎、纤维素性肺炎、肺脓肿的病死仔猪体内分离到1株细菌,通过形态特征观察、生化试验,将分离菌株初步鉴定为绿脓杆菌。动物致病性试验结果显示,分离菌株对小鼠具有很强的致病性。药敏试验结果显示,分离菌株对氧氟沙星、恩诺沙星高度敏感,对头孢噻肟、庆大霉素中度敏感,对青霉素、氟苯尼考、氨苄西林、阿莫西林、强力霉素、卡那霉素等耐药。将分离菌株的16S rRNA基因序列与Gen Bank中发表的绿脓杆菌序列进行Blast比对,结果表明,分离菌株与绿脓杆菌不同菌株的同源性高达99%以上,进一步确定分离菌株为绿脓杆菌。基于16S rRNA基因序列,使用MEGA 5.05软件,构建系统进化树,结果表明,分离菌株与病人痰液和腹泻婴儿分离菌株的同源性最高,与未加工水果分离菌株同源性最低。

一株猪源产气荚膜梭菌分离、鉴定及药敏试验

产气荚膜梭菌,根据产毒素能力分为A、B、C、D和E 5个血清型。一般认为C型菌株是导致2周龄内仔猪肠毒血症和坏死性肠炎的主要病原,而A型菌株则与哺乳及育肥猪肠道疾病有关[1]。因此,猪产气荚膜梭菌病主要由A型、C型产气荚膜梭菌引起各种年龄阶段的猪发生一种急性、致死性肠道传染病。

副猪嗜血杆菌分离鉴定及药敏试验

副猪嗜血杆菌能够引起猪的多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎等,是影响猪的最重要细菌之一,目前在所有的主要养猪国家均有存在。为了弄清河南省副猪嗜血杆菌病流行情况,2012年-2015年,从河南不同地区猪场送检的疑似病料,进行副猪嗜血杆菌分离和鉴定,共分离到5株细菌,通过细菌形态观察、培养特征鉴定、生化试验、PCR检测,鉴定为副猪嗜血杆菌,分别命名为A6-fei、C3-xin、C12-xin、D2-fei和E1-fei。采用纸片扩散法,对分离5株副猪嗜血杆菌进行药敏试验,其结果表明所分离的5株副猪嗜血杆菌的药物敏感性不尽相同,各分离菌株对头孢噻肟、氟苯尼考星最敏感,对复方新诺明敏感性最差,其中菌株C3-xin对复方新诺明、庆大霉素、卡那霉素、青霉素完全耐药。表明副猪嗜血杆菌病在河南省依然存在,并且不同地区菌株对常用药物的敏感性各不相同,应当引起养猪场重视。

猪源气单胞菌分离鉴定及耐药谱检测

为调查气单胞菌在我国猪粪便中流行情况及耐药谱,2017年3~7月从河南省4个地区,共采集370份猪粪样品,通过缓冲液蛋白胨水增菌培养后,使用添加有氨苄青霉素的气单胞菌基础培养基选择培养,分离气单胞菌。可疑菌株通过形态特征、生化试验和16SrDNA序列比对进一步鉴定。微量稀释法测定分离菌株对17种抗菌药物耐药谱。结果显示,共分离到11株气单胞菌,分离率为2.97%,其中豚鼠气单胞菌5株(占45.45%),杀鲑气单胞菌2株(占18.18%),中间气单胞菌、嗜水气单胞菌、水生气单胞菌和贝斯特润气单胞菌各1株(各占9.09%);阿莫西林/克拉维酸菌耐药率为100%,磺胺甲恶唑、氟苯尼考耐药率81.82%,阿米卡星、美罗培南敏感率均为100%,除了其中1株气单胞菌,其他菌株对头孢噻呋、头孢曲松、庆大霉素、强力霉素、磷霉素、恩诺沙星均敏感,各菌株均呈多重耐药性。表明我国健康猪粪便中携带气单胞菌,如果造成水源或者食物污染,可能有引起人类或者动物感染的风险,应引起重视。

应用型本科兽医传染病学实验实训课程教学设计

应用型本科兽医传染病学实验实训课程是兽医传染病学课程教学的重要组成部分,是动物医学专业的主要实践环节之一。该文就应用型本科兽医传染病学实验实训课程教学设计的理念与依据、内容选取、组织与实施、考核进行研究与探索,并在2013级、2014级、2015级动物医学本科生中应用,取得较好的效果。

一株致多发性浆膜炎猪源肠外E.coli的分离与鉴定

无菌采集多发性浆膜炎病猪的心血、肝脏,进行细菌分离培养,并对分离菌株进行染色镜检、生化试验、PCR鉴定、小鼠致病性试验和药敏试验。结果显示,分离菌株为肠外致病性大肠杆菌;分离菌株对庆大霉素、恩诺沙星、强力霉素、氨苄西林、磺胺类药物、头孢噻肟等均耐药,对阿米卡星、多粘菌素、美罗培南、亚胺培南敏感。本研究为致多发性浆膜炎的猪大肠杆菌病的诊断与防治提供了参考依据。

导师制对应用型专业人才培养的实践与探索——以河南牧业经济学院部分专业为例

本科生导师制;聘任有丰富经验的教师;在师生双向选择的前提下对学生进行思想引导、生活指导、心理疏导、专业技能训练辅导、科研论文指导等的一种教育模式.本文就河南牧业经济学院动物医学专业传染病课题组在导师制实行背景、师生互选、培养方式与过程管理、实践技能训练辅导和科研论文指导进行了研究与探索;并在2013级、 2014级本科生中应用;结果表明;实行导师制对预防兽医领域人才培养质量具有促进作用.

猪源杀鲑气单胞菌分离鉴定及毒力因子检测

为了确定河南省某猪场导致保育仔猪死亡的病原菌,从病死猪的肺脏、肝脏和脾脏分离得到一株优势菌。结果显示,经16S rDNA测序确定该优势菌为杀鲑气单胞菌;动物致病试验显示,分离菌株对小鼠具有致病性;药敏试验显示,该分离菌对磺胺异噁唑、四环素、土霉素、阿莫西林/克拉维酸、卡那霉素、氨苄西林等耐药;毒力基因PCR检测显示,act、ast、fla、lipase毒力基因为阳性,alt、elastase为阴性。本研究首次从发病猪体内分离到杀鲑气单胞菌,并为该条件致病菌的诊疗提供参考依据。