河南省2013—2015年病毒性腹泻哨点医院监测结果与分析

目的 分析2013-2015年河南省监测哨点5岁以下腹泻儿童轮状病毒（HRV）、人感染杯状病毒（HuCV）、人感染星状病毒（HAtV）及肠道腺病毒（EAdV）的感染状况。方法 采集4个哨点医院腹泻儿童住院病例粪便样本880份，ELISA法检测A组HRV并进行G/P基因分型；二步法多重RT-PCR检测B/C组HRV、HuCV和HAtV，单重PCR检测EAdV；对阳性病例进行流行病学统计分析。结果 共检出阳性样本594份（含混合感染样本24份）：HRV 370份，阳性率42.0%，男性感染率高于女性，农村高于城市，小年龄组高于大年龄组；HuCV 162份，阳性率18.4%；HAtV 69份，阳性率7.8%；EAdV 17份，阳性率1.9%，3种病毒的城市总阳性率高于农村。A组HRV存在以G9P［8］为主的多种型别，秋季和春季有两个显著高峰；HuCV以诺如Ⅱ型为主，存在春季感染高峰。阳性病例以0-12月龄（HRV）和3-5岁（HuCV）为主；临床存在不同程度的发热、腹泻、呕吐等症状，性别及地区分布存在病原学差异。结论 河南省监测哨点5岁以下患儿中存在较高的腹泻病毒感染率，不同感染类别呈现不同的流行病学及临床特点。

发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒核蛋白的原核表达与鉴定

目的:构建发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)核蛋白(NP)基因的原核表达载体,获得纯化并具有抗原性的重组表达蛋白。方法:提取病毒RNA,逆转录为cDNA后PCR扩增得到目的片段;通过连接pMD18-T构建克隆载体,测序正确后连接至原核表达载体pMAL-c2x中,转化大肠杆菌JM109,IPTG诱导表达、纯化MBP-NP融合蛋白。采用SDS-PAGE、Western blot对融合蛋白进行分析;建立间接ELISA方法对SFTSV患者血清NP抗体进行检测。结果:成功构建了NP基因的原核表达载体pMAL-c2x-NP,通过优化表达条件获得了纯化的带MBP标签的融合蛋白,经免疫印迹杂交证实重组蛋白具有抗原性。用建立的ELISA方法检测96例SFTSV患者血清,阳性率为40.6%;实时荧光定量RT-PCR方法阳性率为55.2%,两者符合率为77.1%(Kappa=0.550,P<0.001)。结论:成功构建了SFTSV NP基因的原核表达系统,诱导表达了具有抗原性的MBP-NP融合蛋白,为进一步研发SFTSV的ELISA诊断试剂盒奠定了基础。