高尔基体蛋白GP73和Ki-67在胆囊癌中的表达及临床意义

目的:检测高尔基体蛋白GP73和Ki-67在胆囊癌中的表达,探讨二者与胆囊癌的增殖、侵袭及预后的关系。方法:采用免疫组化SP法检测手术切除胆囊癌58例,胆囊腺瘤15例,胆囊息肉15例标本中GP73和Ki-67的表达情况。结果:胆囊癌组织中GP73和Ki-67的表达量(72.4%,67.24%)高于胆囊腺瘤(40.0%,26.7%)及胆囊息肉(13.3%,25.0%),差异有统计学意义(P<0.05)。GP73的阳性表达与胆囊癌的分化程度、Nevin分期及淋巴结转移相关(P<0.05),Ki-67的阳性表达与胆囊癌的分化程度、Nevin分期相关(P<0.05)。二者在胆囊癌组织中的阳性表达呈正相关(r=0.473,P=0.000)。GP73和Ki-67表达阴性的患者术后生活期高于表达阳性的患者。结论:GP73和Ki-67的阳性表达与胆囊癌的增殖、浸润相关,联合检测GP73和Ki-67有助于判断胆囊癌进展及预后。

骨桥蛋白诱导人胆囊癌细胞发生上皮-间充质转化促进转移复发

目的 探讨在人胆囊癌中骨桥蛋白（OPN）的临床意义及其促进转移复发的机制.方法 利用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）技术分析OPN在15例胆囊癌及其对照组织中基因水平的表达;在人胆囊癌细胞株中通过细胞增殖、侵袭等功能实验分析OPN诱导胆囊癌细胞上皮-间充质转化（EMT）促进转移复发的具体机制.结果 OPN在人胆囊癌中较胆囊炎组织表达上调（P＜0.01）.克隆形成实验结果显示pWPI-OPN转染组细胞克隆形成数为（59.9±10.3）个,显著高于对照组的（23.7±9.2）个,差异有统计学意义（P＜0.05）.在体外实验显示慢病毒转染的OPN高表达胆囊癌细胞株GBC-SD发生EMT,其表现为间质化表型神经钙黏素（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）上调和上皮化表型上皮钙黏素（E-cadherin）、紧密连接蛋白（ZO-1）的表达下调.同时,它能促进胆囊癌细胞运动和侵袭,过表达OPN组及对照组发生迁移的细胞数分别为[（369.3±23.4）、（84.7±18.7）个,P＜0.01].结论 OPN在胆囊癌组织中高表达与其进展有着直接的联系,其具体机制可能是通过诱导EMT促进胆囊癌的转移复发.

高尔基体膜蛋白Ⅱ在肝细胞肝癌转移、复发和上皮-间充质转化的相关机制

目的探讨高尔基体膜蛋白Ⅱ（GOLPH2）促进人肝细胞肝癌（HCC）细胞上皮-间充质转化（EMT）转移复发的机制。方法利用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测8种肝癌细胞株中C01，PH2的表达，选择其中高表达GOLPH2的MHCC．97H肝癌细胞利用慢病毒载体介导的RNA干扰GOLPH2的表达，观察侵袭、转移能力及EMT相关生物学特性是否因GOLPH2表达水平改变而发乍变化。结果RT—PCR结果显示GOLPH2的表达在HCC细胞株中随着恶性程度的增加而明显上升。在体外实验显示GOLPH2-RNA干扰（RNAi）转染组细胞克隆形成数（17．8±7．5）个显著低于对照组（41．7±5．3）个（P〈0．05）。转染组及对照组发生迁移的细胞数分别为（27．84-11．6）个比（278．2±23．4）个（P〈0．01）。转染组的迁移和侵袭能力明显减弱。同时转染组细胞间质表型N-钙黏蛋白（N—cadherin）和波形蛋白（Vimentin）下调而上皮表型E-钙黏蛋白（E—cadherin）、紧密连接蛋门-1（ZO-1）的表达上调（P〈0．01）。结论在HCC细胞中GLOPH2可通过调节EMT进而调控肝癌细胞侵袭转移。

肾上腺髓质素诱导上皮-间充质化促进胆囊癌细胞侵袭转移

目的 探讨在人胆囊癌中肾上腺髓质素（ADM）诱导上皮-间充质转化（EMT）影响胆囊癌细胞侵袭迁移能力及其相关的分子机制.方法 利用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）技术分析ADM在25例胆囊癌及其对照组织中基因水平的表达;在人胆囊癌细胞株中进行细胞增殖、侵袭等功能实验,并分析ADM过表达后细胞上皮间质表型的变化.结果 ADM在人胆囊癌中较胆囊炎组织表达上调（P＜0.01）.克隆形成实验结果示pWPI-ADM转染组细胞克隆形成数（57.1±8.5）个显著高于对照组（27.7±8.3）个,差异有统计学意义（P＜0.05）.它能促进胆囊癌细胞迁移,过表达ADM组迁移能力明显高于对照组.在体外实验显示慢病毒转染的ADM高表达胆囊癌细胞株GBC-SD发生EMT,其表现为间质化表型神经钙黏素（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）上调和上皮化表型上皮钙黏素（E-cadherin）、紧密连接蛋白（ZO-1）的表达下调.结论 ADM在胆囊癌组织中高表达与其进展有直接联系,其具体机制可能是通过诱导EMT促进胆囊癌的转移复发.