足底内侧皮瓣修复足底恶性肿瘤术后皮肤软组织缺损20例

目的探讨足底内侧皮瓣转移修复足底恶性肿瘤切除后皮肤软组织缺损的可行性和临床效果。方法2015年6月至2016年12月，应用足底内侧皮瓣转移修复足底恶性肿瘤切除后的皮肤缺损20例，其中顺行皮瓣修复足跟部12例，逆行皮瓣修复前足底8例，皮肤缺损面积3.0 cm×4.0 cm^5.0 cm×7.0 cm，皮瓣切取面积3.5 cm×4.5 cm^6.0 cm×7.5 cm。肿瘤类型包括恶性黑色素肿瘤16例，透明细胞肉瘤2例，腺泡状软组织肉瘤1例，血管外皮瘤1例。结果20例皮瓣全部成活，其中2例边缘坏死，经换药后痊愈。随访3~20个月，所有病例肿瘤均未复发，4例出现肺部转移，仍带瘤生存。皮瓣外观、质地良好，未出现水泡及溃烂，穿鞋袜舒适，步态正常，顺行皮瓣浅感觉正常，逆行皮瓣保护性浅感觉恢复，两点辨别觉10~15 mm。结论应用足底内侧皮瓣转移修复足底恶性肿瘤切除后的皮肤软组织缺损效果优良，操作相对简单，且效果良好，值得推广。

长链非编码RNA MALAT1对滑膜肉瘤细胞增殖及侵袭的影响及其机制

目的探讨长链非编码RNA MALAT1对滑膜肉瘤细胞增殖及侵袭的影响并探讨其机制。方法体外培养人滑膜肉瘤细胞系SW982,对其处理并分为对照组、MALAT1敲低组及MALAT1和微小RNA(miR)-22双敲低组。使用Lipofectamine 2000试剂盒将短发卡RNA(shRNA)转染进SW982进行相应分子的敲低,并使用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检MALAT1和miR-22的表达水平。使用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各处理条件对细胞增殖的影响。使用Transwell法检测在不同处理情况下细胞侵袭性的改变,两组间均数比较采用t检验。结果本实验中所选用的3个shRNA(shMALAT1_#1、shMALAT1_#2、shMALAT1_#3)与对照组比较均能有效降低SW982中MALAT1的表达(对照组比shMALAT1_#1为1.000±0.015比0.253±0.009,t=8.360,P<0.01;对照组比shMALAT1_#2为1.000±0.015比0.39±0.003,t=7.747,P<0.01;对照组比shMALAT1_#3为1.000±0.015比0.227±0.004,t=9.735,P<0.01)。MALAT1敲低组与对照组比较SW982细胞的增殖明显减慢(对照组比shMALAT1_#1为1.900±0.130比0.750±0.015,t=5.229,P<0.01;对照组比shMALAT1_#2为1.900±0.130比0.910±0.002),t=4.718,P<0.01;对照组比shMALAT1_#3为1.900±0.130比1.070±0.040,t=3.484,P<0.01)。MALAT1敲低组细胞中miR-22的表达水平较对照组明显升高(对照组比shMALAT1_#1为1.000±0.070比2.800±0.048,t=-9.179,P<0.01;对照组比shMALAT1_#2为1.000±0.070比2.300±0.050,t=-6.727,P<0.01;对照组比shMALAT1_#3为1.000±0.070比2.600±0.040,t=-8.342,P<0.01)。MALAT1和miR-22双敲低组与MALAT1敲低组比较细胞增殖能力明显增加(1.70±0.05比0.78±0.02,t=5.947,P<0.01)。Transwell结果显示与对照组比较,MALAT1敲低组SW982的细胞穿膜数量显著降低[对照组比MALAT1敲低组为(62.51±7.34)个/视野比(32.37±5.39)个/视野,t=8.981,P<0.01];MALAT1和miR-22双敲低组与MALAT1敲低组比较细胞穿膜数量显著增多[双敲低组比MALAT1敲低组为(57.43±8.54)个/视野比(28.64±5.97)个/视野,t=9.454,P<0.01]。结论MALAT1通过负向调控miR-22可促进滑膜肉瘤细胞系SW982的细胞增殖和侵袭。

神经穿透素1对滑膜肉瘤细胞侵袭性的影响及其机制

目的探讨神经穿透素1(NPTX1)对滑膜肉瘤细胞侵袭性的影响并探索其机制。方法使用公共数据库资源(GEO)下载滑膜肉瘤转录组数据及相关临床信息(GSE40025),根据转移灶的有无将患者分为肺转移组及无转移组两组。使用R语言Limma数据包分析两组间差异表达基因,并使用Student’s T检验分析两组间NPTX1的表达。本研究使用KM plot数据库网站分析多个恶性肿瘤中NPTX1表达水平与临床预后的关系并绘制KM曲线。使用shRNA在SW982细胞系建立稳定敲低NPTX1的模型并用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)验证敲低效率。细胞中靶蛋白的表达利用蛋白质印迹法(Western blot)进行检测。在体外培养的SW982细胞中,根据不同的处理方法将细胞分为对照组、NPTX1敲低组及NPTX1敲低加基质金属蛋白酶(MMP)-2过表达组,将3组细胞通过Transwell法检测不同处理条件下SW982细胞侵袭能力的改变,两组间均数比较采用t检验。结果生信分析结果表明NPTX1存在于肺转移组及无转移组两组转录组差异表达基因列表中,且其在肺转移组呈显著性高表达(4.373±0.546比6.771±0.666,t=2.784,P<0.01)。KM plot数据库分析结果显示NPTX1的高表达在多个恶性肿瘤中(包括胰腺癌、肉瘤、肾癌及膀胱癌)提示预后不良。本研究使用的shRNA可显著敲低SW982细胞中NPTX1的表达(对照组比shNPTX1_#1为1.000±0.019比0.270±0.001,t=9.000,P<0.01;对照组比shNPTX1_#2为1.000±0.019比0.340±0.003,t=7.858,P<0.01;对照组比shNPTX1_#3为1.000±0.019比0.320±0.003,t=7.979,P<0.01)且敲低NPTX1后细胞中MMP-2的蛋白水平明显下降。Transwell结果显示NPTX1敲低组细胞穿膜数量明显低于对照组(34.16±5.14比56.43±4.26,t=8.345,P<0.01),而NPTX1敲低加MMP2过表达组细胞侵袭性多于NPTX1敲低组(64.31±6.25比45.83±3.93,t=6.592,P<0.01)。结论NPTX1通过上调MMP-2增强滑膜肉瘤细胞的侵袭能力。