过表达CaCP1提高转基因烟草对盐胁迫的敏感性

半胱氨酸蛋白酶在植物调节盐胁迫应答方面起重要作用,克隆CaCP1,研究其抗盐性功能,为辣椒抗盐品种的培育提供参考。克隆CaCP1的启动子,根据CaCP1启动子中盐胁迫相关的作用元件,构建不同长度启动子片段的重组载体,进行烟草瞬时转化。通过对CaCP1超表达烟草转基因T3代株系进行盐处理,观察其表观症状,测定生理指标,并进行胁迫相关基因的表达分析。结果表明,盐胁迫下,CaCP1启动子-410--1 bp区段的GUS活性最强;CaCP1转基因植株叶片提前萎蔫和黄化,其中叶绿素含量和相对含水量均显著低于野生型,MDA和电解质渗漏率显著高于野生型,ROS清除酶CAT和SOD活性降低,POD活性升高;与野生型相比,转基因植株中ROS清除基因(NtSOD、NtPOD、NtCAT和NtAPX)和盐胁迫相关基因(NtLEA5、NtNHX1、NtP5CS1和NtSOS1)的表达量显著降低。CaCP1作为负调控因子介导植物对盐胁迫的防御反应。