元胡止痛口服液药材、中间体及制剂的定量指纹图谱方法研究

建立了适用于元胡止痛口服液原料药材、中间体及制剂中若干生物碱类成分的定量指纹图谱方法。采用DIKMA Diamonsil Plus C18-A色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.04%乙酸铵溶液(冰醋酸调至pH4.0,A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,在280 nm下进行检测。指纹图谱中含共有峰7个,其精密度、重复性、稳定性的相对标准偏差(RSD)均小于5.0%。对延胡索乙素、去氢延胡索甲素进行定量分析,其分别在6.15~123μg/mL和10.15~203μg/mL范围内线性关系良好,相关系数(r^(2))> 0.999,进样精密度、方法重复性的RSD均小于5.0%,供试品溶液在24 h内稳定。延胡索乙素、去氢延胡索甲素在低、中、高3个加标水平下的平均回收率为89.6%~107%,RSD小于3.0%。所建立的分析方法稳定、准确、可靠,能够对药材、中间体及制剂中的中等极性成分进行检测,可用于考察工业生产中元胡成分的量值传递情况,从而为改进元胡止痛口服液制药过程控制水平提供技术支持。

黄芩提取物制备过程的关键工段辨识研究

目的辨识黄芩提取物制备工艺的关键工段。方法首先对液相色谱分析方法进行了方法学验证,然后采用多批次黄芩药材进行水煎、酸沉、碱溶、乙醇洗涤和干燥等工艺制备黄芩提取物。将制备工艺分为8个工段,分别检测了药材、中间体和黄芩提取物中总固体、黄芩苷、汉黄芩苷和黄芩素的含量,并根据结果计算总固体产量、黄酮产量和纯度。计算了过程中间体和黄芩提取物的组成相似度变化情况,提出采用一致性变化量(TVC)作为指标定量表征制药工艺对批次间一致性影响。结果欧氏距离是较灵敏的相似度指标。根据TVC和相似度变化大小确定了关键工段为工段1、工段2和工段4,其对应的工艺包括水煎、酸沉和乙醇洗涤等。结论综合考虑相似度变化和TVC可以用于辨识中成药生产关键工段,该方法适合用于分析流程较长的中成药生产工艺。

双黄连注射液不良反应样品筛查方法研究

目的:建立双黄连注射液不良反应样品筛查方法,为产品质量控制、临床安全用药提供参考。方法:采用鞣质检测和细胞响应谱法对双黄连注射液正常与不良反应样品进行筛查,以改良干酪素法进行鞣质检测,另选取肥大细胞RBL-2H3作为模式生物,使用xCELLigence实时细胞分析系统对双黄连注射液诱导的RBL-2H3脱颗粒效应进行了实时监测。结果:鞣质检测无法有效区分正常样品与不良反应的样品,细胞响应谱法可准确分辨不良反应样品。结论:基于肥大细胞脱颗粒效应的细胞响应谱方法操作简便、高通量、准确可靠,为双黄连注射液质量控制和临床安全用药提供参考。

闪式提取法提取枣果皮中多酚的工艺研究

利用闪式提取法提取枣果皮中的多酚。考察了乙醇体积分数、料液比、提取时间和提取次数对枣果皮中多酚得率的影响。根据考察结果,运用正交实验方法对影响多酚得率的条件进行优化,然后进行验证实验。结果表明,最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数为60%,料液比1∶35(g/mL),提取时间为2min,提取3次;在此条件下,多酚得率达到13.62mg/g。该工艺与超声波提取相比,简单、迅速、得率高,可用于枣果皮中多酚的提取。

元胡止痛口服液对原发性痛经的镇痛作用及机制研究

[目的]观察元胡止痛口服液对原发性痛经的治疗作用并探讨其作用机制,为其在临床治疗原发性痛经提供实验依据。[方法]采用缩宫素诱导原发性痛经大鼠模型,考察不同剂量元胡止痛口服液对动物模型扭体反应的影响,并检测大鼠血浆雌二醇(E2)、孕酮(Prog)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)与谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)水平,以及子宫组织前列腺素F2α(PGF2α)、前列腺素E2(PGE2)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-ketoPGF1α)、钙离子(Ca^2+)与一氧化氮(NO)含量。[结果]元胡止痛口服液可显著减少痛经大鼠模型的扭体次数(P<0.05),降低扭体发生率。与模型组大鼠相比,元胡止痛口服液治疗组大鼠血浆MDA水平显著降低(P<0.05),子宫组织PGF2α水平与Ca^2+含量显著下调(P<0.05),且子宫6-keto-PGF1α水平显著升高(P<0.05)。[结论]元胡止痛口服液对原发性痛经大鼠模型具有显著的镇痛作用,其作用机制可能与调节血浆MDA水平及子宫组织内PGF2α、6-keto-PGF1α、Ca^2+含量相关。

Zn(Ⅱ)-5-Br-PADAP-CPB体系分光光度法测定锌

研究了Zn(Ⅱ)-5-Br-PADAP-CPB体系分光光度法。在阳离子表面活性剂溴化十六烷基吡啶(CPB)存在下,在pH=5.60的NaAc-HAc缓冲介质中,锌(Ⅱ)与2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-(二已氨基)苯酚(5-Br-PADAP)形成稳定的橘红色络合物,其最大吸收波长为557 nm,表观摩尔吸光系数ε=1.14×105L.mol-.1cm-1,锌含量在0～0.56 mg/L范围内符合朗伯比尔定律。加入掩蔽剂后用该方法测定茶多酚锌配合物(TP-Zn)中的锌,结果满意。

一测多评法测定双黄连注射液中4种成份的含量

目的:建立一测多评法(QAMS)同时测定双黄连注射液中绿原酸、咖啡酸、黄芩苷、连翘苷4种成份的含量。方法:采用YMC-C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),以乙腈-0.2%甲酸为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,柱温35℃,检测波长为324nm(0~13min检测绿原酸、咖啡酸)和280nm(13~35min检测黄芩苷、连翘苷)。以连翘苷为内标参照物,计算绿原酸、咖啡酸、黄芩苷的相对校正因子f_(s/i),建立QAMS并测定各成份的含量。与外标法(EMS)测定结果比较,验证QAMS的准确性和可行性。结果:绿原酸、咖啡酸、黄芩苷的f_(s/i)分别为0.2169、0.1260、0.1856,在不同实验条件下重现性良好;QAMS与EMS测定结果无明显差异。结论:本研究所建立的QAMS可用于双黄连注射液的质量控制。

案例教学在工程硕士教学中的应用

针对当前我国工程硕士培养的现状和存在问题,结合国家工程硕士培养目标和社会需求,在工程硕士教学过程中引入案例教学,并对案例教学的具体实施进行详细阐述.同时指出,要不断精选典型案例,加快我国教学案例库的建设步伐.

元胡止痛口服液的质量标准提升

目的:提升元胡止痛口服液的质量标准,以加强该口服液的质量控制。方法:采用薄层色谱法(TLC)对元胡止痛口服液中延胡索、白芷药材进行定性鉴别,以延胡索乙素、延胡索甲素对照品和延胡索对照药材为参照,以环己烷-三氯甲烷-甲醇(5∶3∶0.5)为展开剂,使用GF254玻璃薄层板在紫外光灯(365 nm)下鉴别延胡索;以石油醚(60~90℃)-乙醚-甲酸(10∶10∶1)为展开剂,使用硅胶G薄层色谱板置紫外光灯(305 nm)下鉴别白芷。运用高效液相色谱法(HPLC),Waters XSelect HSS T3色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.1%冰乙酸溶液(三乙胺调pH 6.1)(B)梯度洗脱(0~10 min,20%~30%A;10~25 min,30%~40%A;25~40 min,40%~50%A;40~60 min,50%~60%A),检测波长280 nm,建立元胡止痛口服液的中药指纹图谱,并测定延胡索甲素和延胡索乙素的含量。结果:在薄层色谱图中,元胡止痛口服液与对照品、对照药材对应斑点清晰、分离度好、专属性强。10批元胡止痛口服液样品中共标定了12个共有峰,并指认出盐酸小檗碱、去氢紫堇碱、海罂粟碱、延胡索乙素、延胡索甲素色谱峰。10批样本与对照指纹图谱的相似度均>0.90;含量测定结果显示,延胡索甲素和延胡索乙素质量浓度分别在0.0386~0.1930、0.0340~0.1700 g·L^(-1)与峰面积呈良好线性关系,方法学考察合格,测得10批元胡止痛口服液中延胡索甲素、延胡索乙素质量分数分别为0.0775~0.1429、0.1261~0.1782 g·L^(-1)。结论:该研究优化了元胡止痛口服液的TLC鉴定条件,建立了指纹图谱并对其中延胡索甲素和延胡索乙素进行定量,方法简便、专属性强、重复性好,可用于提升元胡止痛口服液的质量控制标准。

基于HPLC-CAD的元胡止痛口服液糖类成分定量指纹图谱研究

目的采用高效液相色谱-电喷雾检测器(HPLC-CAD)检测技术建立元胡止痛口服液中糖类成分的定量指纹图谱分析方法。方法采用NH2P-504E(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以水(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,柱温为30℃,进样量为10μL,流速为0.6 mL·min^(-1),CAD雾化温度为35℃,采样频率10 Hz,幂函数1.0。结果定量成分在定量范围内线性关系良好,R^(2)>0.999,仪器精密度、中间精密度、方法重复性的RSD均<3%,供试品溶液在24 h内稳定,低、中、高3个浓度水平的平均加样回收率为97.15%~101.13%。指纹图谱中含共有峰5个,其仪器精密度、重复性、稳定性的RSD值均<4%。结论建立的分析方法稳定、准确、重复性好,能够检测制剂中的糖类辅料。

高效液相色谱法同时测定肝维康片中8个活性成分的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定肝维康片中代表性活性成分马鞭草苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、连翘酯苷A、连翘苷、甘草苷、甘草酸铵和毛蕊异黄酮的含量。方法采用Agilent ZOBAX SB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%甲酸水-乙腈梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为240 nm(马鞭草苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、毛蕊异黄酮和甘草酸铵),275 nm(甘草苷和连翘苷)和310 nm(连翘酯苷A),柱温30℃。结果8个目标成分分别在相应的范围内呈良好的线性关系;马鞭草苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、连翘酯苷A、连翘苷、甘草苷、甘草酸铵和毛蕊异黄酮的加样回收率在97.5%~104.8%之间,RSD值小于3.8%。结论该方法简便、准确、专属性强、重复性好,为肝维康片中8个成分的含量同时测定研究提供了方法参考。

小蓟中黄酮类化学成分的研究

综合运用硅胶、MCI、Sephadex LH-20等柱色谱及高效液相色谱技术对小蓟的乙酸乙酯部位进行分离纯化,从中分离得到黄酮类化合物15个,分别鉴定为:4',5,6-三羟基-7-甲氧基黄酮(1),4',5-二羟基-7,8-二甲氧基黄酮(2),sorbifolin-6-O-β-glucopyranoside(3),山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(4),山柰酚(5),槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-α-L-鼠李糖苷(6),myricetin(7),myricetin-3-O-β-D-glucoside(8),5,7-二羟基-3',4'-二甲氧基黄酮(9),3',4',5-三羟基-3,7-二甲氧基黄酮(10),3',3,4',5-四羟基-7-甲氧基黄酮(11),3'-羟基-4',5,7-三甲氧基黄酮(12),7-羟基-3',4',5-三甲氧基黄酮(13),4',5-二羟基-2',3',7,8-四甲氧基黄酮(14),5-羟基-2',3',7,8-四甲氧基黄酮(15)。以上所有化合物均为首次从本植物中分离得到。该实验运用PTP1B抑制剂高通量筛选模型对化合物(1~15)进行活性筛选,结果表明化合物2,12和14具有较强的PTP1B抑制活性,IC50分别为2.54,1.85,2.11μmol·L^(-1)。