检验医学实习生入科教育及带教的实践研究

目的对检验医学实习生进行入科教育及带教研究,探讨更加完善的入科教育及带教方法。方法随机选取3年内该院检验专业实习生3批次618人作为研究对象,将其按5类生源随机分为对照组、实践A组、实践B组,分别对其进行相应的入科教育及带教实习,再对其进行考核,对考核结果进行对比分析。结果实践A、B组6项评分除辅导员管理调查低于对照组外,其余5项均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。实践A组老师与实习生的双相评估得分及满意度调查问卷得分均明显高于实践B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论合理的实习生入科教育及带教实践方法,可有效提高实习生的综合素质。

高分辨率熔解曲线检测背景下结核分枝杆菌链霉素和乙胺丁醇耐药模式分析

目的研究洛阳市和县区结核分枝杆菌链霉素与乙胺丁醇耐药模式,指导临床用药,补充当地耐药结核的流行病学数据。方法该研究共纳入2941例高分辨率熔解曲线(HRM)的阳性结果,评估与链霉素和乙胺丁醇耐药相关的危险因素。结果在被纳入的2941例HRM阳性病例中,18.4%对链霉素耐药,8.0%对乙胺丁醇耐药,男性对链霉素和乙胺丁醇耐药率均高于女性(19.0%vs 16.9%,P=0.129;8.0%vs 7.9%,P=0.987),城市群体高于乡村(21.3%vs 16.6%,P=0.002;9.8%vs 6.9%,P=0.004),复诊群体远高于初诊患者(25.8%vs 17.3%,P<0.001;12.1%vs 7.4%,P=0.002),年龄<51岁群体链霉素耐药率高于年龄>50岁的群体(21.1%vs 16.1%,P<0.001)。按年龄分层,链霉素及乙胺丁醇最高耐药率,男性分别出现在31~35岁和56~60岁,而女性则分别出现在21~25岁及56~60岁。多变量模型中,在调整了涂片结果和年份检测后,既往治疗史、年龄<51岁、城镇地区与链霉素和乙胺丁醇耐药性呈正相关。结论该地区男性、既往治疗史、年龄<51岁和城镇居住群体是链霉素与乙胺丁醇耐药结核的重点监测目标。

鬼臼毒素类药物的生物合成及药理作用的研究现状

目的本文总结了鬼臼毒素类药物生物合成及其药理作用的研究进展,以期为该类药物的广泛应用提供参考。方法归纳了鬼臼毒素类药物的植物来源、化学结构、作用机理及合成途径,探讨了这些药物的药理、毒理特点和机制,并梳理了鬼臼毒素药物新剂型的研究进展。结果鬼臼毒素及其衍生物是中药八角莲、山荷叶及桃儿七等鬼臼属植物中的重要化学成分。该类药物天然来源较少,可通过化学及生物合成途径进行人工生产。鬼臼毒素类药物具有抗炎、抗肿瘤和抗病毒等药理作用,但其毒性作用对此类药物的临床使用有着限制,可通过运载体运送药物以达到减毒增效的目的,为此类药物的临床使用提供新途径。结论鬼臼毒素类药物具有广泛临床应用前景,未来将在抗炎、抗肿瘤和抗病毒等领域得到更多的研究和应用。

SETDB1在乳腺癌中的表达及对癌细胞株增殖和迁移能力的影响

目的研究组蛋白甲基化酶SETDB1在乳腺癌中的表达情况及对其癌细胞株增殖和迁移能力的影响。方法采用RT-PCR、Western blot和IHC方法检测38例乳腺癌与癌旁组织及癌细胞株中SETDB1的表达水平;采用稳定转染方法筛选出沉默SETDB1基因的克隆细胞株,采用CCK-8、软琼脂克隆形成及流式细胞术检测沉默SETDB1后对肿瘤细胞增殖能力的影响;采用Transwell方法检测沉默后对肿瘤细胞迁移能力的影响。结果 38例乳腺癌与癌旁组织中23例癌组织、13例癌旁组织阳性表达(P<0.05),SETDB1的mRNA水平相对表达量分别为(1.20±0.08)、(0.96±0.05)(t=2.44,P<0.05);沉默T47D中SETDB1基因后,GFP、sh2、sh4株形成克隆个数分别是(70.00±2.00)、(42.67±1.53)和(13.33±1.53)个(F=834.00,P<0.001);细胞周期中sh2株出现了G0/G1期阻滞,而sh4株出现了G2/M期阻滞(P<0.01);48 h穿膜个数分别是(54.25±1.71)、(16.50±1.29)、(9.00±0.82)个(F=1344.00,P<0.001)。结论 SETDB1在乳腺癌中高表达,沉默该基因可影响癌细胞株的增殖和迁移能力,有望作为乳腺癌诊断及治疗的新靶点。

呼吸道九联检与七联检在500例患者中的检测结果分析

目的对患者同时进行呼吸道血清中病原体特异性抗体IgM检测(九联检)与鼻咽部分泌物脱落细胞病毒抗原检测(七联检),对比分析检测结果,探讨临床检测方法的合理应用及价值。方法选取呼吸道感染患者500例为研究对象,同时采用九联检与七联检对其进行检测,并将2种检测结果进行统计分析。结果2种检测方法的阳性符合率依次为腺病毒(30.8%),呼吸道合胞病毒(12.2%),甲型流感病毒(57.7%),乙型流感病毒(60.0%),副流感病毒1、2、3型(23.8%)。检测结果总符合率为36.2%。九联检的检测阳性率明显低于七联检,差异有统计学意义(P<0.05)。结论呼吸道九联检与七联检2种检测方法联合应用对提高病原体检出率具有非常重要的临床价值。

凝血功能检查对急性胰腺炎的早期诊断价值

目的对胰腺炎患者的PT、APTT、TT、FIB、D-D五项检测指标进行分析,探讨血凝五项指标对胰腺炎的诊断价值。方法采用前瞻性病例对照研究方法。选取2016年10月至2018年10月河南科技大学第一附属医院确诊为慢性胰腺炎(CP组)患者54例、轻症急性胰腺炎患者(MAP组)47例、重症急性胰腺炎患者(SAP组)62例和同期健康体检者(NC组)50例的血凝五项指标及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)和中性粒细胞CD64(CD64)4种炎性因子进行分析研究。结果①与NC相比,CP的各项结果无显著性差异。②与正常人相比,MAP血凝五项中D-二聚体检测结果明显升高(P<0.05),而SAP的各项结果均显明显升高,D-二聚体检测均值是正常人的4.5倍(P<0.01)。③在急性胰腺炎患者中,SAP血浆中D-二聚体含量是MAP的3.8倍(P<0.01)。④与NC相比,SAP组患者的4种炎性因子TNF-α、PCT、CRP和CD64水平最高,其次为MAP组和CP组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论AP时凝血、抗凝血以及纤溶系统的功能发生紊乱,急性时相炎症因子水平升高,动态监测AP尤其是SAP的血凝五项指标及TNF-α、PCT、CRP和CD64水平,有助于了解SAP患者微循环障碍情况,及早预防MODS和DIC的发生。

EGFR、p53、Ki-67、AR在乳腺癌中的表达及预后意义

目的研究EGFR、p53、Ki-67及AR在乳腺癌组织中的表达情况,分析其与乳腺癌临床病理特征之间的关系,并探讨联合检测对乳腺癌的预后价值。方法用免疫组化方法检测145例乳腺癌组织中EGFR、p53、Ki-67及AR的表达,并对手术时间为2005年8月至2009年12月的患者随访至2015年7月。结果EGFR、p53、Ki-67及AR在乳腺癌组织中的表达率依次为41.38%、72.41%、36.55%和55.86%,EGFR、Ki-67的表达与乳腺癌病理学分级及分子亚型相关(P<0.05),而与年龄、肿瘤大小及有无淋巴结转移无相关性(P>0.05);p53的表达与年龄、肿瘤大小、有无淋巴结转移、乳腺癌病理学分级及分子分型间差异均无统计学意义(P>0.05);AR表达除了与年龄外(P>0.05),与其余4种临床病理特征均有相关性(P<0.05);EGFR可作为乳腺癌的独立预后危险因素(P<0.05);而EGFR、p53、Ki-67及AR的表达对肿瘤的累计生存率无统计学意义(P>0.05)。结论EGFR、Ki-67、p53和AR在乳腺癌中的联合检测可更清楚地了解肿瘤的生物学行为,对其诊治及预后评估有重要意义。

GRP78-ATF6-CHOP通路相关分子在葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎中的表达

目的:探讨GRP78-ATF6-CHOP通路在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎中的表达及意义。方法:选取6-8周龄的健康清洁级129S1/SvJ种系小鼠,随机分为DSS组和对照组(n=8),DSS组饮用30 g/L DSS溶液,对照组饮用无菌蒸馏水;于第6天处死小鼠。通过疾病活动指数评分(DAI)、结肠长度测定和HE染色等方法评估小鼠肠道炎症程度,采用qRT-PCR检测小鼠结肠组织中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α以及内质网应激相关分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、IRE1α、PERK、活化转录因子6(ATF6)和CHOP mRNA的表达水平,采用免疫组化法和蛋白印迹法检测小鼠结肠组织中GRP78、ATF6和CHOP蛋白的表达。结果:对照组无肠炎表现,DSS组有严重的肠炎表现。与对照组相比,DSS组结肠组织中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-αGRP78、ATF6和CHOP mRNA表达升高(P均<0.001.。免疫组化显示GRP78主要表达于结肠上皮细胞的胞质及胞膜,ATF6主要表达于结肠上皮细胞的胞质及胞核,CHOP主要表达于结肠上皮细胞的胞核中;DSS组GRP78、ATF6和CHOP蛋白表达水平高于对照组(P均<0.001.。结论:GRP78-ATF6-CHOP通路相关分子可能在DSS诱导的小鼠结肠炎的发生、发展中起重要作用。

IRE1α和IRE1β在DSS诱导的小鼠慢性结肠炎中的表达及意义

目的探讨肌醇需求酶1(IRE1)α和IRE1β在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠慢性结肠炎中的表达及意义。方法选择8~10周龄的C57BL/6雌性小鼠随机分为两组:对照组10只,正常饮水;慢性炎症组10只,先给予1.0%DSS自由饮用7 d,然后正常饮水14 d如此作为一个周期,循环3个周期建立小鼠慢性结肠炎模型。通过疾病活动指数(DAI)评分、结肠长度测定和HE染色等方法评估肠道炎症程度。采用实时定量PCR技术检测小鼠结肠组织中炎症因子、内质网应激因子IRE1α、IRE1β、非剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1u)、剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)和黏蛋白(MUC)2 mRNA表达,免疫组织化学方法检测IRE1α、IRE1β和MUC2表达。结果对照组小鼠无肠炎表现,而慢性炎症组在3个周期末结肠出现炎症表现。实时定量PCR结果显示白介素(IL)-6、IL-8和肿瘤坏死因子(TNF)-αmRNA在慢性炎症组高于对照组(P<0.05);XBP1s和IRE1αmRNA在两组表达无明显差异;XBP1u mRNA在慢性炎症组表达低于对照组(P<0.05)。IRE1β和MUC2 mRNA在慢性炎症组表达均低于对照组(P<0.05)。IRE1α蛋白主要表达于结肠上皮的刷状缘、浆细胞等细胞的胞质中,其表达量在炎症组高于对照组,IRE1β蛋白和MUC2蛋白主要表达于结肠上皮细胞胞质中,两者表达量在炎症组低于对照组(P<0.05)。结论 IRE1α可能通过对XBP1进行剪接来参与肠道炎症反应,并且IRE1α还有可能通过其他机制来调节自身的表达来参与炎症过程;IRE1β和MUC2可能与结肠上皮的功能维持有关,在肠道炎症过程中IRE1β和MUC2表达功能受到抑制而影响炎症的发生和发展。

双氧化酶2在5-羟色胺加重的小鼠结肠炎模型中的表达及作用

目的探讨5-羟色胺(5-HT)对双氧化酶2(Duox2)在小鼠结肠组织中的表达情况及其在炎症中的意义。方法选取6~8周龄的健康清洁级C57BL/6J(B6)雄性小鼠,随机分为5组(n=8):对照组自由饮用无菌蒸馏水;葡聚糖硫酸钠(DSS)(1.0%、2.5%)组自由饮用相应浓度的DSS溶液;5-HT组采用直肠灌药方式(1.0 mg/kg)给药,每3 d 1次;DSS+5-HT组同时给予1.0%DSS和5-HT。于造模第6天处死小鼠取结肠组织。通过结肠长度、疾病活动指数(DAI)评分和HE染色等方法评估肠道炎症程度,采用实时定量PCR(RT-PCR)检测小鼠结肠组织中白介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α和Duox2 mRNA表达水平,应用免疫组化检测结肠组织中Duox2蛋白的表达情况。结果对照组和5-HT组小鼠无肠炎表现;DSS(1.0%)组小鼠表现为轻度肠炎;DSS+5-HT组和DSS(2.5%)组有严重急性肠炎表现。IL-1β、IL-6和TNF-α等表达量随炎症程度加重而增加。Duox2 mRNA在5-HT组和DSS(1.0%)组表达增高(均P<0.05),在DSS+5-HT和DSS(2.5%)组表达下调(均P<0.05)。免疫组化结果显示Duox2蛋白主要表达于小鼠结肠上皮刷状缘及上皮细胞胞质中,与mRNA表达一致。结论 5-HT可能通过影响Duox2的表达在小鼠结肠炎的发生发展中发挥作用。

牙龈卟啉单胞菌促进食管癌细胞NLRX1转位激活线粒体自噬的研究

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)与食管癌细胞线粒体自噬的相关性,挖掘食管癌治疗新靶点。方法①采用Western blot法检测Pg感染对食管癌细胞线粒体UNC-51-样自噬激活激酶1(ULK1)磷酸化影响,采用免疫组化法检测食管癌组织中Pg表达和ULK1磷酸化水平的相关性;②利用Western blot、ICC、ELISA等方法检测Pg感染对食管癌细胞NOD样受体家族成员X1(NLRX1)由胞质向线粒体转位、线粒体自噬及白介素(IL)-6和活性氧(ROS)分泌水平的影响;③通过qPCR及RNAscope分别检测线粒体自噬抑制剂及ULK1抑制剂处理对C57小鼠食管组织中和食管鳞状上皮细胞中Pg定植情况的影响。结果与未处理组相比,食管癌细胞经Pg感染后,其线粒体ULK1的磷酸化水平升高(P<0.01)、NLRX1表达升高(P<0.001)且自噬增强(P<0.001)。动物实验结果表明,与对照组相比,联合干预组可抑制Pg在小鼠食管组织及食管鳞状上皮细胞中的定植(P<0.001)。结论Pg通过上调食管癌细胞线粒体ULK1磷酸化水平,从而促进NLRX1由细胞质向线粒体转位,进而诱导线粒体自噬,导致IL-6和ROS分泌减少,最终维持Pg定植。

血清生长分化因子-15对心力衰竭患者诊断价值的Meta分析

目的评价血清生长分化因子-15(GDF-15)对心力衰竭(HF)诊断的价值。方法检索PubMed、Web of Science、EMBASE等数据库收集文献,起止时间为1996年1月1日至2018年11月30日。应用QUADAS-2评价文献质量,进行敏感性和回归分析探讨异质性因素,通过Stata12.0进行统计分析。结果最终纳入8项研究,HF患者1141例。结果显示GDF-15用于诊断HF的合并敏感度为0.80[95%CI:0.75~0.85,特异度为0.83(95%CI:0.74~0.89),曲线下面积(AUC)为0.87(95%CI:0.84~0.90)。亚组分析显示,GDF-15联合NT-proBNP检测可提高对HF的诊断效能(AUC:0.94);GDF-15在亚洲人群中诊断HF效能优于欧洲人(AUC:0.91VS0.86),检测基于血浆时的效能优于血清(AUC:0.90VS0.50)。结论GDF-15检测对HF有很高的临床辅助诊断价值,且联合NT-proBNP检测有助于提高HF诊断。

行口腔颌面外科术患者术后感染病原学特征及相关因素分析

目的探讨行口腔颌面外科手术患者术后感染病原菌的特征及相关因素分析。方法选取2014年1月-2016年12月医院收治的口腔颌面外科手术患者386例为研究对象,观察患者术后感染发生情况、感染部位。分离感染患者菌株进行鉴定,分析术后感染病原菌特征及相关因素。结果 386例口腔颌面手术患者术后发生感染31例,感染率为8.03%,感染部位以呼吸道和手术切口为主;共培养分离病原菌40株,其中革兰阴性菌31株占77.50%,以铜绿假单胞菌为主;革兰阳性菌7株占17.50%,以金黄色葡萄球菌为主;真菌2株占5.00%;分离出的铜绿假单胞菌对哌拉西林和头孢唑林的耐药率较高,对环丙沙星等抗菌药物比较敏感;分离出的金黄色葡萄球菌对庆大霉素耐药率较高,对万古霉素敏感;年龄、手术时间、伤口有异物、误吸及侵入性操作是患者感染的相关因素(P<0.05),抗菌药物使用则能降低患者感染的风险。结论口腔颌面外科手术后感染发生率较高,应当针对性地给予抗菌药物,同时尽量避免可能引起术后感染的相关因素。

人外周血淋巴细胞亚群表面多重蛋白定量方法

随着流式细胞检测技术的发展,仪器检测灵敏度、精度与稳定性不断提升。藻红蛋白(phycoerythrin,PE)荧光标记蛋白的定量检测结果已得到普遍认可。越来越多的研究提示测定样品单细胞表面蛋白的定量有明确临床意义,流式蛋白定量检测的需求正在增加,但是常用的BD QuantibriteTMBeads PE荧光定量方法局限于PE定量标准品,仅能使用PE荧光抗体,无法适应目前多色流式检测的需要。介绍了在多色流式检测中使用系列抗体定量捕获微球QuantumTMSimply Cellular?微球(QSC微球)进行单细胞表面多重蛋白定量的方法。QSC微球最初设计用于细胞表面蛋白定量,但因为其定量结果不稳定且与经典方法差距巨大,无法实际应用。通过比对多种实验条件探索解释并克服QSC微球蛋白定量技术的缺陷。介绍了改进后的多色流式细胞表面蛋白定量方法并展示了新方法获得的人淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8、CD25、CD27、CD28、CD45RA、CD127和CD197蛋白的定量数据,尽管这一技术还有待优化,但其应用前景广阔,可以使多色流式获得跨平台可比较的单细胞多重蛋白表达数据,可以为单细胞多组学研究提供蛋白质指标间的量化关系数据,并且可用于自动荧光补偿计算、荧光溢漏扩散计算、抗体质量监测、多色荧光方案设计等。

利多卡因治疗重症急性胰腺炎

目的探讨利多卡因对重症急性胰腺炎(SAP)治疗作用的临床价值。方法选取2016年10月至2018年10月河南科技大学一附院肝胆胰外科收治的60例SAP患者为研究对象,按随机数字表法分为对照组(n=30)和治疗组(n=30)。对照组给予SAP常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上给予0.2%盐酸利多卡因注射液300 mg加入5%葡萄糖液500 ml中静脉滴注,连用7 d。比较两组患者治疗前和治疗3、7、14 d的血浆炎性细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-1β、IL-6]水平的变化情况,评估改良Marshall评分、视觉模拟评分法(VAS)评分的变化;观察并比较两组患者腹痛缓解时间、经口进食时间、并发症发生情况、中转手术率和住院病死率、住院时间、住院费用。结果治疗前,两组患者TNF-α、IL-1β、IL-6水平和改良Marshall评分、VAS评分比较无统计学差异(P>0.05)。治疗3、7、14 d,两组TNF-α、IL-1β、IL-6水平和改良Marshall评分、VAS评分随治疗时间延长逐渐降低(P<0.01),且治疗组均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。治疗组腹痛缓解时间、经口进食时间、住院时间、住院费用均少于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。两组中转手术、住院病死和并发症[休克、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、心功能不全、肾功能衰竭、胰腺囊肿]发生率比较无统计学差异(P>0.05)。结论早期使用利多卡因可减少早期SAP炎性细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)的过度释放,减轻早期炎症反应的程度,保护主要脏器的功能,更早缓解腹痛,促进胃肠功能的恢复,改善患者预后,且治疗过程中经济、安全、有效。