二至丸对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的防护作用及机制

目的研究二至丸对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的预防作用及潜在机制。方法雄性昆明种小鼠每天1次ig给予二至丸1.4,2.8和5.6 g·kg-1,连续14 d,末次给药8 h后,模型组和二至丸组小鼠ip给予10%CCl4溶液10 mL·kg-1,24 h后处死小鼠,计算肝和脾指数。采用生化法测定血清谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的活性及丙二醛(MDA)的含量;HE染色观察肝组织病理改变;TUNEL法观察肝细胞凋亡;免疫组化法和Western蛋白质印迹法检测内质网应激(ERS)标志性蛋白CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和葡糖调节蛋白78(GRP78)表达。结果与正常对照组相比,模型组小鼠血清中GPT和GOT活性及MDA含量显著升高(P<0.01),SOD和GPX活性显著下降(P<0.01);肝组织出现明显的炎症细胞浸润和坏死,肝指数明显增加(P<0.01),脾指数显著减小(P<0.01);CHOP和GRP78表达水平显著上调(P<0.01)。与模型组相比,二至丸各剂量组血清GPT和GOT的活性及MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01),SOD和GPX活性显著升高(P<0.05,P<0.01);HE染色结果显示,二至丸各剂量组均不同程度地减轻肝组织脂肪空泡和炎症细胞浸润;二至丸2.8和5.6 g·kg-1组小鼠肝指数显著减小,脾指数显著增加(P<0.05);TUNEL检测结果显示,二至丸各剂量组肝细胞凋亡率明显下降(P<0.05,P<0.01),并呈剂量依赖性(r=0.99,P<0.01);免疫组化及Western蛋白质印迹结果显示,二至丸1.4,2.8和5.6 g·kg-1组CHOP表达显著下降(P<0.01),并呈剂量依赖性(r=0.89,P<0.05),2.8和5.6 g·kg-1组GRP78表达显著下降(P<0.01)。结论二至丸对CCl4致小鼠急性肝损伤具有预防保护作用,其机制可能与抗氧化应激,抑制ERS,从而抑制肝细胞凋亡有关。

多柔比星-纳米肝素介孔硅载药系统对H22移植瘤小鼠的抑瘤作用及肝肾毒性

目的研究多柔比星(DOX)-肝素介孔硅载药系统(HMSN)对肝癌H22移植瘤小鼠的抗肿瘤作用及毒性反应。方法建立肝癌H22移植瘤模型,分为模型对照组、HMSN 8 mg·kg^(-1)组、DOX-HMSN4和8 mg·kg^(-1)组及DOX2 mg·kg^(-1)组。DOX每2天1次,其余药物每天1次,尾静脉注射给药,末次给药24 h后,称取瘤重,计算抑瘤率;HE染色观察H22小鼠肿瘤组织的病理改变;光镜下进行白细胞计数,计算胸腺和脾指数;检测血清中肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、谷丙转氨酶(GPT)及谷草转氨酶(GOT)的含量;Western蛋白印迹法检测凋亡蛋白BCL-2,BAX及血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果 HMSN8 mg·kg^(-1)组、DOX-HMSN 4和8 mg·kg^(-1)组及DOX 2 mg·kg^(-1)组对H22小鼠实体瘤的抑瘤率分别为20.5%,40.4%,54.8%及67.5%(P<0.01)。HMSN 8 mg·kg^(-1)组、DOX-HMSN 4和8 mg·kg^(-1)组及DOX2 mg·kg^(-1)组病理观察均可见肿瘤组织大片坏死,出现空泡和胞核溶解。与模型对照组相比,DOX-HMSN 4和8 mg·kg^(-1)组的白细胞计数、胸腺和脾指数无显著变化。DOX-HMSN 4和8 mg·kg^(-1)对H22小鼠的Scr和BUN无明显影响,但能降低其GPT和GOT的水平(P<0.05)。DOX-HMSN 4和8 mg·kg^(-1)组和DOX2mg·kg^(-1)组小鼠的BAX/BCL-2比值由模型对照组的0.49±0.06升高至1.23±0.14,0.79±0.08和1.04±0.14;VEGF表达水平由模型对照组的1.39±0.14降低至0.75±0.08,1.13±0.12和0.94±0.09(P<0.05)。结论 DOX-HMSN 4和8 mg·kg^(-1)能抑制H22移植瘤小鼠实体瘤的生长,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡及抑制血管生成有关。

柴胡皂苷-b2抑制内质网应激信号通路减轻四氯化碳致小鼠急性肝损伤

目的探讨柴胡皂苷-b2(SS-b2)对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用及其对内质网应激通路的影响。方法 60只雄性BALB/c小鼠分为正常对照组、模型组、SS-b2(5,10和20 mg·kg-1)组和阳性药(水飞蓟宾10 mg·kg-1)组。各组小鼠连续7 d每天ig给予不同剂量的SS-b2、水飞蓟宾或生理盐水;末次给药后2 h,除正常对照组外,各组分别一次性ip给予5%CCl4建立小鼠急性肝损伤模型。比色法检测血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;HE染色检测肝组织病理变化,免疫组织化学和Western蛋白印迹法检测小鼠肝组织中内质网应激通路蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、磷酸化真核起始因子2α(p-eIF2α)、转录激活因子4(ATF4)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,模型组小鼠血清中GPT和GOT的活性及MDA的含量明显升高(P<0.05,P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.01),同时,肝组织内质网应激通路相关蛋白PERK,p-eIF2α,ATF4,GRP78和CHOP表达水平显著增高(P<0.01)。与模型组相比,不同浓度SS-b2组小鼠血清中GPT和GOT的活性及MDA的含量明显降低(P<0.05,P<0.01),SOD的活性明显升高(P<0.01);肝组织上述内质网应激通路相关蛋白的表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01)。HE染色结果显示,不同浓度的SS-b2明显改善CCl4引起的小鼠肝细胞肿胀、肝小叶周围胞核溶解和肝索排列紊乱,使细胞形态明显好转。结论 SS-b2对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤具有保护作用,其机制可能与改善氧化应激损伤,抑制内质网应激通路的激活有关。

川穹嗪对肾性高血压大鼠心肌重构及P38MAPK/AP-1信号通路的影响

目的研究川穹嗪(TMP)对肾性高血压大鼠心肌重构的作用及其对P38MAPK/AP-1信号通路的影响。方法采用两肾两夹(2K2C)法建立肾性高血压大鼠模型,分为假手术组、模型组、TMP 30和60 mg·kg-1及坎地沙坦(Can)10mg·kg-1组。Can组大鼠灌胃给药,其他各组大鼠均腹腔注射,每日1次,连续给药2周。检测血流动力学指标,计算左心室体重比(LVW/BW)。HE染色观察左心室心肌细胞形态变化,Masson染色观察管周胶原生成和心肌纤维化程度。RT-PCR检测左心室B型心钠素(BNP)、肌球蛋白重链(?-MHC)、转化生长因子β(1TGFβ1)和结缔组织生长因子(CTGF)的m RNA表达,Western蛋白印迹法检测信号分子P38MAPK的磷酸化表达变化和激活蛋白(AP-1)的表达。结果 TMP具有明显的降压和改善心脏收缩和舒张功能的作用,TMP 30和60 mg·kg-1组及Can 10 mg·kg-1组高血压大鼠主动脉收缩压(Ao SP)、主动脉舒张压(Ao DP)、左室收缩末压(LVESP)、左室舒张末压(LVEDP)下降而室内压最大上升和下降速率(±dP/dtmax)升高(P<0.05,P<0.01)。TMP 30和60 mg·kg-1组及Can 10 mg·kg-1组高血压大鼠LVW/BW和管周胶原分数明显降低(P<0.05,P<0.01),心肌细胞形态、排列紊乱和心肌纤维化得到明显改善。川穹嗪能够显著降低高血压大鼠左心室BNP,?-MHC,TGFβ1和CTGFm RNA的表达以及P38MAPK的磷酸化程度和AP-1的蛋白表达。结论 TMP对肾性高血压引起的左心室重构有显著抑制作用,其机制可能与调控P38MAPK/AP-1信号通路以及下调TGFβ1、CTGF的m RNA表达有关。

利用NCI-H1975细胞筛选对奥西替尼耐药的铁氧还蛋白1基因及其功能鉴定

目的利用非小细胞肺癌细胞研究对奥西替尼潜在耐药基因及其分子机制。方法首先利用CRISPR-Cas9全基因组文库在人非小细胞肺癌细胞NCI-H1975中筛选奥西替尼潜在耐药基因,并且分别敲除潜在耐药基因铁氧还蛋白1(FDX1)和一个对照基因腺相关病毒整合位点1(AAVS1),建立敲除了FDX1和AAVS1稳定细胞,简称sg-FDX1细胞和sg-AAVS1细胞。提取sg-FDX1细胞基因组并且PCR扩增出sgRNA序列两侧的DNA序列,连接到T载体后进行测序;Western印迹法检测sg-FDX1和sg-AAVS1细胞中FDX1蛋白表达水平;将构建的sg-FDX1和sg-AAVS1细胞分别与奥西替尼0,30,50和100 nmol·L-1培养30 h,Western印迹法检测细胞中切割后的聚(ADP-核糖)聚合酶(c-PARP)蛋白表达水平,表皮生长因子受体(EGFR)和细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化水平。采用平板克隆实验,当克隆生长到约为10个细胞时加入奥西替尼12 nmol·L-1作用10 d,显微镜下计数≥10个细胞的克隆数;细胞用奥西替尼0~30 nmol·L-1作用72 h,或30 nmol·L-1作用3,5和7 d后,CCK8法检测肿瘤细胞的存活率。结果测序结果表明,sg-FDX1细胞中的FDX1基因发生缺失,同时FDX1在蛋白表达水平被有效敲除;和sg-AAVS1细胞相比,奥西替尼50 nmol·L-1处理的sg-FDX1细胞中c-PARP表达水平显著降低(P<0.01);奥西替尼在sg-FDX1细胞中对EGFR和ERK蛋白磷酸化表达抑制作用相对于sg-AAVS1细胞显著降低(P<0.01)。克隆形成和CCK8实验表明,相对于sg-AAVS1细胞,奥西替尼对sg-FDX1细胞的克隆形成率和增殖抑制作用显著降低(P<0.05)。结论 NCI-H1975细胞敲除FDX1,减弱了奥西替尼诱导细胞凋亡功能,可能是FDX1参与NCI-H1975细胞对奥西替尼耐药机制之一。

骨性关节炎基于病因的细化分型和精准用方

骨性关节炎是中老年人常见的慢性、退行性骨关节疾病。随着我国人口老龄化的到来,其发病率也在逐年攀升,其膝部疼痛更是大多数中老年人的常见症状,对其的工作和生活均会造成一定影响。目前,西医临床治疗该病以对症治疗为主,不良反应较多且疗效欠佳,而中医药的治疗较其有独特优势。但因学派众多,证型分类不明确,故方剂的选择和使用上缺乏精准性,本文针对骨性关节炎从中医病因分析入手,细化分型,总结临床症状及用方原则,以期可以结合临床更合理的使用方剂,因人而异精准用药,提高诊疗水平。

壁虎醇提物急性毒性研究

目的观察壁虎醇提物对小白鼠的急性毒性作用。方法运用急性毒性的实验进行半数致死量(LD50)的计算。预实验用较大范围壁虎醇提物试液少量动物进行实验求出致死范围,然后在全数致死量和零致死量之间将实验用小白鼠分为5组,计算各组剂量公比,每组10只雄性小白鼠,进行正式实验,将实验结果记录后运用改良寇氏法进行计算。结果灌胃给予壁虎醇提物,小鼠无死亡出现,但活动减少,反应迟钝,1 h后恢复正常,小白鼠每日灌胃的最大耐受量(MTD)为48.0 g·kg-1。经腹腔注射给药的LD50为6.475 g·kg-1,95%可信限为6.862~6.088 g·kg^(-1)。结论壁虎醇提物毒性极小,临床应用相对较安全。

阿托伐他汀对心肌纤维化影响的实验研究及其作用机制

目的研究心肌纤维化时NAD(P)H氧化酶与转化生长因子(TGF)-β1、结缔组织生长因子(CTGF)的关系以及阿托伐他汀对心肌纤维化的作用。方法用两肾两夹法建立肾性高血压模型。给予阿托伐他汀10,5 mg·kg-1·d-1和坎地沙坦10 mg·kg-1·d-1,连续4周后,检测血流动力学参数、左心室/体重比率(LVW/BW);Masson染色检测心肌纤维化程度;Western-blot检测Nox4、TGF-β1和CTGF的表达。结果阿托伐他汀显著改善了高血压大鼠的心功能障碍和心肌纤维化程度,并且显著下调了Nox4、TGF-β1和CTGF在心肌组织的表达。结论阿托伐他汀能降低高血压大鼠心肌纤维化程度及改善心功能,其机制与抑制TGF-β1/Nox4/CTGF通路有关。

川芎嗪对异丙肾上腺素诱导的小鼠急性心肌缺血的保护作用

目的研究川芎嗪(TMP)对异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠急性心肌缺血的保护作用及其机制。方法小鼠按照体重随机分为正常组(生理盐水10mg·kg^(-1)·d^(-1))、模型组(ISO 3 mg·kg^(-1)·d^(-1),连续3 d每天1次)、对照组(普萘洛尔0.4 mg·kg^(-1)·d^(-1))、3个剂量TMP组(TMP 60,30,15 mg·kg^(-1)·d^(-1)),连续给药7 d。记录小鼠心电图,全自动生化分析仪测定血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢(H_2O_2)和总抗氧化能力(T-AOC)的变化;HE和TTC染色观察心肌病理损伤和梗死情况。结果 TMP能明显改善ISO诱导的心电图ST段偏移以及心肌损伤,缩小梗死面积。与模型组[CK-MB:(1562.46±138.92)U·L^(-1);LDH:(6973.28±285.50)U·L^(-1);T-AOC:(2.99±1.25)U·mL^(-1);H_2O_2:(92.52±11.42)mmol·L^(-1)]比较,TMP各组的[CK-MB:(605.81±117.72),(838.67±159.73),(1264.37±134.17)U·L^(-1));LDH:(2661.79±229.27),(5776.16±331.39),(6014.59±291.56)U·L^(-1));H_2O_2:(31.98±7.38),(67.06±18.43),(86.62±13.41)mmol·L^(-1)]的水平显著降低,而T-AOC[(7.54±2.51),(5.80±2.53),(4.93±2.21)U·mL^(-1)]水平明显升高(均P<0.05,P<0.01)。结论 TMP对小鼠急性心肌缺血具有保护作用,这可能与降低缺血小鼠心肌酶的水平及防止缺血引起的氧化应激损伤有关。

壁虎醇提物抑制人宫颈癌SiHa细胞迁移及侵袭的研究

目的研究壁虎醇提物(GEE)对宫颈癌SiHa细胞侵袭、迁移能力的影响及其潜在的分子机制。方法实验分为对照组(不加药)和3个浓度(0.02,0.05,0.10 mg·m L^(-1)GEE)实验组。GEE作用于SiHa细胞24 h后,通过划痕实验、Transwell小室实验分别观察其迁移及侵袭能力的改变;通过MTT法检测GEE对SiHa细胞增殖能力的影响。免疫印迹法检测GEE对SiHa细胞E钙黏蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)及Rac1蛋白表达的影响。结果 GEE处理24h后,3个浓度实验组SiHa细胞的增殖抑制率分别为1.5%,5.5%,7.3%。SiHa细胞迁移及侵袭能力均减弱。GEE处理后的SiHa细胞内E钙黏蛋白表达上调,而VEGF和Rac1蛋白表达下调。结论 GEE可抑制SiHa细胞侵袭和迁移,其机制可能与E钙黏蛋白表达的上调、VEGF和Rac1表达的下调有关。

四氯化碳诱导小鼠内质网应激所致急性肝损伤的作用研究

目的研究四氯化碳(CCl_4)诱导小鼠内质网应激(ERS)所致急性肝损伤的作用及机制。方法将50只昆明种小白鼠随机分为对照组10只和实验组40只。实验组按0.01 L·kg^(-1)腹腔注射10%CCl_4(豆油稀释),对照组注射同体积生理盐水,分别在注射后16,24,48,72 h处死动物并取材。检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)的变化;计算肝、脾指数;以苏木精-伊红(HE)染色法观察肝病理学变化,以原位末端标记法(TUNEL)检测肝组织细胞凋亡情况,以免疫组化法检测ERS标志性蛋白DNA损伤诱导因子3(DDIT3/CHOP)和葡萄糖调节蛋白(GRP78)的表达情况。结果实验组16,24,48,72 h时ALT水平分别为(278.38±6.44),(261.52±10.52),(124.46±13.82)和(42.67±12.74)U·L^(-1),AST水平分别为(35.01±7.84),(31.93±11.33),(24.05±1.11)和(19.66±3.21)U·L^(-1),与对照组的(25.48±7.16)和(17.60±2.14)U·L^(-1)相比,实验组小鼠血清中ALT、AST水平均有所上升,在16 h达到顶峰(P<0.01),16 h后有所下降,并逐渐恢复至接近正常水平;实验组肝指数显著增高(P<0.01),24 h后逐渐恢复,脾指数与之相反。HE染色结果显示,实验组小鼠中肝肿大,胞质疏松,出现明显的片状坏死和气球样变。TUNEL结果显示,实验组16,24,48,72 h时的平均凋亡率分别为(64.00±5.69)%,(81.00±3.61)%,(45.00±3.21)%和(31.00±1.53)%,与对照组的(8.00±1.01)%相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。免疫组化结果显示,与对照组相比,CHOP和GRP78表达量显著升高(P<0.01),并在24 h达到峰值。结论以0.01 L·kg^(-1)的10%CCl_4能够诱导小鼠ERS,其所致急性肝损伤的最佳时间为24 h。

壁虎醇提物抑制C6胶质瘤细胞增殖作用的研究

目的研究壁虎醇提物(GEE)对胶质瘤C6细胞生长的抑制作用并探讨其分子机制。方法设置空白组、对照组(0.01 mg·m L-15-氟尿嘧啶)和实验组(0.1,0.15,0.2,0.3,0.4 mg·m L-1GEE)。噻唑蓝(MTT)法检测GEE对C6细胞增殖的影响;GEE作用于C6细胞24 h后,倒置显微镜观察C6细胞的形态学变化;Hoechst 33258染色法检测C6细胞核凋亡的变化;Western blot检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)、凋亡诱导因子(AIF)蛋白的表达。结果 GEE作用于C6细胞48 h后,MTT结果显示GEE可抑制C6细胞的增殖,5个剂量实验组的抑制率分别为19.9%,28.7%,63.1%,75.4%,76.3%,与空白组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。显微镜下可见典型的凋亡形态学变化。GEE可诱导caspase-9、AIF蛋白表达增加。结论 GEE可抑制C6细胞增殖,可能是通过增加caspase-9、AIF蛋白表达而引起凋亡。

川穹嗪对阿霉素诱导的急性心衰小鼠心肌损伤和凋亡的保护作用

目的研究川穹嗪(TMP)对阿霉素诱导的急性心衰(AHF)小鼠心肌损伤和凋亡的保护作用及机制。方法动物分为对照组(10 mL·kg-1·d-10.9%NaCl)、模型组(阿霉素20 mg·kg-1·d-1,连续2次)、依那普利组(10mg·kg-1·d-1)和高、中、低3个剂量(60,30,15 mg·kg-1·d-1)TMP组,连续给药2周后,阿霉素诱导建立AHF模型,检测心肌酶谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平的变化。苏木精-伊红(HE)染色进行病理学检查,Western-Blot检测心肌Bax和Bcl-2的表达变化。结果模型组血清心肌酶的水平升高,心肌受损并且有炎症浸润,TMP组和依那普利组的心肌酶的水平显著降低,心肌损伤及炎症得到明显改善。TMP和依那普利可以降低AHF小鼠心肌bax表达而增加Bcl-2的表达。结论 TMP对阿霉素诱导的AHF小鼠心肌具有保护作用,其机制可能与TMP防止心肌细胞损伤和凋亡有关。

壁虎多肽混合物对人食管癌EC109细胞生长的抑制作用

目的研究壁虎多肽混合物(GPM)对人食管癌EC109细胞的生长抑制作用及其机制。方法用MTT法检测GPM对细胞增殖的影响;Hoechst 33258荧光染色法观察GPM对细胞形态的影响;免疫细胞化学技术检测细胞内Bcl-2、Caspase-3的表达。结果 GPM抑制了EC109细胞的生长,作用呈时间和剂量依赖性。GPM作用24 h,EC109细胞出现明显的凋亡,且Bcl-2表达降低而Caspase-3表达增高。结论 GPM可以抑制人食管癌EC109细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与GPM降低食管癌EC109细胞Bcl-2表达而增加Caspase-3表达有关。

壁虎多肽混合物对肝癌SMMC7721细胞增殖及其自噬的影响

目的研究壁虎多肽混合物(GPM)对人肝癌SMMC7721细胞自噬的影响。方法取对数生长期细胞种板,用不同质量浓度的GPM(0,0.04,0.06,0.09,0.14,0.20,0.30,0.45 mg·m L^(-1))处理SMMC7721细胞24 h,通过噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖,根据MTT结果,分别作为正常组(0)、低中高3个质量浓度(GPM:0.1,0.15,0.22 mg·m L^(-1))实验组,对照组(西罗莫司40μg·m L^(-1))。经单丹磺酰尸胺(MDC)荧光染色观察不同质量浓度GPM对SMMC7721细胞自噬的影响;免疫组化法检测细胞内Beclin1及LC3表达的变化;免疫印迹法检测细胞自噬标志物Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白的表达。结果 GPM可抑制SMMC7721细胞的增殖,并具有质量浓度依赖性,作用24 h后其IC50值为0.16 mg·m L^(-1)。GPM处理SMMC7721细胞6 h后,在胞质中可见大量自噬小泡的形成,在显微镜下呈亮绿色荧光。正常组、对照组、低中高3个质量浓度实验组Beclin1阳性细胞数占总细胞数的百分比分别为(15.70±0.26)%,(63.47±0.54)%,(17.09±0.37)%,(70.66±0.56)%,(78.48±0.68)%;与正常组相比,对照组与中高2个质量浓度实验组差异有统计学意义(均P<0.05)。这5组LC3-阳性细胞数占总细胞数的百分比分别为(35.84±0.36)%,(82.41±0.82)%,(60.83±0.61)%,(69.66±0.70)%,(74.61±0.75)%,与正常组相比,各组差异均具有统计学意义(均P<0.05)。这5组的Beclin1与β-actin灰度比值分别为(6.87±0.68)%,(11.26±0.87)%,(6.46±1.34)%,(11.58±0.95)%,(15.82±1.58)%;与正常组相比,对照组、中高2个质量浓度实验组差异有统计学意义(均P<0.05)。这5组LC3-Ⅱ与βactin灰度比值分别为(26.70±0.41)%,(103.17±0.88)%,(30.29±0.52)%,(36.32±0.52)%,(64.34±0.48)%;与正常组相比,各组差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论壁虎多肽混合物能够影响人肝癌SMMC7721细胞自噬现象的发生,可能通过诱导其自噬而使细胞死亡。

丙戊酸钠对肾性高血压大鼠肾脏纤维化的作用及对组蛋白去乙酰化酶表达的影响

目的研究丙戊酸钠(VPA)对肾性高血压大鼠肾脏纤维化和组蛋白去乙酰化酶(HDACs)表达的影响。方法 SD大鼠分为假手术组、模型组、高、低剂量VPA组和阳性对照组,连续给药4周,检测大鼠血压、肾功能、肾脏纤维化及肾脏HDAC2和HDAC8的表达变化。结果模型组大鼠的主动脉收缩压和舒张压(ASBP,ADBP)、左室收缩末压和左室舒张末压(LVESP,LVEDP)、Scr、BUN及肾脏HDAC2和HDAC8表达均明显升高,出现了明显的肾脏纤维化。经VPA与氨氯地平治疗后,上述各项指标显著降低,血流动力学紊乱、肾功能及肾脏纤维化程度明显改善。结论 VPA对肾性高血压大鼠肾脏纤维化有明显改善作用,其机制可能与下调HDAC2及HDAC8的表达有关。

花姜酮对MCF7细胞的增殖和迁移与侵袭的影响及其作用机制研究

目的研究花姜酮对乳腺癌MCF7细胞增殖、迁移及侵袭的影响及潜在分子机制。方法以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测花姜酮对MCF7细胞增殖的影响;根据MTT结果,将实验分为4组:空白对照组和低、中、高3个剂量实验组。实验组分别给予5,10,20μmol·L-1的花姜酮,空白对照组给予等体积的二甲基亚砜(DMSO),处理48 h。用划痕、Transwell和平板克隆实验测定花姜酮对MCF7细胞迁移、侵袭和克隆形成能力;以免疫印迹法检测相关蛋白表达情况。结果与空白对照组相比,低、中、高剂量花姜酮处理48 h后,MCF7细胞的增殖能力分别降至(89.7±5.4)%,(82.0±6.9)%,(62.7±4.6)%,迁移能力分别降至为(72.7±5.7)%,(55.0±3.9)%,(32.7±4.6)%,侵袭能力降至(77.6±7.8)%,(49.1±4.7)%,(40.8±6.2)%,差异均有统计学意义(均P<0.01)。空白对照组的克隆形成率为(41.4±6.3)%,低、中、高3个剂量实验组依次降至(27.4±4.8)%,(20.4±5.1)%,(5.4±0.8)%,实验组与空白对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。花姜酮处理MCF7细胞后,Ecadherin的表达量随低、中、高3个浓度而梯度上调,但N-cadherin的表达量随浓度而梯度下降,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论花姜酮能够抑制MCF7细胞的增殖、迁移和侵袭,机制可能与促进E-cadherin、抑制N-cadherin的表达有关。

盐酸川芎嗪在小鼠体内的药代动力学和心脏分布研究

目的建立盐酸川芎嗪(TMP)检测的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)并研究TMP在小鼠体内的药代动力学过程和心脏分布情况。方法建立乙腈沉淀小鼠血浆和心脏匀浆的RP-HPLC检测方法。小鼠腹腔单次注射TMP 80mg·kg^(-1)后,在不同时间点测定血浆及心脏匀浆液中TMP的浓度,用DAS2.0计算TMP的药代动力学参数。结果该方法在TMP浓度为0.2~20.0mg·L^(-1)内有良好的线性(r=0.999 7)、回收率和精密度。血浆TMP的主要药代动力学参数:AUC_(0-t)为(671.20±31.49)mg·min·L^(-1),C_(max)为(17.54±0.71)mg·L^(-1),t_(max)为10 min,t_(1/2)为(25.47±14.85)min。结论 RP-HPLC法适用于小鼠血浆和心脏匀浆中TMP的检测,准确可靠、灵敏度高,TMP吸收迅速、在心脏有较高的分布,有利于心脏疾病的治疗。

阿霉素-肝素介孔硅抗癌药物系统在大鼠体内的药代动力学

目的研究阿霉素-肝素介孔硅抗癌药物系统(AMS-HP)在大鼠体内的药代动力学过程。方法6只SD大鼠舌下静脉注射AMS-HP,剂量8 mg·kg^(-1),分别在给药前和给药后0,0.08,0.17,0.5,1,3,6,12,24,36,48,60,72 h采集尾静脉血,用HPLC法测定AMS-HP中阿霉素的血药浓度,用DAS 2.0计算主要的药代动力学参数。结果 AMS-HP中阿霉素的主要药代动力学参数C_(max)、t_(1/2)、t_(max)、V/F、CL/F、AUC0-t、AUC0-∞分别为(5.71±0.46)L·h^(-1)·kg^(-1),(15.81±2.01)h,(3.00±0.00)h,(140.12±17.87)L·kg^(-1),(118.74±18.04)ng·m L^(-1),(3599.96±881.99)ng·m L^(-1)·h,(3838.51±817.60)ng·m L^(-1)·h。结论本研究建立了AMS-HP血药浓度检测的HPLC法并进行了方法学验证,AMS-HP中阿霉素的半衰期延长,在体内具有缓释效果。

肝素硅阿霉素抗癌药物系统对鸡胚尿囊膜血管生成的影响

目的研究肝素硅阿霉素抗癌药物系统(DHN)对碱性成纤维生长因子(b-FGF)诱导血管生成的抑制作用。方法 b-FGF诱导实验分为9组:空白组,模型组(b-FGF),对照A组(介孔硅)、B组(肝素硅)、C组(肝素)、D组(阿霉素1μg),3个剂量实验组(DHN,10,5,1μg);各组b-FGF的用量均为每胚0.1μg,空白组和对照A、B、C组的给药量为10μg。新生血管实验不加b-FGF以外,其余分组与给药情况与b-FGF实验一致。新鲜受精鸡胚发育至11 d,开窗加药,3 d后取加药部位及其周围的尿囊膜,BI-2000图像分析系统下计数CAM的血管分叉数及血管内径,计算血管生成抑制率。结果 DHN各组的血管分支数及血管直径较模型组显著减小,3个剂量实验组对b-FGF诱导的CAM血管生成的抑制率分别为69.1%,61.1%,56.2%。DHN对正常新生血管的抑制率分别为41.6%,20.5%,10.6%。结论 DHN对b-FGF诱导的血管生成和正常新生血管生成均有一定的抑制作用。