河南食管鳞癌高低发区口腔健康和牙龈卟啉单胞菌感染状况比较

目的比较分析河南食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)高发区和低发区无症状人群中口腔卫生和牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)感染特征,为ESCC病因学预防提供理论依据。方法选择河南ESCC高发区1388个和毗邻低发区486个无症状当地居民,通过面对面的问询方式收集人口学特征并评估口腔健康状况,采集口腔拭子和外周血样本,实时定量PCR检测Pg,比较分析ESCC高发区和低发区口腔健康状况和Pg感染特征,Logistic回归分析口腔Pg丰度对口腔健康不良的影响。结果河南ESCC高发区无症状研究对象中度和重度牙龈出血、牙齿缺失>17颗、每天刷牙多于1次、Pg感染等百分比高于低发区研究对象,口腔Pg丰度与不良口腔健康指征显著相关,并显著增加ESCC高发区研究对象牙结石、牙龈出血和牙齿缺失的发生风险。结论河南ESCC高发区无症状居民口腔卫生不良和Pg感染率显著高于紧邻的低发区人群,且口腔高丰度Pg显著增加口腔卫生不良指征的发生风险,为ESCC高发区易感人群食管癌病因预防提供了理论依据。

2010年至2020年安阳肿瘤医院1258例食管胃交界部腺癌患者死因分析

目的分析食管胃交界部腺癌(AEG)患者死因情况,为AEG防治提供参考依据。方法回顾性分析省部共建食管癌防治国家重点实验室收集的、2010年至2020年河南省安阳肿瘤医院收治的、1258例AEG死亡患者的临床信息及随访资料,对患者以年龄(<40岁、40~60岁、≥60岁)、性别(男性/女性)、地区分布(城市/农村)分组进行死因分析。结果AEG患者从30岁开始,随着年龄不断增大,发病率越来越高,最高发年龄段为65~70岁,之后随着年龄不断升高,发病率迅速下降;AEG患者大多因本病(50.87%)去世,其次为食管癌(6.20%)、转移或扩散(4.37%)、心血管疾病(1.03%)、胃癌(1.3%)、胰腺癌(0.08%)、肝癌(0.08%)、膀胱癌(0.08%)、尿毒症(0.08%);40~60岁患者死亡前2位的死因分别是AEG(46.54%)和食管癌(6.29%);农村AEG死亡率占总患病人数的81.48%,远高于城市人口;男性相比于女性,AEG患病率更高。结论AEG对河南安阳居民健康危害程度较高,通过分析AEG患者死因情况,为AEG的防治工作提供参考依据。

安阳肿瘤医院2013年至2019年食管鳞癌单纯手术患者死因分析及其影响因素研究

目的探究食管鳞癌患者行单纯手术治疗后死亡的原因及其影响因素,为降低食管鳞癌术后患者死亡率策略的制定提供参考依据。方法从郑州大学第一附属医院省部共建食管癌防治国家重点实验室1973年至2020年食管癌与贲门癌患者大样本数据库,筛选出安阳肿瘤医院2013年1月1日至2019年12月30日的食管鳞癌单纯手术后随访结果显示死亡的2265例患者资料,进行回顾性分析,利用卡方检验和Cox回归模型分析影响食管鳞癌患者死亡的因素,Kaplan-Meier法绘制生存曲线。结果肿瘤性死亡患者2182例(96.34%),主要是指复发、淋巴结转移和远处器官转移;非肿瘤性死亡患者83例(3.66%),主要指心脑血管疾病、呼吸系统疾病及其它因素。尤其早期食管鳞癌患者肿瘤性死亡占比低于非肿瘤性死亡占比,Cox多因素风险模型分析示年龄、肿瘤部位和浸润深度是食管鳞癌患者术后肿瘤性死亡的独立危险因素。结论早期食管鳞癌患者肿瘤性死亡率低于非肿瘤性死亡,肿瘤分期和淋巴结转移是食管鳞癌患者术后肿瘤性死亡的独立危险因素。

共表达网络鉴定食管鳞癌中抗肿瘤细胞毒性分子

目的鉴定新的抗食管鳞癌(ESCC)免疫细胞毒性相关分子。方法基于ESCC转录组表达谱数据,利用CIBERSORT反卷积算法计算ESCC样本中免疫细胞构成比;通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)构建基因模块;计算免疫细胞构成比与细胞毒性基因、共表达网络模块的相关性,确定关键模块。通过基因的模块隶属度、基因显著性和预后相关性,鉴定关键基因。结果WGCNA方法共构建30个基因模块,其中white模块包含了本研究纳入的所有细胞毒性相关基因(GZMA、PRF1、GZMB和IFNG),将其作为关键模块。关键模块共包含18个关键hub基因,其中8个基因表达异常与ESCC患者预后相关。结论通过基因共表达网络方法,鉴定到8个ESCC细胞毒性相关基因。

光动力治疗的抗肿瘤机制及在食管癌中的研究进展

食管癌是一类有较高侵袭性的消化道恶性肿瘤,在中国发生率和死亡率相对较高。光动力治疗通过综合运用氧、激光和光敏剂等来达到治疗肿瘤的目的,在一定波长红外激光的辐射下激活光敏剂使其吸收光能,在各种机制转换下产生具有细胞毒性的活性氧,以此实现杀灭癌细胞、治疗癌症的目的。由于其侵入性小、靶向性和敏感性较好,以及不良反应较少等特性而受到关注。本文对光动力治疗的背景、作用原理、国内外研究进展,以及光敏剂分类和发展等进行综述。

靶向免疫代谢改善肿瘤微环境

免疫代谢近年来日益受到关注,癌基因驱动的肿瘤细胞代谢变化可影响肿瘤微环境(TME),进而抑制免疫反应,并对癌症治疗造成障碍。这提示我们可以通过靶向代谢途径改善TME,增强抗癌免疫效应。本文总结目前将TME内免疫细胞代谢转变为促炎状态的策略,并强调需要更好地还原生理条件,进而选择靶点、阐明机制和优化代谢抑制剂。

牙龈卟啉单胞菌:从毒力因子到疫苗研发

牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)是革兰氏阴性口腔致病菌之一,其定植于牙龈内厌氧菌生物膜中,引起局部牙周炎。Pg由定植的牙龈局部通过体液扩散到全身引起多种疾病,如:心脑血管疾病、自身免疫性疾病、阿尔兹海默症、癌症等。药物难以到达牙龈部位且持续给药易引起菌体的耐药,不能达到根除的效果。因此,选择合适的抗原位点刺激机体免疫系统产生中和抗体是疫苗研究的关键。本文对Pg的致病及其机制进行了概括,并全面综述了相关的毒力因子,为清除和预防Pg感染提供靶标,同时从疫苗学角度评价和分析这些毒力因子作为疫苗的潜力。

谷氨酰胺转运载体SLC1A5对食管鳞癌细胞恶性生物学的影响及其机制

目的探讨谷氨酰胺转运载体SLC1A5在食管鳞癌细胞系中的表达、对增殖和侵袭的影响及其作用机制。方法采用实时定量PCR及免疫印迹法检测人正常食管上皮细胞系(SHEE)和食管鳞癌细胞系(KYSE30、KYSE70、KYSE140、TE1)中SLC1A5的表达水平。在SLC1A5高表达的KYSE70细胞中采用CRISPR/Cas9方法敲除SLC1A5,采用CCK8测定和划痕实验检测对照、敲除SLC1A5和使用SLC1A5抑制剂V-9302后KYSE70细胞的增殖和迁移能力。采用GSH/GSSG试剂盒检测对照、敲除SLC1A5和使用SLC1A5抑制剂V-9302后KYSE70细胞的谷氨酰胺代谢情况。结果SLC1A5在食管癌细胞系KYSE70中高表达,与正常食管上皮中的表达有统计学差异(P<0.05)。SLC1A5敲除或被抑制的KYSE70细胞的增殖能力低于未处理细胞(P<0.05),处理组划痕的迁移面积较未处理组明显减少(P<0.05),处理组的GSH/GSSG比率较未处理组的显著降低(P<0.05)。结论SLC1A5在ESCC细胞系中表达增高,抑制SLC1A5可降低ESCC细胞的增殖迁移能力与谷氨酰胺代谢,SLC1A5可能是食管癌治疗的潜在靶点。

牙龈卟啉单胞菌通过miR-21-5p/RASA1/ERK信号通路促进食管鳞癌自噬

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)促进食管鳞癌(ESCC)细胞自噬发生的分子机制。方法Pg感染siAtg7或氯喹(CQ)预处理的KYSE70细胞和KYSE140细胞,Western blot检测Atg7、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和p62蛋白,荧光共聚焦显微镜检测mRFP-GFP-LC3标记ESCC细胞自噬流,CCK-8法检测ESCC细胞活性,迁移小室检测ESCC细胞迁移及侵袭能力。miR-21-5p inhibitor、RASA1过表达或U0126分别阻断miR-21-5p/RASA1/ERK信号通路,如上检测自噬相关表型变化。免疫组化检测ESCC组织中Pg丰度和LC3蛋白表达,RT-PCR检测ESCC及其癌旁组织中miR-21-5p的表达,统计分析Pg、LC3和miR-21-5p相关性。结果Pg感染诱导KYSE70细胞和KYSE140细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达上调、p62蛋白表达下调,增加了mRFP-GFP-LC3标记细胞中的红色、绿色和黄色荧光斑点数目和荧光强度,同时促进KYSE70细胞和KYSE140细胞增殖、迁移和侵袭能力增加,上述Pg诱导的ESCC细胞表型改变被CQ或siAtg7预处理逆转。miR-21-5p inhibitor、U0126或RASA1过表达质粒的预处理,也同样逆转了Pg对ESCC细胞自噬的促进作用。Pg丰度与miR-21-5p、LC3蛋白表达呈正相关。结论Pg通过miR-21-5p/RASA1/ERK信号通路促进ESCC自噬发生。

牙龈卟啉单胞菌通过GARP促进TGF-β/SMAD轴介导食管鳞状细胞癌细胞的上皮间质转化

目的:阐明牙龈卟啉单胞菌(Pg)诱导食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞发生上皮间质转化(EMT)的分子机制。方法:KEGG分析Pg诱导的ESCC差异表达基因富集的生物学通路,WB和/或免疫荧光法检测Pg诱导的ESCC细胞中糖蛋白A重复优势蛋白(GARP)、TGF-β、pSMAD/SMAD、Snail、Oct4和EMT相关分子表达的变化,ELISA检测TGF-β1水平的变化,免疫组织化学法检测ESCC组织中GARP和TGF-β1的表达规律,Transwell实验和动物实验验证Pg对ESCC的促进作用。结果:ESCC细胞感染Pg后,TGF-β、Hippo、PI3K/Akt等信号通路被激活;Pg感染刺激ESCC细胞分泌总TGF-β1和活性TFG-β1的水平升高(均P<0.01),使SMAD2/3磷酸化并发生核转位,诱导N-cadherin、Snail、Oct4等蛋白表达升高、E-cadherin蛋白表达降低,由此促进ESCC细胞的迁移、侵袭和裸鼠皮下移植瘤的生长(均P<0.01)。在ESCC细胞中沉默GARP表达后,逆转了Pg所诱导的上述ESCC细胞表型变化。Pg丰度高的ESCC组织中TGF-β1和GARP蛋白表达高于低丰度的ESCC组织,且Pg丰度与TGF-β1、GARP表达存在正向关联(P=0.0015)。结论:Pg通过GARP激活TGF-β/SMAD轴促进ESCC细胞发生EMT,进而促进ESCC细胞的迁移、侵袭和生长,清除Pg或阻断TGF-β信号转导则可阻断上述Pg对ESCC的促进作用。

PSME2和STAT3双重抑制通过合成致死效应诱导食管鳞癌细胞死亡

蛋白酶体激活物复合物亚基2(proteasome activator complex subunit 2,PSME2)表达异常与多种肿瘤发生发展密切相关,但在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中功能及临床意义尚不明确。本研究分析了TCGA-ESCC和GSE53625数据库中ESCC转录物组数据,发现PSME2高表达组ESCC患者预后不良,且ESCC组织中PSME2蛋白表达水平高于癌旁组织。沉默KYSE30细胞和NE6-T细胞中PSME2表达,ESCC细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆能力均显著下降,同时伴随着LC3-II/LC3-I蛋白表达明显升高、p62蛋白表达降低和自噬激活。GSEA富集分析表明,PSME2低表达组IL-6/STAT3信号通路激活,沉默KYSE30细胞和NE6-T细胞诱导了IL-6分泌和p-STAT3表达增加。上述PSME2沉默诱导的分子变化,能够被LMT28或WP1066逆转。PSME2沉默联合WP1066,使KYSE30与NE6-T细胞培养上清中LDH含量明显升高,Calcein/PI染色表明,死亡细胞率分别为36.69%和32.55%,显著高于PSME2沉默(6.78%和6.74%)或WP1066单独处理组(18.34%和9.70%)。本研究表明,PSME2促进ESCC恶性进展,PSME2沉默通过IL-6/STAT3信号通路代偿性激活ESCC自噬,联合PSME2沉默和STAT3抑制通过合成致死效应诱导食管鳞癌细胞死亡,表明PSME2是ESCC潜在分子治疗靶点,联合抑制PSME2和STAT3是ESCC治疗的新选择。

基线水平CCL19^(+)树突状细胞可有效预测肺腺癌患者免疫治疗的敏感性

目的探讨肺腺癌微环境基线水平CCL19^(+)树突状细胞(CCL19^(+)DC)与肺腺癌患者接受免疫治疗疗效及肺腺癌患者CD8^(+)T细胞浸润的相关性。方法回顾性分析2020年1月~2023年12月在河南科技大学第一附属医院住院的肺腺癌患者资料,并收集行免疫治疗的肺腺癌患者组织标本96例。应用免疫荧光法检测96例肺腺癌组织中CCL19^(+)DC及CD8^(+)T细胞的浸润状况。受试者工作特征(ROC)曲线评估基线水平CCL19^(+)DC对肺腺癌免疫治疗疗效预测价值,并进行敏感性分析。采用卡方检验分析肺腺癌组织中基线水平CCL19^(+)DC与免疫疗效及CD8^(+)T细胞浸润的相关性。采用Pearson相关性分析评价基线水平CCL19^(+)DC表达与细胞毒性T细胞(CTL)浸润相关性。将PC9肺腺癌细胞、CD8^(+)T细胞及DC(过表达CCL19和/或抗Pd^(-1)处理)进行分组体外共培养,采用流式细胞学方法检测T细胞各表面分子(GranzymeB、Perforin、IFN-γ、Ki-67)表达情况。结果免疫荧光结果显示,PR/CR组(Respond)的患者肺腺癌组织中CCL19^(+)DC浸润高于PD/SD组(Unrespond)患者,表现出更好的免疫治疗疗效,ROC曲线下面积为0.785,敏感度为75.6%,特异度为62.8%。CCL19^(+)DC高表达患者肺腺癌组CD8^(+)T细胞表面分子Granzyme B(P<0.01)、Perforin(P<0.01)、IFN-γ(P<0.01)及Ki-67(P<0.001)表达均高于CCL19^(+)DC低表达患者。肺腺癌组织基线水平CCL19^(+)DC的表达与免疫治疗疗效具有显著的相关性(P=0.003),与CTL细胞浸润呈正相关(r=0.6657,P<0.001),CCL19^(+)DC丰富度与CD8^(+)T细胞的浸润具有显著的相关性(P=0.007)。与对照组相比,转染过表达CCL19质粒及单独使用anti-PD1处理组中CD8^(+)T淋巴细胞杀伤及增殖功能标志物增加(P<0.01)。使用anti-PD1联合转染过表达CCL19质粒处理组中CD8^(+)T淋巴细胞杀伤及增殖功能标志物水平显著增加(P<0.001)。结论在免疫治疗背景下,肺腺癌微环境中基线水平CCL19^(+)DC的表达与肺腺癌患者免疫治疗疗效及CTL细胞浸润呈正相关,并且肺腺癌微环境中CCL19^(+)DC可以提升CD8^(+)T细胞杀伤及增殖功能标志物水平,发挥潜在抗肿瘤免疫作用。因此,肺腺癌微环境中基线水平CCL19^(+)DC可以有效预测肺腺癌免疫治疗的敏感性。

生物抗菌材料在食管癌预防和诊疗中的研究进展

食管癌作为上消化道中一种常见的恶性肿瘤,其发病过程与微生态紊乱密切相关。目前临床上标准治疗手段包括手术、化疗和放射治疗。近年来,抗菌生物材料在抗菌和抗肿瘤治疗方面崭露头角,不仅可以抑制细菌的生长和扩散,还可以作为药物的靶向递送载体。通过利用抗菌生物材料的靶向性和可控释放性,可以精确输送抗肿瘤药物到肿瘤组织内或肿瘤细胞内,从而抑制肿瘤细胞的增殖和转移,实现对肿瘤的精准治疗。抗菌生物材料具有良好的生物相容性和可降解性,在食管癌的预防和诊疗中具有巨大潜力。本文总结了生物抗菌材料在食管癌治疗中的最新进展及其治疗的安全性和有效性。

多功能蛋白聚糖对食管鳞癌细胞体外迁移和侵袭的影响

目的探讨多功能蛋白聚糖(versican,VCAN)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)KYSE150和EC9706细胞中的表达及其对细胞体外迁移和侵袭的影响。方法从GEO数据库中下载GSE77861数据集,采用生物信息学方法进行数据处理并筛选差异表达基因,筛选出与ESCC预后相关的关键基因VCAN;Western blot检测人正常食管上皮细胞HEEC及4种ESCC细胞系KYSE70、KYSE140、KYSE150、EC9706中VCAN的蛋白表达水平。将KYSE150和EC9706细胞分3组(si-VCAN沉默表达组、si-NC阴性对照组和空白对照组)处理,然后Western blot检测各组VCAN的蛋白表达水平;划痕实验、Transwell实验分别检测沉默表达VCAN对细胞迁移和侵袭能力的影响。结果ESCC细胞系的VCAN相对表达水平高于人正常食管上皮细胞HEEC,且si-VCAN沉默表达组的VCAN表达水平低于si-NC阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);划痕实验和Transwell实验结果表明,si-VCAN沉默表达组的迁移和侵袭细胞数目较对照组减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论VCAN在ESCC细胞系中高表达,沉默表达VCAN后可抑制ESCC细胞的体外迁移和侵袭。

牙龈卟啉单胞菌FimA促进ESCC细胞MHC-I的降解与免疫抑制

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)感染食管鳞状细胞癌细胞后对主要组织相容性一类分子(MHC-I)的影响及其免疫调控机制。方法Western blot检测Pg感染KYSE-150细胞后主要毒力因子鞭毛蛋白(fimbriae,FimA)及MHC-I的表达水平,免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)法探索FimA和MHC-I之间的相互作用,共聚焦检测KYSE150细胞转染LC3双荧光慢病毒后的荧光变化,western blot检测Pg感染KYSE150后LC3B-Ⅱ的表达量,流式细胞术检测感染Pg的KYSE150与外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)共培养后PMBC表达MKi67的情况。结果Western blot显示Pg感染KYSE150细胞后FimA的表达增多而MHC-I的表达减少。Co-IP显示FimA与MHC-I蛋白可直接相互作用,共聚焦显微镜显示Pg感染KYSE150后荧光强度增强,流式细胞术显示Pg感染的KYSE150细胞与PBMC细胞共培养后能显著降低PBMC中Gzmb和Mki67的表达(均P<0.001)。结论FimA可能通过自噬途径促进MHC-1的降解、抑制T细胞免疫应答,参与ESCC的免疫抑制和肿瘤进展。

组蛋白去甲基化酶GASC1在肿瘤发生中的作用及其抑制剂研究现状

遗传和表观遗传改变的相互依存控制着肿瘤的发生发展。鳞状细胞癌扩增基因1(gene amplified in squamous cell carcinoma 1,GASC1)在多种肿瘤中扩增和过表达,其上调与患者不良预后相关。GASC1基因编码的Jumonji C结构域蛋白为组蛋白赖氨酸去甲基化酶,其过表达可引起组蛋白甲基化程度降低,调控肿瘤干细胞维持中关键基因的表达,从而诱发肿瘤。GASC1是极富潜能的抗癌治疗靶点,其多种抑制剂已被鉴定和报告。

食管胃交界部腺癌肿瘤源性坏死的临床病理特征

目的分析食管胃交界部腺癌(AEG)肿瘤源性坏死的临床病理特征,为AEG肿瘤源性坏死的分子机制及靶向治疗研究提供理论基础。方法样本来源于省部共建食管癌防治国家重点实验室食管癌和食管胃交界腺癌大数据库,共纳入1406例发生肿瘤源性坏死的AEG患者的临床病理资料,主要包含患者的基本信息、病理及临床诊疗信息。采用SPSS 21.0进行统计分析,计量资料用(x-±s)表示,计数资料用百分数表示,采用Kaplan-Meier生存分析绘制生存曲线,α=0.05。结果1406例发生肿瘤源性坏死的AEG患者,年龄(61.9±8.9)岁,男女比4.2∶1;AEG组织病理亚型中,低分化腺癌发生肿瘤源性坏死占比最大(54.3%);浸润深度中T3、T4居多(分别是69.0%、21.8%);发生淋巴结转移的比例是未发生转移的2.4倍;病理分期中以Ⅲ期为主(68.4%);发生肿瘤源性坏死的AEG患者的中位生存时间是2.5 a(95%CI:2.3~2.6);5 a生存率是25.0%。结论AEG肿瘤源性坏死的发生以男性为主,多为晚期,预后差;肿瘤源性坏死很可能是AEG预后的危险因素。

微生物群与肿瘤发展及治疗相关性的研究进展

虽然肠道微生物群已被确立为与肿瘤发展和治疗疗效相关的重要生物标志物和调节剂,但微生物群对不同器官肿瘤的影响鲜为人知。新的证据表明,局部微生物群是肿瘤微环境的重要组成部分,特别是在黏膜病变引起的肿瘤中,例如食管、肺、胃肠道等。研究发现,肿瘤内细菌群体具有肿瘤类型特异性,肿瘤相关微生物群可以直接调节肿瘤的发生、发展及其对化学或免疫疗法的反应。本文旨在对肿瘤组织中微生物群及其在肿瘤发展和治疗中的功能和作用机制研究的重要文献进行综述。

蛋白质半胱氨酸棕榈酰化在食管肿瘤免疫中的作用

蛋白质半胱氨酸棕榈酰化,或称为S-棕榈酰化,是蛋白质翻译后修饰的一种,近年来受到越来越多的关注。人体有数千种被修饰过的蛋白质,由于修饰的蛋白质数量众多,更加凸显了S-棕榈酰化的重要性。本文主要从食管肿瘤免疫学的角度介绍S-棕榈酰化的作用,讨论了几个重要的免疫信号传导通路,包括S-棕榈酰化对蛋白质的作用、吞噬调节作用、细胞因子受体介导的信号传导、凋亡信号的调控等。本文着重强调了棕榈酰化在调节食管肿瘤免疫信号传导中的通用性,同时也是对于靶向棕榈酰化治疗食管肿瘤潜力的探讨。

基于纳米医学的光热治疗在食管癌诊疗中的研究进展

食管癌是常见的上消化道恶性肿瘤之一,传统的治疗方式难以改善患者的生存质量。近年来,光热治疗(photothermal therapy,PTT)在食管癌治疗领域崭露头角,与传统治疗方式相比,PTT具有非侵入性、时空可控性和高效性等优点。PTT是通过光热转换剂(photothermal agent,PTA)将近红外光转化为热能来杀伤肿瘤细胞的一种治疗手段,具有靶向性强、创伤小、治疗时间和空间可控及较低不良反应等优势。本文就PTT的背景、作用原理、抗肿瘤机制以及纳米药物在食管癌PTT中的应用及展望进行阐述。