牙龈卟啉单胞菌诱导线粒体转录因子A高表达在食管鳞癌中的临床意义

目的:分析食管鳞癌(ESCC)中牙龈卟啉单胞菌(Pg)对线粒体转录因子A(TFAM)的诱导效应,并探讨其潜在机制及临床意义。方法:采用Western blot、qRT-PCR及线粒体压力测试检测Pg感染不同时间(24 h及48 h)ESCC细胞KYSE450及KYSE150中TFAM蛋白与mRNA表达量及线粒体氧化磷酸化水平的变化。建立TFAM敲降的稳定细胞系KYSE150-T,分别用Pg感染KYSE150及KYSE150-T,将细胞分为4组:KYSE150组、KYSE150-T组、KYSE150+Pg组及KYSE150-T+Pg组。通过Western blot、qRT-PCR、线粒体压力测试、CCK-8、平板克隆及Transwell法检测各组细胞的TFAM蛋白与mRNA表达量、线粒体氧化磷酸化功能及体外增殖与侵袭能力差异。采用免疫组化法检测384例ESCC患者癌组织及相应癌旁组织中Pg感染及TFAM蛋白的表达情况。利用卡方检验分析二者与ESCC患者临床病理特征之间的相关性。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,通过Log-rank分析Pg感染及TFAM高表达与患者生存时间的相关性。结果:Pg感染可诱导KYSE450及KYSE150中TFAM蛋白与mRNA表达量增加,线粒体氧化磷酸化功能增强,且具有时间依赖性(P<0.05)。与KYSE150组相比,KYSE150+Pg组细胞的TFAM蛋白与mRNA表达量均显著增加(P<0.05),线粒体氧化磷酸化功能、体外增殖及侵袭能力均显著增强(P<0.05),而KYSE150-T组上述各指标则显著减少、降低(P<0.05);与KYSE150+Pg组相比,KYSE150-T+Pg组细胞的上述各指标均显著减少、降低(P<0.05)。ESCC组织中Pg感染率及TFAM阳性率分别为41.15%及43.23%,二者具有显著一致性(P<0.05)。Pg感染及TFAM高表达的患者多为有吸烟、饮酒史的男性患者,且肿瘤分化程度低、浸润程度深、淋巴结转移率高、临床分期多为Ⅲ/Ⅳ期(P<0.05)。Pg感染及TFAM高表达阳性的患者5年生存期均会缩短,且二者共阳性的患者5年生存期缩短更为显著(P<0.05)。结论:Pg可通过诱导TFAM高表达,增强ESCC细胞线粒体氧化磷酸化功能,促进ESCC恶性进展。有效清除Pg并抑制其对TFAM的诱导作用,对改善ESCC患者预后至关重要。