如何提高生理学课堂教学效果

生理学是医学课程体系中一门重要的基础课,提高课堂教学效果具有重要意义。笔者结合生理学教学实践,从以下四方面讨论了如何提高生理学课堂教学效果:①认真备课;②营造和谐的课堂气氛;③激发学生的学习兴趣;④归纳总结。

PBL教学法在护理专业病理生理学教学中的应用

目的探讨在高职高专护理专业病理生理学教学中开展以问题为基础的教学法(PBL)的应用效果。方法将护理专业中的3个大班作为实验班,3个大班作为对照班。在实验班采用PBL教学法,对照班采用传统的教学方法。结果 PBL教学有利于提高学生的综合能力、教学质量及教师综合素质。结论 PBL教学法是一种有益的教学方法,可以进一步深入研究。

顺铂诱导肾损伤过程中肾皮质脂质过氧化的变化

目的探讨顺铂肾损伤过程中肾皮质脂质过氧化与肾小管结构改变的关系。方法雌性Wistar大鼠随机分为生理盐水组、顺铂Ⅰ组、顺铂Ⅱ组、顺铂Ⅲ组,均为尾静脉注射给药,每天一次,连续五天。第六天取血测肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量,取肾皮质测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)活性,同时进行肾小管上皮细胞碱性磷酸酶组织化学染色和组织病理学观察。结果顺铂组Scr、BUN明显升高,肾皮质MDA含量升高,SOD与GSHPx活性降低,与对照组相比均有显著差异(P<0.05),且肾皮质SOD活性、GSHPx活性与Scr、BUN含量呈明显负相关(P<0.05),肾皮质MDA含量与Scr、BUN含量呈明显正相关(P<0.05)。酶组化显示肾小管上皮细胞碱性磷酸酶大量丢失,病理切片结果显示肾皮质部分肾小管上皮细胞变性、坏死。结论顺铂引起肾皮质组织的破坏与肾皮质脂质过氧化增强有关,且随剂量增加肾皮质损伤加重。

灵芝多糖对兔失血性休克再灌注血液流变学和脂质过氧化的影响

目的 :探讨灵芝多糖对家兔失血性休克再灌注损伤时血液流变学和脂质过氧化的影响及可能机制。方法 :将 16只家兔复制成失血性休克模型后随机分为生理盐水再灌注组和灵芝多糖再灌注组 ,观察休克和再灌注前后血浆脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)含量、红细胞超氧化物歧化酶 (SOD)活性、全血黏度、血浆黏度和红细胞变形能力的变化 ,以及灵芝多糖对上述指标的影响。结果 :与休克前相比 ,休克时血浆 MDA含量、全血黏度、血浆黏度明显升高 (P均 <0 .0 5 ) ,红细胞 SOD活性和变形能力则明显降低 (P均 <0 .0 5 )。生理盐水再灌注时可明显降低休克时血浆黏度 (P<0 .0 5 ) ,但对全血黏度无影响 (P>0 .0 5 ) ;而红细胞 SOD活性和变形能力与休克时比较则进一步降低 (P<0 .0 5 ) ,血浆 MDA含量明显升高 (P<0 .0 5 )。灵芝多糖再灌注时全血黏度、血浆黏度与休克时相比均降低 (P均 <0 .0 5 ) ,与生理盐水组比较 ,红细胞 SOD活性和红细胞变形能力均升高(P均 <0 .0 5 ) ,血浆 MDA含量明显降低 (P<0 .0 5 ) ,全血黏度降低 (P<0 .0 5 )。结论 :灵芝多糖可明显改善失血性休克再灌注时的血液流变学特性 ,改善微循环 ,其效果优于生理盐水 ;而机制可能与灵芝多糖提高红细胞SOD活性、降低血浆 MDA含量、抑制血液脂质过氧化增强有关。

灵芝多糖肽对Alzheimer样大鼠海马超微结构和抗氧化能力的影响

目的观察灵芝多糖肽(GLPP)对Alzheimer样大鼠海马超微结构、海马组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量以及空间学习记忆能力的影响。方法雄性Wistar大鼠60只,随机分为对照组、模型组、NS组、GLPP组,每组15只。除对照组(正常昼夜节律)外,其余各组每天连续光照(光照度400Lux)24h,共30d。其间GLPP组每天1次灌胃GLPP(250mg/kg);NS组灌胃相同体积的生理盐水。光照30d后Morris水迷宫法测试各组大鼠空间学习记忆能力,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,硫代巴比妥酸比色法测定MDA含量,透射电镜观察海马线粒体和突触结构的改变。结果寻台潜伏期模型组大鼠较对照组明显延长(P<0.05),GLPP组较模型组明显缩短(P<0.05);NS组与模型组比较无显著差异。模型组较对照组海马SOD活性降低、MDA含量升高(P<0.05);GLPP组较模型组SOD活性升高、MDA含量降低(P<0.05);NS组SOD活性降低、MDA含量升高,与模型组比较无显著差异。透射电镜结果显示:对照组、GLPP组大鼠海马线粒体神经轴突和神经突触基本正常;模型组和NS组大鼠海马线粒体膜结构破坏,线粒体肿胀,线粒体嵴模糊、消失,结构紊乱,神经髓鞘内神经细丝稀少,神经突触缺失、减少,突触密度降低,突触间隙不清,突触小泡减少。结论GLPP可防止持续光照对大鼠海马超微结构的破坏和减轻Alzheimer样大鼠的空间记忆障碍。

家兔肝缺血再灌注损伤时NO、ET-1和炎症细胞因子的变化及灵芝多糖的干预作用

目的观察家兔肝缺血再灌注损伤(HIRI)时一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)和炎症细胞因子的变化以及灵芝多糖(GLP)的干预作用及机制。方法 30只健康家兔随机分为3组:假手术对照组(S组)、生理盐水再灌注组(NS组)和灵芝多糖再灌注组(GLP组)。复制家兔肝缺血再灌注损伤动物模型,分别测定缺血前、缺血45 min、再灌注45 min时血浆NO、ET-1、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的水平,并于实验结束后测定肝组织中NO、ET-1水平,光镜下观察肝组织形态学改变。结果与S组比较,NS组血浆及肝组织NO水平显著降低(P<0.05),ET-1水平升高(P<0.05),NO/ET-1降低(P<0.05),血浆TNF-α、IL-6水平均升高(P<0.05);与NS组比较,GLP组血浆及肝组织NO水平升高(P<0.05),ET-1水平降低(P<0.05),NO/ET-1增高(P<0.05),而血浆TNF-α及IL-6的水平均明显降低(P<0.05);与NS组比较,GLP组肝组织形态学损伤明显减轻。结论灵芝多糖可通过调整NO/ET-1的平衡、降低TNF-α及IL-6水平而发挥对肝缺血再灌注损伤的保护作用。

灵芝多糖肽对Alzheimer样大鼠海马Aβ含量和超微结构的影响

目的:观察灵芝多糖肽(GLPP)对Alzheimer样大鼠海马Aβ含量及海马线粒体和神经突触的影响。方法:♂性Wistar大鼠120只,随机分为8组,每组15只:正常对照组、模型组、NS组、GLPP组(按不同剂量50mg/kg、250mg/kg和1250mg/kg分为GLPP1、GLPP2和GLPP3组)、Mel组和DMSO组;除正常对照组(正常昼夜节律)外,其余各组连续光照(光照度400Lx,24h)30d,其间GLPP组按不同剂量igGLPP,每天1次;NS组ig相同体积的生理盐水,每天1次;Mel组ipMel(1.0mg/kg),每天1次;DMSO组ip相同体积的DMSO,每天1次。光照30d后Morris水迷宫法测试各组大鼠空间记忆能力,放免法检测海马Aβ含量,透射电镜观察海马线粒体和突触结构的改变。结果:模型组大鼠寻台潜伏期明显延长,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05);GLPP2组、GLPP3组和Mel组寻台潜伏期明显缩短,与模型组比较有显著差异(P<0.05);GLPP1组、NS组和DMSO组寻台潜伏期明显延长,与模型组比较无显著差异(P>0.05)。模型组大鼠海马Aβ含量增多,与正常对照组比较有显著差异(P<0.05);GLPP2组、GLLP3组和Mel组大鼠海马Aβ含量减少,与模型组比较有显著差异(P<0.05);GLLP1组、NS组和DMSO组大鼠海马Aβ含量升高,与模型组比较无显著差异(P>0.05);透射电镜结果显示:正常对照组、GLPP2组、GLLP3组和Mel组大鼠海马线粒体神经轴突和神经突触基本正常;模型组、GLPP1组、NS组和DMSO组大鼠海马线粒体膜结构破坏,线粒体肿胀,线粒体嵴模糊、消失,结构紊乱,神经髓鞘内神经细丝稀少,神经突触缺失、减少,突触密度降低,突触间隙不清,突触小泡减少。结论:中剂量和高剂量GLPP可减少Alzheimer样大鼠海马Aβ含量,并可防止持续光照对大鼠海马超微结构的破坏和减轻Alzheimer样大鼠的空间记忆障碍;而低剂量的GLPP则无上述作用。

蝌蚪提取液诱导HL_(60)细胞分化和凋亡的实验研究

目的为了寻找新的肿瘤细胞分化诱导剂，探讨蝌蚪醚提取液（Ｔ８７１２）的抗肿瘤作用。方法将ＨＬ６０细胞培养于Ｔ８７１２和ＲＰＭＩ１６４０按１：２００（ｖ／ｖ）混合的培养基中。结果Ｔ８７１２能诱导ＨＬ６０细胞向单核／巨噬细胞方向分化，表现为生长抑制，ＮＢＴ还原能力提高，酸性非特异性酯酶（ＡＮＡＥ）活性增加，形态学观察类似单核／巨噬细胞。当Ｔ８７１２与ＲＰＭＩ１６４０培养基按１：１００（ｖ／ｖ）混合则可诱导ＨＬ６０细胞凋亡，如出现凋亡的形态学特征（凋亡小体出现等）；ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳显示典型的阶梯型带；流式细胞式分析证明凋亡细胞数增加，但Ｂｃｌ－２蛋白未有明显改变。结论Ｔ８７１２能抑制ＨＬ６０细胞增殖，在不同浓度条件下可诱导ＨＬ６０细胞向单核／巨噬样细胞分化或发生凋亡，其凋亡过程可能与Ｂｃｌ－２无明显相关性。

佛波酯对人早幼粒白血病细胞系细胞分化和凋亡的诱导作用

目的 :探讨佛波酯 (TPA)对人早幼粒白血病细胞系 (HL - 6 0 )分化和凋亡的影响。方法 :利用TPA体外培养HL - 6 0细胞 ,依据形态学和细胞化学的变化 ,DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪等技术进行分析。结果 :7 2× 10 -6mol/L的TPA可使HL - 6 0细胞出现向单核 /巨噬细胞分化的形态特征 ,随培养时间延长 ,可见HL - 6 0细胞核固缩、染色体断裂、凋亡小体形成等细胞凋亡的形态学改变。TPA处理 2 4h可使酸性非特异酯酶 (α -NAE)的活性和四氮唑蓝 (NBT)还原能力显著增强 ,DNA琼脂糖凝胶电泳显示典型的“梯子”状带纹。TPA处理 0、2 4、4 8h凋亡细胞百分数分别为 (4 31± 1 2 3) %、(15 10± 1 31) %和 (2 3 2 0± 3 36 ) % ,在整个实验过程中细胞周期时相、Bcl-2蛋白含量无明显变化。结论 :TPA可诱导HL - 6 0细胞向单核 /巨噬样细胞分化与凋亡 ,且此凋亡过程可能与细胞周期时相、Bcl- 2蛋白无关。

顺铂致大鼠急性肾功能衰竭时肾皮质脂质过氧化的变化

目的 观察不同剂量顺铂致大鼠急性肾衰时肾皮质脂质过氧化的变化 ,探讨顺铂肾毒性的发生机制。方法 雌性Wistar大鼠随机分为生理盐水组、顺铂Ⅰ组、顺铂Ⅱ组、顺铂Ⅲ组 ,均为尾静脉注射给药 ,每d 1次 ,连续 5d。第 6d取血测肌酐 (Scr)、尿素氮 (BUN)、肾皮质组织丙二醛 (MDA)含量、超氧化物歧化酶 (SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH -Px)活性。结果 顺铂组血清Scr、BUN明显升高 ,肾皮质组织MDA含量升高 ,SOD与GSH -Px活性降低 ,与对照组相比均有显著差异 (P <0 0 5 ) ,且肾皮质组织SOD活性、GSH -Px活性与血清Scr、BUN含量呈明显负相关 (P <0 0 5 ) ,肾皮质组织MDA含量与血清Scr、BUN含量呈明显正相关 (P <0 0 5 )。结论 顺铂引起急性肾功能衰竭与肾皮质脂质过氧化增强有关 。

灵芝多糖对兔失血性休克血液流变学的实验研究

目的 :研究家兔失血性休克和再灌注时血液流变学特性的变化及灵芝多糖 (GLP)的影响和可能机制。方法 :复制家兔失血性休克再灌注 (HS -R)模型 ,观察休克和再灌注过程中血浆脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)、PH值、红细胞超氧化物歧化酶 (SOD)活性、全血粘度、血浆粘度、血细胞压积 (HCT)及红细胞变形能力的变化以及GLP对上述指标的影响。结果 :与休克前相比 ,休克时血浆MDA、全血粘度、血浆粘度、血细胞压积均明显升高 (P <0 .0 5 ) ,红细胞SOD活性和红细胞变形能力及血浆PH值则明显降低 (P <0 .0 5 ) ;生理盐水 (N -S)再灌注时可明显降低休克时全血粘度、血浆粘度和血细胞压积 (P <0 .0 5 ) ,而血浆MDA进一步升高 ,红细胞SOD活性、红细胞变形能力和血浆PH值与休克时相比则进一步降低 (P <0 .0 5 ) ;GLP再灌注时可明显逆转休克时上述指标的变化 (P <0 .0 5 )。结论 :GLP可明显改善HS -R时的血液流变学特性 ,改善微循环 ,对HS -R损伤起保护作用 ,其机制可能为GLP提高红细胞SOD活性、抑制脂质过氧化。

灵芝多糖对失血性休克兔一氧化氮及肠黏膜损伤的影响

目的观察失血性休克再灌注时NO、NOS的变化与肠黏膜损伤的关系及灵芝多糖(GLP)的影响。方法复制家兔失血性休克再灌注模型,随机分成假手术组(S组)、生理盐水再灌注组(NS组)和质量分数为1%的GLP再灌注组(LS组),分别于放血前、休克40min、再灌注40min和90min时观察细菌移位情况及血浆NO含量;于再灌注90min时,检测肠黏膜NOS活性、NO的含量;同时取回肠末端观察肠黏膜的损伤情况。结果①随着再灌注时间的延续,NS组血液细菌阳性率增加,细菌移位增加,明显高于LS组和S组,再灌注90min时肠黏膜损伤也明显重于LS组和S组;②休克40min时,NS组和LS组血浆NO含量明显高于S组和休克前,NS组再灌注后血浆NO进一步升高,明显高于LS组,肠黏膜NO含量和NOS活性也明显高于S组和LS组。结论GLP可降低失血性休克再灌注过程中NOS活性、NO含量以及肠黏膜损伤。

不同方法制备的蝌蚪提取液对HL-60细胞的作用

为探讨不同方法制备的蝌蚪提取液对ＨＬ６０细胞作用的差异，利用水提法、醚提法、醇提法制备不同的蝌蚪提取液，依次称为Ｔ８７１１、Ｔ８７１２（此二者均为水提法制备，区别在于前者在水提的基础上用盐酸沉淀去除酸性蛋白）、Ｔ８７１３、Ｔ８７１４，分别将其以不同浓度与ＲＰＭＩ１６４０培养基混合，以培养ＨＬ６０细胞。结果显示：几种蝌蚪提取液对ＨＬ６０细胞的生长均有抑制作用，且在一定范围内呈浓度依赖性，其中以Ｔ８７１３的抑制效应最显著。经蝌蚪提取液作用后，Ｗｒｉｇｈｔ染色显示ＨＬ６０细胞的形态表现为向单核／巨噬样细胞分化的特征，细胞还原硝基蓝四氮唑盐（ＮＢＴ）的能力和酸性非特异性酯酶（αＮＡＥ）的活力均显著提高。提示蝌蚪提取液可抑制ＨＬ６０细胞增殖，并且诱导其向成熟的单核／巨噬样细胞分化。

MAGE-3原核重组表达载体的构建和表达

目的构建原核重组表达载体pGEX-4T-1-MAGE-3并检测其在大肠杆菌(E.coli)BL21中的表达。方法RT-PCR法制备MAGE-3目的基因,采用DNA重组技术将其克隆至pGEM-TEasy和亚克隆至pGEX-4T-1载体,转化E.coliBL21株,经IPTG诱导,12%SDS-PAGE电泳分离和Western Blot表达鉴定。结果扩增出349bp的MAGE-3目的基因并构建了原核重组表达载体pGEX-4T-1-MAGE-3;测序结果与Gen Bank收录序列相一致;在E.coli BL21中检测到含该重组表达载体的转化菌表达出分子量约35kD的融合蛋白并证实其为目的蛋白。结论成功构建的原核重组表达载体pGEX-4T-1-MAGE-3及其所表达的融合蛋白,为以MAGE-3为基础的肽疫苗及特异诊断试剂的研制提供抗原打下了基础,为后续实验提供了依据。

MAGE-3基因片段真核表达质粒的构建

目的克隆人MAGE-3基因片段,以构建真核重组表达质粒pcDNA3.1-MAGE-3,为制备以MAGE-3基因片段为基础的核酸疫苗及探讨相关的肿瘤免疫治疗提供实验依据。方法RT-PCR法从肝癌组织制备出含BamHI、EcoRI酶切位点的MAGE-3基因片段,pGEM-TEasy为克隆载体,pcDNA3.1为真核表达载体,采用DNA重组技术,将目的基因先克隆至pGEM-TEasy载体再亚克隆至pcDNA3.1载体上,然后,据氨苄青酶素(Amp)抗性、蓝白筛选实验、克隆鉴定引物T7/SP6PCR扩增方法鉴定阳性克隆,并对阳性克隆pcDNA3.1-MAGE-3中的插入序列进行DNA测序。结果扩增出了MAGE-3目的基因片段;经蓝白筛选实验、克隆鉴定引物扩增方法鉴定得到重组子pGEM-T-MAGE-3;引物扩增方法鉴定得到重组子pcD-NA3.1-MAGE-3;DNA测序后与GenBank中MAGE-3相应序列比较,结果完全一致。结论成功构建了重组pcDNA3.1-MAGE-3肿瘤核酸疫苗,为肿瘤免疫治疗提供了条件。